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《广西大学》 2012年
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人参皂甙Rg3不同构型免疫佐剂作用和抗氧化作用及其机理的研究

韦晓洁  
【摘要】:人参皂苷Rg3(ginsenoside-Rg3)属于原人参二醇型皂苷,是一种从人参(Panax ginseng C. A. Meyer)中分离提取出来的天然化合物。由于其对肿瘤细胞有很强的抑制作用,所以在人医临床被广泛用于治疗各种肿瘤疾病。Rg3在自然界中存在20-C键的两种差向异构体,即20(R)-Rg3和20(S)-Rg3,近年来研究表明两种Rg3异构体在许多免疫活性研究中存在显著差异。因此,本论文通过研究Rg3两种异构体的免疫佐剂作用、抗氧化作用和对巨噬细胞功能的调节作用,研究Rg3两种异构体的免疫学特性,并比较两者间免疫活性的差异。 1Rg3不同构型免疫佐剂作用的研究 目的:采用OVA作为模式抗原,探讨Rg3两种不同构型的免疫佐剂作用和对小鼠Thl/Th2免疫平衡的调节机制。方法:将32只BALB/c小鼠随机分为4组,分别为生理盐水对照组、OVA对照组、OVA+20(R)-Rg3佐剂组和OVA+20(S)-Rg3佐剂组。第一次免疫后,间隔3周再免疫第二次。分别采集一免和二免后第14天小鼠血液,并检测血清IgM抗体水平、IgG及其亚类抗体水平。二免后第14天,所有供试小鼠处死并分离培养脾脏淋巴细胞,RT-PCR法检测OVA抗原刺激后脾淋巴细胞中相关细胞因子的表达;采用MTT法测脾淋巴细胞增殖试验;Western-blot法检测血清中细胞因子的表达。结果:20(R)-Rg3或20(S)-Rg3做为免疫佐剂与OVA对照组相比,均能显著提高小鼠一免和二免后血清中抗OVA特异性IgG及其亚类(IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3)和IgM水平;促进小鼠脾淋巴体外增殖(P0.05);显著增强细胞因子Interleukin-4(IL-4), Interleukin-10(IL-10), Interferon-y (IFN-y), Interleukin-12(IL-12)以及核转录因子T-bet和GATA-3的表达(P0.05);显著增强血清中细胞因子Interleukin-5(IL-5)和Interferon-γ (IFN-γ)的表达(P0.05)。且OVA+20(R)-Rg3组各项指标均优于OVA+20(S)-Rg3组。结果表明,20(R)-Rg3和20(S)-Rg3均具有明显的免疫佐剂效应,并且能调节机体Th1/Th2免疫平衡,20(R)-Rg3免疫佐剂效果优于其异构体20(S)-Rg3。 2Rg3不同构型抗氧化作用的研究 目的:用环磷酰胺(Cyclophosphamide Cy)建立小鼠免疫抑制模型,在此基础上应用20(R)-Rg3和20(S)-Rg3处理小鼠,观察20(R)-Rg3和20(S)-Rg3对免疫抑制小鼠胸腺指数、脾脏指数、酸性磷酸酶(Acid Phosphatase ACP)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase SOD)、一氧化氮(Nitric Oxide NO)、溶菌酶(Lysozyme LZM)、总抗氧化能力(Total Antioxidant Capacity T-AOC)、黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase XOD)、过氧化氢酶(Catalase CAT)和丙二醛(Malondialdehyde MDA)等免疫学和抗氧化指标的影响,探讨20(R)-Rg3和20(S)-Rg3对小鼠抗氧化能力的调节作用。结果:20(R)-Rg3或20(S)-Rg3均可提高由Cy诱导的免疫抑制导致降低的小鼠胸腺指数、脾脏指数、ACP活性、SOD活性、LZM活性、T-AOC和CAT活性;降低Cy诱导的NO、XOD活性和MDA水平的升高。结果表明,20(R)-Rg3和20(S)-Rg3均能对抗Cy诱导的小鼠免疫抑制,具有明显的抗氧化作用,20(R)-Rg3抗氧化活性优于其异构体20(S)-Rg3。 3Rg3不同构型对巨噬细胞功能调节作用的研究 目的:体外分析20(R)-Rg3和20(S)-Rg3对巨噬细胞系RAW264.7(?)乎吸爆发和吞噬活性的影响及诱导鼠源巨噬细胞的细胞因子(IL-10和TNF-α)和Nuclear factor kappa B (NF-κB)分泌的作用。方法:实验一经20(R)-Rg3或20(S)-Rg3预培养的RAW264.7,用二氢诺丹明(Dihydrorhodaminel23DHR)处理后,与粉红色荧光乳胶微球共同培养,由于细胞的呼吸爆发作用可引起细胞内本身不发光的DHR转化为发绿色荧光的诺丹明(Rhodamine ROD),用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜同时测定粉红色荧光(代表细胞吞噬或粘附粉红色荧光微球的数量)和绿色荧光(间接反应了细胞呼吸爆发的力度),以检测20(R)-Rg3和20(S)-Rg3对巨噬细胞Raw2647呼吸爆发和吞噬活性的影响。实验二以Raw-blue cells作为研究对象,分别加入不同浓度的20(R)-Rg3或20(S)-Rg3(1、10、100μg/m1)以刺激细胞,然后从细胞培养上清中检测分泌型碱性磷酸酶(SEAP)的表达。实验三以不同浓度的20(R)-Rg3或20(S)-Rg3(1、10、100μg/ml)刺激RAW264.7,并收集细胞,用RT-PCR法检测细胞分泌的细胞因子Interleukin-10(IL-10)水平和Tumor necrosis factor-α (TNF-α)水平。结果:20(R)-Rg3能显著提高RAW264.7的呼吸爆发作用和吞噬活性(P0.05),相反,20(S)-Rg3显著抑制了正常RAW264.7的呼吸爆发作用和吞噬活性(P0.05);20(R)-Rg3或20(S)-Rg3刺激细胞内NF-κBB的活化随浓度的不断增大而降低,但不受LPS特异性抑制剂PMB抑制,且20(R)-Rg3刺激细胞内NF-κB的活化程度大于20(S)-Rg3(P0.05);体外20(R)-Rg3或20(S)-Rg3刺激细胞内TNF-a和IL-10的分泌随浓度的不断增大而降低。与20(S)-Rg3相比,20(R)-Rg3能显著刺激细胞内TNF-a和IL-10的分泌(P0.05)。结果表明,20(R)-Rg3可能是通过增强细胞呼吸爆发作用和吞噬作用清除机体内的活性氧自由基,发挥抗氧化作用,但20(S)-Rg3抑制细胞呼吸爆发作用和吞噬作用的机制有待进一步研究。 综上所述,20(R)-Rg3的免疫佐剂作用、抗氧化能力和巨噬细胞调节作用都优于20(S)-Rg3,是一种理想的免疫调节剂。
【学位授予单位】:广西大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R285

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 骆艳秋;尹柏双;徐文勇;姜成;;人参叶皂甙对鸡免疫功能调节的研究[J];安徽农业科学;2008年01期
2 张丽媛;吴铁;;人参皂苷Rh_2抗肿瘤作用机制的研究进展[J];安徽农业科学;2008年04期
3 何苗;;人参总皂苷对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维的保护作用[J];安徽医药;2011年04期
4 刘伟宏,龚守良,李新民,刘树铮;人参三醇组甙对雄性大鼠免疫器官的辐射防护作用[J];白求恩医科大学学报;1994年01期
5 陈燕;;鲜人参、生晒参和红参的比较研究[J];海峡药学;2006年04期
6 李萍,熊凡,富青,杨莉;一种简便的RNA完整性检测方法[J];湖北中医学院学报;2005年03期
7 陈宇;郑纯威;陈国江;张文娟;李端杨;胡松华;;人参皂苷Rg1免疫佐剂作用的研究[J];军事医学科学院院刊;2009年03期
8 胡银英;郭江梅;黄艳琴;袁芳;戴志芳;袁佳蕾;杨淑华;袁铿;;人参皂甙Rg3刺激淋巴细胞CD4上调以及对胃癌细胞MKN-45的杀伤作用[J];实验与检验医学;2011年01期
9 李欣;厉曙光;于晓楠;张晶;;人参拮抗DEHP对果蝇寿命及脂质过氧化的影响[J];环境与职业医学;2008年02期
10 安美花;安金花;;人参研究进展[J];宁夏农林科技;2010年06期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 尹丽慧,章圣辉,郎玮,叶人,吴建波,蔡慎初;中药方剂1号对胃癌细胞体外生长及细胞周期的影响[J];癌变.畸变.突变;2005年04期
2 秦粉菊;袁红霞;;大蒜油对衰老小鼠与免疫力低下小鼠作用的研究[J];安徽农业科学;2007年03期
3 张丽媛;吴铁;;人参皂苷Rh_2抗肿瘤作用机制的研究进展[J];安徽农业科学;2008年04期
4 杜迎刚;苗青;;人参安全食效性研究[J];安徽农业科学;2008年25期
5 苏建青;褚秀玲;李俊霞;付本懂;申海青;韦旭斌;;中性红染色法检测人参皂苷及其衍生物对CEF增殖的影响[J];安徽农业科学;2009年35期
6 李玉赜;张连学;姚允怡;齐宪辉;郜玉钢;;人参皂苷抗梅花鹿源BVDV研究[J];安徽农业科学;2011年23期
7 何苗;;人参总皂苷对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维的保护作用[J];安徽医药;2011年04期
8 许晓洲;苏丽;凡巧云;;复方守宫散联合放疗化疗治疗局部晚期非小细胞肺癌90例[J];安徽中医学院学报;2010年03期
9 雷秀娟;冯凯;孙立伟;姜锐;申野;李昌禹;王英平;;人参皂苷抗衰老机制的研究进展[J];氨基酸和生物资源;2010年01期
10 李柏,凌昌全;中药诱导实体肿瘤细胞分化研究近况[J];浙江中医学院学报;2002年06期
中国重要会议论文全文数据库 前9条
1 胡莹;王卓远;杨凌;;人参皂苷Rb3水解酶的分离纯化及其性质研究[A];中国资源生物技术与糖工程学术研讨会论文集[C];2005年
2 曹永国;邓旭明;曾胜;安娜;宋宇;谢光洪;许超;周昌芳;;Caffeoyl Glycoside对小鼠免疫细胞功能的影响[A];中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2008年
3 张成虎;柏宁军;罗晓琴;;人参总皂苷及其衍生物对小鼠巨噬细胞功能的影响[A];首届中国兽药大会动物药品学暨中国畜牧兽医学会动物药品学分会2008学术年会论文集[C];2008年
4 吴皓;林洪生;裴迎霞;祁鑫;吕诚;赵林华;肖诚;;人参皂甙Rg3对荷瘤及环磷酰胺化疗小鼠黏膜PP结及固有层淋巴细胞亚群的影响[A];第十届全国中西医结合肿瘤学术大会论文汇编[C];2006年
5 杜卫东;屠巍巍;华晨;赵士冲;孙传;;人参皂苷Rg3对结肠癌细胞株HT-29基质金属蛋白酶-1表达和迁移能力的影响[A];第五届中国中西医结合围手术期医学研讨会论文集[C];2010年
6 郭小青;;刘锋教授以青黄散为主治疗骨髓增生异常综合征经验[A];全国中西医结合血液学学术会议论文汇编[C];2010年
7 哈木拉提.吾甫尔;木拉提.克扎衣别克;阿里木江·艾山;;天然药物抗肿瘤活性成分的研究概况[A];肿瘤病因学研究与中西医结合肿瘤综合诊疗交流研讨会论文集[C];2009年
8 宋小妹;蔡宝昌;;珠子参化学成分和药理活性研究进展[A];中华中医药学会中药炮制分会2008年学术研讨会论文集[C];2008年
9 郭春燕;明亮;刘微;张敏;何俊霞;哈斯苏荣;吉日木图;;骆驼宝克的研究进展[A];2012中国驼业进展[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 柳风祥;中药提取物免疫调节作用的研究及多糖的提取分离鉴定和分子量测定[D];山东农业大学;2009年
2 谢利红;~(60)COγ射线照射对豚鼠耳蜗损伤及乙酰半胱氨酸辐射防护的实验研究[D];广西医科大学;2011年
3 周洪玉;生脉注射液药效物质基础研究[D];吉林大学;2011年
4 付伟;中日金星蕨和金星蕨苷生物活性研究[D];华中科技大学;2011年
5 周英武;人参皂苷Rg1对树突状细胞效应与分子机制的研究[D];北京中医药大学;2011年
6 孙凤平;参芪复方对GK大鼠肾脏NF-κB及PPARγ的影响[D];成都中医药大学;2011年
7 程屹俊;人参不同层次化学物质组的绿色化学制备方法研究[D];华东理工大学;2011年
8 尹建华;清胰化积方对人胰腺癌肝转移的实验研究[D];复旦大学;2010年
9 吴欣芳;免疫1号方联合HAART对HIV/AIDS患者免疫功能及免疫异常激活影响的研究[D];中国中医科学院;2011年
10 阮长春;丙二酰基人参皂苷化学成分及其治疗2型糖尿病大鼠的药效学研究[D];吉林农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 梁圆圆;GSH、过氧化氢酶抑制TGF-β_2诱导兔晶状体上皮细胞凋亡及间质化研究[D];郑州大学;2010年
2 杨旭初;三种中药制剂促化疗增敏作用的体外实验[D];郑州大学;2010年
3 高立凡;七味白术散对HRV感染乳鼠小肠粘膜上皮细胞的保护作用及iEL IκB、NF-κB表达的影响[D];湖南中医药大学;2010年
4 李金明;人参皂苷Rh_2静脉注射亚微乳的研究[D];中国海洋大学;2010年
5 杨金丽;妇癌灵贴片的制备及质量标准研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
6 掌莉;人参养荣汤联合TE化疗方案治疗乳腺癌晚期气血两虚型的临床研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
7 付颖;补髓生血颗粒治疗慢性再生障碍性贫血及对信号转导相关酶Btk的影响[D];黑龙江中医药大学;2010年
8 武艳红;分子光谱结合高效液相色谱研究人参根不同部位的差异性[D];华东理工大学;2011年
9 肖晏婴;竹节参茎叶中脂溶性成分的研究[D];武汉工业学院;2010年
10 彭珍华;云南栘衣有效成分提取纯化工艺的研究[D];昆明理工大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张丽媛;吴铁;;人参皂苷Rh_2抗肿瘤作用机制的研究进展[J];安徽农业科学;2008年04期
2 孙峥;周紫阳;;吉林省人参产业发展探析[J];安徽农业科学;2008年23期
3 杜迎刚;苗青;;人参安全食效性研究[J];安徽农业科学;2008年25期
4 宛新安;孙国平;;免疫机制逆转肿瘤多药耐药的研究进展[J];安徽医药;2006年06期
5 冯璇;彭蕴茹;沈明勤;;归芪颗粒治疗肝纤维化的实验研究[J];安徽医药;2010年05期
6 曾小莉,涂植光;人参皂甙Rh_2对人肝癌细胞SMMC-7721的诱导分化作用[J];癌症;2004年08期
7 王莹,蔡东联;人参抗疲劳作用研究进展[J];氨基酸和生物资源;2005年03期
8 杨贵贞,鲍涛,富宁,耿排力;人参皂甙对体内外免疫调整作用的初步研究[J];白求恩医科大学学报;1983年03期
9 李新民,刘树铮,马兴元,徐景达;人参皂甙对大鼠离体腺垂体细胞促性腺激素分泌功能影响的研究[J];白求恩医科大学学报;1988年04期
10 陈声武,王岩,王毅,王丽娟,何忠梅,王本祥;人参皂苷Rg_1和Rh_1抗肿瘤作用的研究[J];吉林大学学报(医学版);2003年01期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 张艳;人参皂苷Rg3的抗疲劳作用研究[D];吉林大学;2007年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张月华;;应用高校液相色谱法从人参总皂甙中分离人参皂甙-Rb_1、-Rb_2、-Rc、-Rd_1及Rg_1[J];国外医药.植物药分册;1981年05期
2 横泽隆子;大浦彦吉;孙禄;;人参皂甙对糖、脂质和氨基酸代谢的作用[J];特产研究;1982年03期
3 ;人参皂甙g_1等标准品出口日本[J];药学实践杂志;1988年02期
4 李景道;张永鹤;朴惠善;金光洙;郑云花;李英哲;;仲坪人参茎叶皂甙成分分析[J];延边大学医学学报;1990年04期
5 曹直瑶;;人参皂甙对急性脑缺血脑内能量代谢的影响[J];湖南中医杂志;1993年03期
6 杨祖英,马兰,苏菊;保健食品中人参皂甙的测定方法[J];中国食品卫生杂志;1999年01期
7 刘华钢,肖柳华,陆中海,甄汉深;含人参皂甙的中药制剂含量测定研究进展[J];广西中医学院学报;2001年01期
8 王燕;马文强;;人参皂甙的生物学效应研究进展[J];饲料工业;2006年06期
9 徐建中;;对西洋参制品标准主要指标的研究[J];医药世界;2006年11期
10 赵文莉;张立实;李宁;;人参皂甙的药理及毒性作用研究进展[J];国外医学(卫生学分册);2008年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 慈光新;贾玉东;米玉玲;张才乔;;人参皂甙对鸡小黄卵泡细胞增殖的影响[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
2 富力;鲁歧;严惠芳;陆宏祺;王佾先;;人参皂甙Rg_3的免疫学作用的研究[A];中国自然资源学会全国第三届天然药物资源学术研讨会论文集[C];1998年
3 王秀;何裕民;;人参皂甙择时治疗H_(22)肝癌小鼠的疗效观察及机制探讨[A];2011年全国时间生物医学学术会议论文集[C];2011年
4 邹坤;朱姝;蔡少青;小松かつ子;;HPLC结合API-MS/MS研究扣子七的人参皂甙[A];2001’全国药用植物与中药院士论坛及学术研讨会论文集[C];2001年
5 蓝涛华;谭红梅;许志威;吴伟康;吴以岭;;人参皂甙及人参皂甙Rb1对高同型半胱氨酸诱导的血管内皮损伤的保护作用及其机制研究[A];第六届全国中西医结合基础理论研究学术研讨会暨第二届湖南省中西医结合学会肝病专业学术年会论文集[C];2010年
6 陆周翔;张勤;裘华森;;人参皂甙Rb1对小鼠肝切除术后疲劳影响的实验研究[A];第五届中国中西医结合围手术期医学研讨会论文集[C];2010年
7 陈英杰;刘承杏;傅希月;李静;;人胸腺细胞增殖与人参皂甙体外共同孵育的MTT比色法测定[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
8 富力;鲁歧;;人参皂甙Rg_3抗肿瘤作用机理的研究[A];中国自然资源学会全国第二届天然药物资源学术研讨会论文集[C];1997年
9 张勤;叶再元;陈瑜;;人参皂甙对老年病人术后应激反应和疲劳综合症影响的临床研究[A];2004年浙江省外科学学术年会论文汇编[C];2004年
10 周君;张恒艾;刘志杰;姚齐颖;姜春玲;;人参皂甙对ARF大鼠的肾保护作用与下丘脑MAPK通路激活的相关性[A];中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 张向永 李忠峰;东北人参“折戟”品牌战[N];市场报;2007年
2 杨年;妇女怀孕早期 补养慎服人参[N];民族医药报;2008年
3 赵安平;人参提取物抗疲劳保健品问世[N];中国中医药报;2007年
4 健康时报记者 赵安平;脑子不好是肚子使坏?[N];健康时报;2005年
5 记者 张林军;国内首个人参提取物抗疲劳保健品问世[N];大众科技报;2007年
6 记者 卢素仙;国内首个人参提取物抗疲劳保健品问世[N];科技日报;2007年
7 李洪;我国实现人参工业化提取[N];人民日报;2007年
8 王博凡 孙元进;抚松人参产业提速升级[N];吉林农村报;2007年
9 王博凡 孙元进;抚松加快人参产业提速升级[N];长白山日报;2007年
10 陈天葆;萝卜能否跟人参共吃[N];家庭医生报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陆政峰;人参皂甙Rg1强化嗅鞘细胞生物学行为的实验研究[D];苏州大学;2010年
2 曹发昊;复方人参皂甙纳米乳的制备及其免疫增强作用的研究[D];西北农林科技大学;2012年
3 曾小莉;人参皂甙Rh_2诱导人肝癌细胞分化及机理研究[D];重庆医科大学;2002年
4 巩丽;人参皂甙Rg1对绝经后妇女阿尔茨海默病细胞模型的神经保护作用及机理研究[D];山东大学;2010年
5 胡立强;人参皂甙Rb_1对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究[D];中南大学;2010年
6 廖进喜;核苷、碳苷、Daphnodorin B和人参皂甙的合成研究[D];中国科学技术大学;2011年
7 黄飞;人参皂甙Rb1调节AQP4表达在大鼠脊髓缺血再灌注损伤中作用的实验研究[D];吉林大学;2012年
8 苏晓川;人参皂甙Rg1对成人软骨细胞及膝骨性关节炎的影响[D];郑州大学;2013年
9 江莹;Nrf2/HO-1通路在人参皂甙Rb1减轻小鼠肠缺血再灌注致急性肺损伤中的分子机制[D];武汉大学;2012年
10 刘娟芳;人参皂甙Rd对实验性阿尔茨海默病的保护作用及机制研究[D];第四军医大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 钱伶凌;人参皂甙Rg3对乳腺癌细胞系的抑制作用[D];浙江工业大学;2010年
2 李欣;人参皂甙-Rg3的制备研究[D];南京工业大学;2003年
3 杜秀丽;人参锈腐菌中人参皂甙Rb_1水解酶的分离与性质研究[D];东北师范大学;2010年
4 巩秀丽;人参皂甙预处理对大鼠急性肺损伤的影响[D];河南科技大学;2011年
5 李培;人参皂甙Rb1的分离纯化及结构修饰[D];东北师范大学;2011年
6 李爱红;人参皂甙对缺血神经元的保护作用研究[D];苏州大学;2002年
7 王利;人参皂甙逆转K562/A02细胞耐药性的实验研究[D];重庆医科大学;2001年
8 马丽;人参皂甙Rd对脊髓缺血再灌注损伤的保护作用研究[D];第四军医大学;2010年
9 马丽;人参皂甙Rd对脊髓缺血再灌注损伤的保护作用研究[D];第四军医大学;2010年
10 商义;人参皂甙Rg1抑制人胃癌细胞增殖及机理研究[D];重庆医科大学;2010年
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