收藏本站
《海南大学》 2016年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

硫醇—烯点击修饰半胱氨酸功能化透明质酸通过氧酯自然化学连接形成可注射原位水凝胶哌嗪法固相合成胸腺五肽

张响  
【摘要】:透明质酸,也叫玻尿酸,是一种天然存在的非硫酸化线性阴离子糖胺聚糖,广泛分布于人体中,如关节腔滑液,眼睛玻璃体和以及真皮层中,并起着许多重要的生理作用,这些表明了透明质酸是一种重要的天然生物大分子。然而,透明质酸在体内迅速被透明质酸酶分解,在组织中半衰期较短,这限制性了其作为具有生物相容性,生物降解性和非免疫原性天然聚合物的应用。透明质酸的化学修饰现已被用来克服上述不足,延长透明质酸在体内的停留时间,并保持其作为生物大分子所具有的生物相容性,黏弹性质以及药理和治疗特性。本课题提出一种新颖,有效而且温和的方法,通过形成稳定的醚键对透明质酸N-乙酰-D-葡萄糖胺的伯醇羟基进行化学修饰得到一系列的半胱氨酸透明质酸结合物。本课题中首次采用冷冻干燥的方法对透明质酸N-乙酰-D-葡萄糖胺的伯醇羟基进行烯丙基缩水甘油醚系列功能化修饰,得到七组不同修饰率的烯丙基透明质酸结合物。考虑到透明质酸的羧基与细胞CD44受体的相互作用的重要性而不改变其羧基所带负电荷,并且烯丙基缩水甘油醚与透明质酸开环形成稳定的醚键是在冻干过程中完成的。硫醇-烯点击化学具有产率高,兼容水、氧环境等优点。运用硫醇-烯点击化学对上述合成的一系列烯丙基透明质酸结合物进行半胱氨酸化修饰,在紫外的条件下得到半胱氨酸透明质酸结合物。N-末端半胱氨酸化合物和酯类化合物在生理条件下(磷酸盐缓冲溶液,pH 7-9)混合后,半胱氨酸的巯基和酯类化合物的醇发生交换,形成一个五圆环的中间体后自发地重排,产生一个新的酰胺键,这个化学反应称之为氧酯介导自然化学连接。它克服了许多NCL的早期限制,包括离去硫醇基团、缓慢反应动力学以及细胞毒性的,在化学交联形成水凝胶具有广阔前景。合成得到的半胱氨酸透明质酸结合物与四分枝聚乙二醇氧酯,通过氧酯介导自然化学连接形成具有活性巯基的水凝胶,增加了透明质酸的细胞黏附性,不仅可以用在细胞培养,而且巯基可与药物小分子结合,达到药物缓控释的目的,另外,硫脂结构中的醇在OMNCL反应时会释放到溶液中,在设计硫脂的时候,可以把这个醇设计为羟基化的药物或细胞生长因子的前体,从而在水凝胶形成的同时,释放这些药物或生长因子到水凝胶中,进一步增加了透明质酸在生物医药领域的应用范围。通过流变学研究所形成的水凝胶的流变学特性。将不同性状的水凝胶和细胞黏附因子结合为鼠RINm5f胰岛细胞的培养提供支架材料,用于探讨水凝胶在细胞支架材料中的应用。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)探究支架材料上的培养的鼠RINm5f胰岛细胞释放胰岛素的能力。总结上述实验的结果,分析得出透明质酸最适的修饰条件。本课题所采用的化学修饰透明质酸的方法形成的水凝胶,在细胞移植、组织移植,组织工程和再生医学具有广阔的研究前景。胸腺五肽是一种化学合成的五肽化合物(精氨酸-赖氨酸-天冬氨酸-缬氨酸-酪氨酸),为胸腺生成素Ⅱ的第32-36位的氨基酸残基片段,它的基本序列为H-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-OH,保留了胸腺生成素的生物学有效活性。胸腺五肽为一种免疫调节剂,对机体免疫功能具有双向调节作用,现已作为药物投放市场。因此,本课题采用固相法合成胸腺五肽,不仅具有良好的市场前景,而且还为建立多肽固相合成技术平台提供新的方法与思路。迄今为止,在多数Fmoc法固相合成多肽的文献与专利中,只有哌啶溶液被认为是可以接受的脱去氨基酸氨基上的Fmoc保护基的通用的脱保护试剂。然而,哌啶在现实工业生产和科学研究中存在诸多不足:哌啶为易制毒-2类化学品,受公安部门的严格管制;哌啶为无色液体,有吸湿性,能随水蒸气挥发,对二氧化碳敏感给储存运输过程中带了不便。因此,在固相合成胸腺五肽中需要一种简单、有效、成本低、原料易得的脱保护剂除去氨基酸上的Fmoc保护基。本文分别采用哌嗪和哌啶作为Fmoc的脱保护试剂,进行同步的固相合成胸腺五肽,并对每步中间体、最终胸腺五肽产物与标准品进行HPLC、质谱数据监控。结果发现这两种方法合成的产物没有区别。本课题选择用哌嗪作为固相合成胸腺五肽的脱保护剂具有创新性和突破性的,在使用方便性、价格、储存、运输等方面优越于长久以来使用的哌啶,并为以Fmoc为保护基的多肽固相合成中提供了一种方便,易得的脱保护试剂,从而为多肽合成工作者在固相合成中提供一种新的选择和思路。
【学位授予单位】:海南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R914

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 胡雪敏;;注射用胸腺五肽在我院的应用[J];基层医学论坛;2012年28期
2 张丰林;;胸腺五肽治疗恶性肿瘤患者的免疫指标初探[J];传染病信息;2000年01期
3 张绪清,王宇明,毛青,向德栋,马巧玉;胸腺五肽治疗慢性重型乙型病毒性肝炎的疗效评价[J];第三军医大学学报;2003年22期
4 周红华,马仁玲,黄海燕,濮社班,盛龙生;胸腺五肽一级结构的电喷雾质谱分析[J];西北药学杂志;2004年06期
5 钟晖东;李斌;陈伟强;;胸腺五肽对老年重型脑损害病人T淋巴细胞亚群的影响[J];广东微量元素科学;2006年06期
6 金樑;魏刚;陆伟跃;;胸腺五肽溶液稳定性考察[J];中国医药工业杂志;2007年10期
7 艾国;梅兴国;;胸腺五肽微球体外释放度的加速试验方法研究(英文)[J];Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences;2008年01期
8 陈君;庞杰;张春彦;许楠;;胸腺五肽配合治疗慢性阻肺38例疗效观察[J];中国民族民间医药;2009年02期
9 郑爱萍;王坚成;张烜;张强;;胸腺五肽酶降解机制的研究[J];中国药学杂志;2010年06期
10 陈兴旺;李健球;;胸腺五肽在重症肺炎中的应用[J];中国医药指南;2010年26期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 金樑;魏刚;徐凌洁;陆伟跃;;胸腺五肽溶液稳定性考察[A];2006第六届中国药学会学术年会论文集[C];2006年
2 曹志明;罗娅;周卓;田耀兰;李会贞;傅荣繁;;胸腺五肽在皮肤科中的应用[A];2013全国中西医结合皮肤性病学术年会论文汇编[C];2013年
3 曹志明;周卓;罗娅;;胸腺五肽在皮肤科中的应用[A];2014全国中西医结合皮肤性病学术年会论文汇编[C];2014年
4 韩香;顾军;王德心;;胸腺五肽的合成与临床应用进展[A];创新药物及新品种研究、开发学术研讨会论文集[C];2006年
5 曹志明;周卓;罗娅;;胸腺五肽在皮肤科中的应用[A];中华医学会第十八次全国皮肤性病学术年会论文汇编[C];2012年
6 郑爱萍;王坚成;张烜;张强;;胸腺五肽酶降解机制的研究[A];2008年中国药学会学术年会暨第八届中国药师周论文集[C];2008年
7 田金社;田鹏华;;胸腺五肽与乙肝疫苗联合肝复胶囊治疗慢性乙型肝炎[A];第十八次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2009年
8 李焱;王士勇;宋利;于环;张辉;杜微丽;陈维信;;恶性肿瘤患者免疫功能状况及胸腺五肽等的调节作用[A];第九届全国肿瘤生物治疗学术会议论文集[C];2006年
9 高静;储藏;张玮;丁雪鹰;范伟;高申;;胸腺五肽超临界微粉化制备吸入粉雾剂的研究[A];2009年中国药学大会暨第九届中国药师周论文集[C];2009年
10 高静;储藏;张玮;丁雪鹰;范伟;高申;;胸腺五肽超临界微粉化制备吸入粉雾剂的研究[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前3条
1 李海清;胸腺五肽不是胸腺肽的“兄弟”[N];健康时报;2004年
2 梁阿敏;百名老将军获赠和信胸腺五肽[N];科技日报;2005年
3 海文;质量、科研、品牌——“和信”成长的三驾马车[N];医药经济报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 贾羽洁;聚苯胺—聚对苯乙烯磺酸水凝胶基活性炭的制备与应用基础研究[D];中国林业科学研究院;2017年
2 杨伯光;聚噻吩基导电水凝胶研制及其在心肌组织工程中的应用研究[D];天津大学;2016年
3 郭新红;2-甲氧基雌二醇脂质纳米粒水凝胶的研究[D];沈阳药科大学;2012年
4 艾克热木.牙生;基于不同相互作用的形状记忆水凝胶的设计和性能表征[D];中国科学技术大学;2017年
5 高利龙;多官能度聚乙二醇衍生物的合成、凝胶化及其生物医学应用[D];浙江大学;2016年
6 余瀚森;利用动态共价键构筑可注射自修复水凝胶[D];中国科学技术大学;2017年
7 迟强;胸腺五肽及其酯化物贮库型注射剂的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年
8 李世军;胸腺五肽的化学—酶法合成及其脂质体缓释剂型研究[D];吉林大学;2008年
9 梁涌涛;甾体的合成及肽化研究[D];吉林大学;2008年
10 张松松;仿生减阻涂层的制备及性能研究[D];哈尔滨工程大学;2016年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张响;硫醇—烯点击修饰半胱氨酸功能化透明质酸通过氧酯自然化学连接形成可注射原位水凝胶哌嗪法固相合成胸腺五肽[D];海南大学;2016年
2 廖悦;光敏感自变形水凝胶作为无接触式3D宏观/微观光打印平台的研究[D];天津大学;2016年
3 裴月婷;包含碱基对的智能型超分子水凝胶的合成及应用[D];东北师范大学;2017年
4 张洁玲;3D打印双响应紫外光固化水凝胶及其形状记忆功能的研究[D];暨南大学;2017年
5 张海鸿;胸腺五肽的分析方法及药代动力学研究[D];天津大学;2006年
6 朱红燕;两种胸腺五肽制剂的实验研究[D];浙江大学;2012年
7 黄凌凌;胸腺五肽对大鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响[D];广西医科大学;2016年
8 赵毅;酶法与化学法相结合合成胸腺五肽前体三肽[D];吉林大学;2007年
9 赵玉红;注射用胸腺五肽的质量研究[D];吉林大学;2007年
10 王宏英;胸腺五肽原料药质量标准研究[D];吉林大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026