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《广西大学》 2001年
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猪瘟病毒广西流行株E_2基因扩增与反应条件的优化研究

韦栋平  
【摘要】:本研究引用HCV特异性引物A1/A2直接对来自广西部分地区58份疑似猪瘟病料 进行检测,其中34份为阳性,阳性率为58.32%。再根据已发表的猪瘟病毒核酸序列, 设计并合成4对EP1/EP4、EP2/EP3、EP3/EP7和EP5/EP6,以引物EP1/EP4和EP2/EP3或 EP3/EP7和EP5/EP6配对,应用RT-PCR技术分两段扩增猪瘟病毒全E2基因,并对反 应条件进行优化。结果显示:引物EP1/EP4和EP2/EP3只能扩增猪瘟兔化弱毒(HCV) 和石门系强毒而不能扩增广西流行株:EP3/EP7和EP5/EP6则可成功扩增出广西流行株 和另外两个毒株。反应条件中,反转录所需的总RNA量为10μ1(约20μg);PCR扩增 时,cDNA用量为12.5μl,正、负引物各用 50 Pmol,EP3/EP7和EPS/EP6引物对分别以 57℃t和61℃的退火温度PCR扩增35个循环,PCR产物量和扩增特异性句达到最佳水 平。 猪瘟病毒广西流行株E2基因的成功扩增和最佳反应条件的建立为今后E2基因的克 隆与序列分析及其更深入的研究奠定了实验基础。
【学位授予单位】:广西大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:S852.651

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 杜念兴;猪瘟的感染和免疫[J];畜牧与兽医;1991年02期
2 蔡宝祥;我国畜禽传染病防制研究的主要成就和发展动向[J];畜牧与兽医;2000年03期
3 王雯慧,陈怀涛;猪瘟流行的病因学分析与防制[J];中国兽医科技;2000年03期
4 杜念兴;猪瘟的回顾与展望[J];中国畜禽传染病;1998年05期
5 王新平,涂长春,李红卫,金扩世,宣华,常国权,孙红梅,朱维正,费恩阁,殷震;从疑似猪瘟病料中检出牛病毒性腹泻病毒[J];中国兽医学报;1996年04期
6 徐兰芳;温泽章;黄虎生;潭世钦;;猪瘟胎盘感染的研究——三、临床症状与病理变化[J];中国兽医杂志;1993年05期
7 黄瑜,魏振明,彭春香,黄纪铨,张洪光;繁殖障碍型猪瘟的诊断[J];中国兽医杂志;1997年02期
8 王宁,朱燕,张楚瑜;猪瘟病毒的分子免疫学研究进展[J];中国兽医杂志;1997年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 周艳芬;赵晓瑜;张玉;冯书亮;王容燕;;透明颤菌血红蛋白基因在苏云金杆菌中的表达[J];河北大学学报(自然科学版);2006年01期
2 刘元昀,薛晓英,杨永滨;用银染PCR-SSCP方法检测新鲜食管癌组织中p53基因的点突变[J];北京军区医药;1999年04期
3 华川;李苏利;李杨;王燕;;鲍曼不动杆菌87株感染和耐药性分析[J];华北国防医药;2007年05期
4 苏龙;韦宇拓;黄日波;;嗜热菌XZ2K2葡聚糖蔗糖酶基因的克隆与表达[J];化学与生物工程;2006年07期
5 王嘉慧;刘丽华;陈富荣;;禽脑脊髓炎病毒VP1、VP3、VP0基因表达载体的构建[J];化学与生物工程;2009年12期
6 曲凌云,张进兴,孙修勤;养殖牙鲆淋巴囊肿病流行状况与组织病理学研究[J];黄渤海海洋;1999年02期
7 曲凌云;吕颂辉;高春蕾;李艳;孙萍;孙修勤;;棕囊藻渤海株核糖体18S rDNA和ITS基因结构序列分析[J];海洋科学进展;2008年02期
8 杨应丽;;犬瘟热病毒研究进展[J];河北农业科学;2006年04期
9 胡兴年;;猪传染性胃肠炎的诊断与防治[J];河北农业科学;2008年04期
10 昌泽勋;BR316降解2.4—D的基因克隆[J];河北省科学院学报;1994年01期
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1 赵冬敏;B亚群禽白血病病毒分离株的生物学特性[D];山东农业大学;2010年
2 赵鹏;猪繁殖与呼吸综合征病毒在抗体选择压下的变异[D];山东农业大学;2010年
3 刘栋;畜禽补体C3d基因克隆及序列分析和重组鸡C3d免疫佐剂效果研究[D];山东农业大学;2010年
4 张青婵;A亚群禽白血病病毒不同分离株的基因组和生物学特性比较[D];山东农业大学;2010年
5 宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
6 黄馨;端粒缩短影响原发性高血压及其并发症的发生[D];北京协和医学院;2010年
7 张琪;KLT对中脑神经系统疾病的影响及KLT、NDV、SW联合抗肿瘤作用机制研究[D];西北农林科技大学;2010年
8 熊义;IRES调控α-干扰素的抗FMDV研究[D];武汉大学;2009年
9 孙亚妮;免疫组织化学技术在鸡三种病毒性肿瘤病鉴别诊断中的应用[D];山东农业大学;2011年
10 邱玉玉;A亚群禽白血病病毒单克隆抗体的制备和不同亚群禽白血病病毒共感染相互影响的研究[D];山东农业大学;2011年
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1 许媛媛;鸭瘟的动态病理学研究和鸭CD4的克隆[D];华中农业大学;2010年
2 李爽;鸭源禽呼肠孤病毒感染雏鸭的免疫病理学研究[D];华中农业大学;2010年
3 徐珊珊;重组杆状病毒介导的高致病性猪繁殖与呼吸综合征基因工程疫苗研究[D];华中农业大学;2010年
4 吴学宝;猪瘟病毒影响RANTES产生分子机制的研究[D];华中农业大学;2010年
5 胡智斌;湖北省高致病性猪蓝耳病活疫苗(JXA1-R株)试用报告[D];华中农业大学;2010年
6 许莹;H3N8型马流感血凝素核酸疫苗的初步研究[D];南京医科大学;2010年
7 邬成业;禽流感病毒H5N1亚型河南分离株NP基因的原核表达及T细胞表位筛选[D];郑州大学;2010年
8 史平玲;猪FcγRⅢ介导PRRSV抗体依赖增强作用研究[D];郑州大学;2010年
9 孟祥珍;潍坊地区猪“高热病”流行病学调查和防控[D];山东农业大学;2009年
10 王秀云;鸡传染性法氏囊病病毒山东株的分离鉴定及免疫预防研究[D];山东农业大学;2009年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李敬玺,王俊东,蔡建平,冯春花,王选年,王自良,董国栋,刘继兰,袁有申;硒对猪瘟疫苗强化作用的研究[J];畜牧兽医学报;1995年05期
2 王敏华,江金益,范必勤,赵启祖,谢庆阁;猪瘟病毒石门株基因组cDNA片断的扩增与克隆测序[J];畜牧兽医学报;1996年05期
3 周广森,王学玲,苗志兰,孙丽娟;用单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验监测猪瘟抗体发现隐性猪瘟[J];畜牧兽医学报;1997年04期
4 李红卫,涂长春,余兴龙,金扩世,吕宗吉,李茂祥,章金钢,殷震;猪瘟病毒保护性抗原E2基因的克隆及在原核细胞中的表达[J];畜牧兽医学报;1999年02期
5 蔡宝祥;畜禽传染病疫情动态及防制建议[J];畜牧与兽医;1999年02期
6 隆先觉;超剂量猪瘟疫苗防治猪瘟的试验[J];畜牧与兽医;1997年04期
7 王永康,张苏华;必须重视减少因疫病给我国畜牧业造成的损失[J];畜牧与兽医;1997年05期
8 李红卫,涂长春,吕宗吉,金扩世,殷震;两个猪瘟病毒野毒株gp55基因抗原编码区序列的分析及比较[J];中国病毒学;1997年04期
9 陈兴扶,郑增忍,何海权,王庆波;当前我国动物疫病防制工作的形势与任务[J];中国动物检疫;1995年04期
10 罗才文,熊进士,段载金,钟细苟;初乳前接种猪瘟疫苗预防猪瘟病效果观察[J];中国动物检疫;1999年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吕宗吉,李红卫,涂长春,余兴龙,吴健敏,李月红,殷震;我国部分地区猪瘟病毒流行株的基因差异[J];中国兽医学报;2000年04期
2 杨林;赵德明;;猪瘟病毒黑龙江流行株E2基因序列分析[J];黑龙江畜牧兽医;2006年04期
3 曾铭珠,唐翠英,杜坚,宁宗秋,黄红梅;广西猪瘟病毒的调查研究[J];广西科学;1994年03期
4 龚振华;王钰璇;刘坤;李维彬;祝丽;王玉东;李玉清;刘国庆;郑增忍;蒋正军;;一株猪瘟病毒田间株E0蛋白基因的克隆和序列分析的研究[J];中国动物检疫;2007年01期
5 廖素环,罗廷荣,吴显实,刘芳,陆芹章,黄伟坚,温荣辉,秦爱珍,余克伦;广西流行的猪瘟病毒株E2基因序列测定及分析[J];中国生物制品学杂志;2005年03期
6 孟庆玲,高 丰;猪瘟病毒及其分子流行病学研究进展[J];畜禽业;2001年11期
7 章金钢,涂长春,金扩世,李红卫,胡敬东,扈荣良,戴秉丽,殷震;猪瘟病毒反义基因在培养细胞上的效应研究——反义基因对猪瘟病毒的抑制作用[J];生物技术通讯;1995年02期
8 聂玉春,王镇,周海霞,邓宏魁,丁明孝;猪瘟病毒的形态结构及侵染机理的研究[J];电子显微学报;2002年05期
9 李春阳,单松华,华修国;应用RT-PCR技术快速检测鉴定猪瘟病毒[J];上海交通大学学报(农业科学版);2003年01期
10 杨林;赵德明;王秀荣;;猪瘟病毒流行株的分离鉴定[J];中国畜牧兽医文摘;2005年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 吕宗吉;涂长春;李红卫;余兴龙;吴健敏;李月红;殷震;;中国猪瘟病毒流行株的基因多态性研究[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(下册)[C];2001年
2 黄红梅;陈凤莲;华俊;袁书智;谢彬;覃绍敏;马玲;吴健敏;;广西猪瘟病毒流行现状及与HCLV免疫原性比较分析[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集[C];2008年
3 杨林;赵德明;王秀荣;;猪瘟病毒黑龙江流行株的分离鉴定(黑龙江地区猪瘟病原检测)[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
4 陆芹章;韦栋平;罗廷荣;刘芳;黄伟坚;温荣辉;廖素环;吴显实;余克伦;;广西流行猪瘟病毒的检测及E2基因扩增条件的优化[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
5 贾洪林;仇华吉;李国新;朱庆虎;李娜;童光志;;猪瘟病毒E~(rns)和E2基因的高效表达与E~(rns)-ELISA鉴别诊断方法的建立[A];中国生物化学与分子生物学会农业生物化学与分子生物学分会第六次学术交流会论文集[C];2004年
6 王琴;王在时;李博;丘惠深;郎洪武;;猪瘟病毒强弱毒株和野毒株E2全基因序列测定及比较分析[A];第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2001年
7 张富强;;猪瘟病毒糖蛋白E~(rns)中和表位的鉴定和比较[A];2004年中国科学院新生病毒性疾病控制学术讨论会摘要集[C];2004年
8 刘思国;涂长春;余兴龙;张茂林;刘伯华;吴健敏;;猪瘟病毒E2蛋白抗原单表位基因的融合表达及其免疫活性的研究[A];第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会——2005中国畜牧兽医学会学术年会论文集[C];2005年
9 郑小坚;;猪瘟病毒F114株E2基因在家蚕杆状病毒表达系统中的融合表达[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年
10 罗廷荣;廖素环;吴显实;余克伦;刘芳;陆芹章;黄伟坚;秦爱珍;温荣辉;;猪瘟病毒糖蛋白E2基因的分子生物学研究[A];广西微生物学会2003年学术年会论文集[C];2003年
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1 刘玉;世界最大压缩机供应商进驻广西[N];中国化工报;2003年
2 谭土生;广西实行疏导电价[N];中国化工报;2004年
3 冯威力;广西化工企业50年首遇大电荒[N];中国化工报;2004年
4 单 考;中国—东盟零距离商机[N];中国国门时报;2004年
5 记者 吴梅 通讯员 刘家国;农行与高峰集团全力打造广西林业航母[N];广西日报;2003年
6 本报记者 梁杰珍 方慧玲;让广西绿茶品牌扬名世界[N];广西日报;2005年
7 记者罗昌爱;广西推行“单位包村”成效显著[N];人民日报;2002年
8 本报记者 古亦忠;做强广西糖[N];人民日报;2003年
9 周华;广西:“开门”立出“同命同价”等良法[N];新华每日电讯;2006年
10 人文;广西成为台商登陆东盟桥头堡[N];国际商报;2007年
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1 郭焕成;猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒寡核苷酸芯片的研究与应用[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年
2 杨林;猪瘟病毒基因芯片诊断技术的研究及应用[D];中国农业大学;2005年
3 张富强;应用噬菌体展示技术进行猪瘟病毒结构(糖)蛋白E2和E~(rns)中和抗原表位鉴定和比较[D];中国人民解放军军需大学;2002年
4 韩雪清;猪瘟病毒E2基因遗传变异及体外表达研究[D];西北农林科技大学;2002年
5 刘伯华;猪瘟病毒E2基因在大肠杆菌中的高效表达及其表达产物的制备[D];中国人民解放军军需大学;2002年
6 陈利丹;二十一世纪广西城镇化论析[D];中央民族大学;2004年
7 吴海祥;CSFV石门株基因组感染性克隆的构建与致细胞病变分子机制研究[D];武汉大学;2003年
8 肖驰;猪繁殖与呼吸道综合征、猪瘟和猪圆环病毒病诊断DNA微阵列的构建及其检测技术研究[D];四川农业大学;2005年
9 孙永科;表达猪瘟病毒石门株E0/E2基因重组腺病毒的构建及其免疫效果研究[D];西北农林科技大学;2007年
10 徐卓菲;胸膜肺炎放线杆菌和猪瘟病毒的基因组测序与比较基因组学研究[D];华中农业大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 韦栋平;猪瘟病毒广西流行株E_2基因扩增与反应条件的优化研究[D];广西大学;2001年
2 袁朝霞;广西猪瘟病毒扁桃体和流产胎儿来源株E2基因的克隆、测序及遗传学分析[D];广西大学;2004年
3 吴显实;广西猪瘟流行毒株全基因组的克隆与序列分析[D];广西大学;2003年
4 姜庆;比较猪瘟病毒兔化毒株和石门株5端非编码区对病毒翻译的影响[D];山东师范大学;2011年
5 朱元源;猪瘟病毒结构蛋白与生物学特性的关系[D];中国兽医药品监察所;2010年
6 满朝来;猪瘟病毒HL-LY地方株E2基因在毕赤酵母中的表达及高效表达条件的探索[D];东北农业大学;2003年
7 赵志军;猪瘟病毒E2基因克隆、序列分析及最佳猪瘟免疫程序的制定[D];河北农业大学;2003年
8 朱妍;猪瘟病毒特异性单克隆抗体的研究[D];吉林农业大学;2005年
9 史子学;猪瘟荧光定量PCR检测方法的建立及应用[D];吉林大学;2006年
10 肖昌;应用随机肽库鉴定猪瘟病毒E2蛋白抗原表位[D];中国人民解放军军需大学;2002年
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