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《海南大学》 2012年
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拟堇花兰再生植株叶片胚状体诱导及染色体组加倍研究

李智  
【摘要】:Ionopsis utricularioides 为兰科(Orchidacea)拟堇花兰属(Ionopsis)多年生草本植物,为文心兰近缘种,观赏价值较高,常作为盆花栽培,并可作为兰花育种的优良亲本。本研究首先以Ionopsis utriculrioides花梗为外植体进行离体再生研究,使用试管苗叶片作为外植体诱导获得胚状体,最后用秋水仙碱溶液处理经胚状体诱导培养的外植体诱导同源四倍体。主要研究结果如下:(1)Ionopsis utricularioides花梗外植体最佳表面灭菌条件为0.1%氯化汞溶液处理1Omin;最佳丛生芽诱导培养基为花宝1号+6-BA3mg/L+NAA0.5mg/L;最佳增殖培养基为花宝1号+6-BA2mg/L+NAA0.5-1mg/L;最佳生根培养基为花宝1号+NAA1.5mg/L+蔗糖20g/L。(2)选用第3-4片叶作为胚状体诱导的外植体材料。最佳胚状体诱导培养基为花宝1号+TDZ2mg/L+NAA0.5-1.5 mg/L;最佳胚状体增殖培养基为花宝1号+TDZ1mg/L+NAA0.5 mg/L。经石蜡切片及体视镜观察发现:胚状体发生过程中,首先由单个细胞或少数细胞分裂形成胚性细胞团,并经过球形体细胞胚、类原球茎等阶段最终发育为完整的植株。(3)染色体组加倍最佳处理条件为200mg/L秋水仙碱溶液处理2d,处理后将外植体接种至增殖、分化培养基。得到的变异植株经流式细胞仪鉴定、气孔特征比较、植株形态观察,共确定四倍体植株21株。
【学位授予单位】:海南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:S682.31

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