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《海南大学》 2014年
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调控巴西橡胶树蔗糖转运蛋白基因HbSUT3和HbSUT5表达的转录因子的克隆

张义  
【摘要】:蔗糖是巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)乳管细胞合成橡胶最重要的碳源和能源物质,所以乳管中蔗糖的装载作用是决定橡胶树产量的一个关键环节。已经知道乳管细胞的蔗糖装载主要由蔗糖转运蛋白基因HbSUT3和HbSUT5来负责。理论上来讲,调控橡胶树产量的关键转录因子也可能调控了HbSUT3或HbSUT5的表达。转录因子可以调控代谢途径中多个基因的协同表达,其基因的克隆将为橡胶树遗传改良提供更有效的候选基因。 另一方面,在乳管中HbSUT3和HbSUT5虽然功能相似,却有着截然不同的表达模式,揭示具体分子调控机理将是一项非常有趣的工作。 本研究首次克隆出多个调控HbSUT3、HbSUT5表达的转录因子,不仅初步揭示了HbSUT3、HbSUT5不同表达模式的调控机理,还为筛选决定橡胶树产量的关键转录因子奠定了基础。主要结果如下: 1.成功构建了橡胶树胶乳均一化全长cDNA文库; 2.利用酵母单杂交技术,分别以HbSUT3、HbSUT5的启动子为诱饵从胶乳均一化cDNA文库中筛选得到了20个阳性的候选基因; 3.利用adaptor-PCR技术,克隆了其中五个乙烯信号途径相关转录因子的启动子; 4.利用实时荧光定量RT-PCR技术,研究了这些候选基因的表达模式; 5.利用原生质体瞬时表达技术,鉴定了这些候选基因的亚细胞定位和反式激活活性,发现除HbDNAJ外,筛到的其他候选基因都具有典型转录因子的功能。 6. HbSUT3在胶乳中的表达主要受HbERFl的调控,而HbSUT5在胶乳中的表达受到多种转录因子的调控。
【学位授予单位】:海南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:S794.1

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