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《广西大学》 2002年
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PCR技术鉴别诊断鸡肿瘤病的应用研究

王桂军  
【摘要】: 马立克氏病(MD)、网状内皮增生症(RE)和禽白血病(AL)是鸡最常见的肿瘤病,它们不仅诱发肿瘤,而且还可损害免疫细胞和免疫器官,导致免疫抑制,使患鸡并发或继发细菌性、病毒性和寄生虫性的疾病等,造成重大的直接或间接的经济损失。三种肿瘤病在大体病变和病理组织上难以区分,而且在临床上还常常呈亚临床感染和混合感染,传统的常规方法很难作出诊断并相互鉴别。因此需要建立一种能够快速作出诊断并能将三者相鉴别的新方法。 本研究依据MDV-1、REV和ALV的基因组特点,经过对反应条件、反应体系的优化,成功地建立了一种能诊断并鉴别肿瘤病的三重聚合酶链式反应(PCR)方法。而且还对常规的样品DNA抽提方法进行了改进,使建立的鉴别诊断方法从8个小时缩短到5个小时,达到了敏感、特异、快速的目的。 本研究利用建立的诊断方法对2年来广西三种肿瘤病进行诊断和流行病学调查。结果表明,MD仍是广西最常见的肿瘤病(占肿瘤病总数的95.65%),RE和AL也有不同程度的流行(分别占肿瘤病总数的17.55%和11.59%)。流行病学分析的结果表明,鸡群生长阻滞、免疫应答减弱以及继发其他感染而造成鸡群的死亡增多等与肿瘤病的发生相关。 本研究利用建立的PCR技术对免疫CVI988/Rispens株的鸡进行跟踪检测。结果表明,免疫后第1周~4周,羽囊、外周血淋巴细胞(PBL)、脾、肝和胸腺的总检出率分别为20%(2/10)、30%(6/20)、20%(4/20)、5%(1/20)和15%(3/20),但在肾和腺胃没有检出;自第5周起,从内脏均不能检出。 本研究还建立了利用核酸探针进行点杂交诊断MD和RE的方法,并与建立的PCR技术进行比较。结果表明,核酸探针点杂交的敏感性远远低于PCR;与PCR相比,核酸探针技术程序烦琐、费时、自动化程度差。 本研究的结果证明,用PCR技术鉴别诊断鸡肿瘤病具有快速、敏感、特异的特点,对临床病例诊断、流行病学调查、出入境检疫和疫苗污染检测均具有重要应用价值。
【学位授予单位】:广西大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:S858.31;S854.4

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【引证文献】
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8 唐静波;肿瘤磁纳米热疗用交变磁场发生仪器实验样机的研制与Fe_3O_4纳米磁流体磁热效应研究[D];中南大学;2009年
9 蒋玲艳;鸡传染性贫血PCR诊断方法的建立及其广西流行病学研究[D];广西大学;2004年
10 蒲金霞;应用于肿瘤治疗的CT与MRI图像融合研究[D];河北工业大学;2007年
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