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《广西大学》 2002年
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伪狂犬病病毒广西B、W株gE基因的扩增、克隆及序列分析

覃广胜  
【摘要】: 本研究根据已发表的伪狂犬病病毒gE基因的序列,分片段设计并合成了两对引物gE1/gE2,gE3/gE4,以广西不同地方分离出来的野毒株B、W株为模板进行PCR扩增,均能扩增出特异的目的片段,分别是985bp、934bp。在扩增的基础上,把PRV-GXB、PRV-GXW株gE基因的PCR产物纯化后克隆到PMl)18-T载体上,再转化到大肠杆菌DH_(5α)感受态细胞,构建了重组质粒(PMD18—T—GXB1、GXB2、GXW1、GXW2),经质粒酶切鉴定、PCR鉴定后,将目的基因进行序列测定。结果表明,PRV-GXB和PRV-GXW两个野毒株gE基因编码区均由1743bp组成,编码580个氨基酸,比较两毒株gE基因的核苷酸和推导的氨基酸序列,结果表明两毒株有很高的同源性,分别为99.4%、99.1%,与PRV Rice株比较有一定的差异,同源性分别为98.0%、97.6%和95.7%、95.2%;与国内地方株同源性分别为98.4~99.5%和97.3%~99.1%。为了进一步了解广西两毒株与国内外毒株之间的亲缘关系,用DNAstar软件做了遗传树分析,结果表明B、W株与Ea株的亲缘关系最接近。这些结果对我区伪狂犬病病毒的分子流行病学调查和构建gE基因缺失疫苗,建立伪狂犬病的鉴别诊断方法奠定了基础。
【学位授予单位】:广西大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:S852.65

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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