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《广西大学》 2001年
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人锰超氧化物歧化酶cDNA的克隆及其在大肠杆菌和巴斯德华赤酵母中的表达

谢科  
【摘要】:用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR),以人肝细胞株(L-(02))总 RNA为模板, 扩增了人锰超氧化物歧化酶(hMnSOD)的。DNA,重组到trc启动子控制下的 表达载体pSE380及巴斯德毕赤酵母AOXI基因启动子控制下的表达载体 pPICINUA、pPIC9k,得到重组质粒pSE380-MnSOD,pPICINUA-MnSOD及 pPIC9k-MnSOD,并分别转化至大肠杆菌及巴斯德毕赤酵母。 SDS-PAGE分析表明,大肠杆菌表达菌株经 1m mo1/1异丙基硫代-β-D半乳糖 苷(IPTG)诱导5h后,可表达一单体分子量为22KD的蛋白质。表达量约为菌 体总蛋白质的 11.9%,连苯三酚法测定表明表达产物具有SOD酶活性,酶比活 达到 196.1U/mg。 P.Pastorl经甲醇培养基诱导表达,检测发酵液中的 SOD酶活,并经 SDS-PAGE检测,未发现外源蛋白的表达。
【学位授予单位】:广西大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:Q789

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【参考文献】
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