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《海南大学》 2010年
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BTH诱导橡胶树对白粉病的抗性研究

罗婵娟  
【摘要】: 橡胶白粉病是橡胶的重要病害之一,由橡胶粉孢属(Oidium heveae B. A. Steinm)侵染引起,严重影响橡胶树生长和产量。诱导植物抗性是用生物和非生物因子激发植物的自身免疫力,达到防病的效果。利用诱导植物抗性来防治病虫草害已成为植保技术的新途径。 本研究通过盆栽试验,以橡胶品种热研7-33-97和白粉菌为试验材料,对BTH(苯并噻二唑)、PHDC(调环酸钙)、禾甲安和碧护4种诱导剂进行筛选,并选用有效诱导剂BTH对诱导间隔期、诱导次数和诱导抗性相关酶的活性进行了系列试验。同时利用SSH(抑制消减杂交)技术构建了BTH诱导的橡胶抗白粉病的叶片cDNA差减文库,分析BTH诱导后橡胶抗白粉病的基因表达情况,试图从分子水平揭示橡胶的抗病机制,为橡胶抗白粉病的防治和研究提供新方法。 研究结果如下: 1. BTH、PHDC、禾甲安和碧护4种诱导剂对橡胶白粉病均有一定的防治效果,其中BTH250mg/L和禾甲安500倍液的效果较好,分别为57.8%和51.4%,但BTH显著优于禾甲安和其它处理。 2.用BTH 250mg/L处理橡胶芽接苗,不同接种时间间隔实验结果表明,最佳诱导间隔期为5-11天,防治效果在33-57%,持续期至少11d。诱导后,随着接种间隔期的延长,诱导抗病性的效果也在减弱。 3. BTH 250mg/L处理并接种病原菌后,POD(过氧化物酶)和PAL(苯丙氨酸解氨酶)的活性比对照显著升高;当酶活性下降至与对照无差异时,进行第2次施药,POD、PAL的活性会再次升高,抗病性增强。 4.通过试剂盒RNAiso Reagent法、改良SDS法和改良CTAB-PVP法3种方法对橡胶叶片总RNA的提取进行比较后发现,采用改良SDS法能去除叶片中含有的胶乳,有利于抑制消减杂交文库的构建。 5.选用Clontech公司的PCR-select cDNA subtraction kit,构建了BTH诱导的橡胶抗白粉病叶片cDNA文库,并对SSH的各个关键步骤如接头连接效率、消减效率、转化效率等的检测结果显示,差减文库有较高的质量。 6.从文库中随机挑取42个阳性克隆进行测序,并在Genbank上对核酸序列比较后发现,在已知功能的核酸序列中,有能量和基础代谢类、信号转导类、膜和转运类和次生代谢类共21条序列和2条重复序列,未知功能的有14条序列,数据库中无显著匹配的有2条序列。 BTH通过诱导橡胶树叶片防御相关基因的表达,提高抗性相关酶的活性,有效控制橡胶树白粉病,为橡胶树白粉病防治提供了新的途径,也为进一步研究橡胶树防御基因的表达和信号转导等打下基础。
【学位授予单位】:海南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S763.7

【引证文献】
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【参考文献】
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