收藏本站
《广西大学》 2003年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

一个可在板栗疫病菌中自主复制的穿梭质粒的构建

杨洪元  
【摘要】: 将板栗疫病菌整合性质粒pCPXHY2上的由Trpc启动子控制的潮霉素基因片段克隆到农杆菌转化载体质粒pCambia1301—35SN外源基因克隆位点上,构建成一个新的质粒pGXH1130。用pGXH1130转化板栗疫病菌EP713原生质体,其转化效率是pCPXHY2的6倍以上,达到60~70个转化子/μg。挑取的5868个转化子没有一个发生表型突变,其生长速度、菌体颜色、菌落形态均与EP713相似。通过对转化子总DNA进行Southern杂交分析,pGXH1130转化板栗疫病菌后并未插入染色体基因组中,而是游离于板栗疫病菌染色体外,以一个自主复制的质粒形式存在。将转化子总DNA转化E.coli,回收到与pGXH1130大小一致的质粒。经RFLP(EcoRI、XbaI、SalI)分析,pGXH1130转入EP713后未经任何修饰或剪切。对转化子潮霉素抗性表型稳定性检测表明,在没有潮霉素选择压力下,经过6次转接,90%的菌体中pGXH1130会丢失。能自主复制的pGXH1130穿梭质粒的成功构建,为板栗疫病菌的遗传操作提供了一个强大的新的工具。
【学位授予单位】:广西大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S436.64

手机知网App
【相似文献】
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 罗正均;任本权;彭跃明;陈林川;黄勇军;;板栗疫病菌营养体亲和性研究[A];重庆市首届工程师大会论文集[C];2004年
2 罗正均;任本权;彭跃明;陈林川;;湘渝地区栗疫病菌低毒力菌株dsRNA的转化研究[A];重庆市首届工程师大会论文集[C];2004年
3 张俊华;崔崇士;张耀伟;;南瓜疫病菌侵染模拟及流行预测研究[A];中国园艺学会南瓜分会学术研讨会论文摘要集——纪念中国园艺学会南瓜分会成立十周年、祝贺第四届国际瓜类作物学术大会在中国召开[C];2009年
4 冯光恒;王继华;王丽花;毕云青;;昆明地区非洲菊疫病的PCR技术检测[A];云南省作物学会2000—2003年优秀论文选集[C];2004年
5 姚姿婷;蓝秀万;周燕;周辉;商巾杰;陈保善;;大规模板栗疫病菌突变体库的构建[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
6 肖冰;;大肠癌mtDNA诱导NIH3T3细胞恶性转化的研究[A];中国中西医结合第十九次全国消化病学术会议暨国家级中西医结合消化疾病新进展学习班论文汇编[C];2007年
7 李卫民;黄思良;晏卫红;岑贞陆;陆少峰;付岗;;广西黑皮冬瓜疫病病原菌鉴定[A];中国植物病理学会2006年学术年会论文集[C];2006年
8 付伟;肖侬;;网格环境下的海量科学数据自主复制管理[A];第二十届全国数据库学术会议论文集(研究报告篇)[C];2003年
9 杨家学;高微微;何春年;;西洋参根部病害研究现状与思考[A];第六届全国药用植物和植物药学术研讨会论文集[C];2006年
10 乔建军;马彦;万喆;李若瑜;刘伟;;烟曲霉Afyap1基因功能研究[A];2009全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;秋黄瓜慎防疫病[N];吉林农村报;2008年
2 科宣;温室韭菜疫病的症状与防治[N];锡林郭勒日报;2008年
3 山东省农科院 王立铭研究员;初春养羊切忌放牧,但需更多“呵护”[N];中国畜牧兽医报;2006年
4 姜京宇;要严密监控侵染性病害[N];河北科技报;2007年
5 梁良;秋黄瓜防疫病有法[N];鸡西日报;2008年
6 本报通讯员 薛明奎田太胜;精品农业出“精品”[N];济宁日报;2007年
7 温玲;南瓜腐烂缘于疫病[N];山西科技报;2000年
8 国欣农研会高级农艺师 卢国欣;预防棉花烂铃早下手[N];河北科技报;2007年
9 记者 陈星;种植甜瓜 选地很重要[N];新疆科技报(汉);2008年
10 吴彦;茄子栽培应注意防治绵疫病[N];锡林郭勒日报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 秦玉琪;瑞氏木霉内切葡聚糖酶Ⅱ蛋白质工程改造和表达研究[D];山东大学;2008年
2 田永强;1.稀有放线菌体内遗传因子的生物学研究 2.链霉菌DNA大片段遗传操作系统的初步建立[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2005年
3 肖少波;伪狂犬病毒gC基因“自杀性”DNA疫苗及VP22蛋白转导的免疫增强效应研究[D];华中农业大学;2004年
4 闻晓波;新城疫病毒样颗粒的构建及其出芽机制的研究[D];中国农业科学院;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨洪元;一个可在板栗疫病菌中自主复制的穿梭质粒的构建[D];广西大学;2003年
2 冯友军;一个可在板栗疫病菌中自主复制的穿梭表达载体[D];广西大学;2004年
3 林海燕;低毒病毒CHV1-EP721基因组序列的测定及侵染性全长cDNA克隆的构建[D];广西大学;2004年
4 张立付;安徽省大豆疫病菌的分离、鉴定及致病型研究[D];安徽农业大学;2010年
5 康宁;板栗疫病菌脱毒方法比较及受病毒侵染后与症状表达有关的靶标基因的克隆[D];广西大学;2004年
6 刘德兵;实生板粟(Castanea mollissima Bl.)居群遗传多样性及其对粟疫病菌抗性的研究[D];西北农林科技大学;2001年
7 张达;草菇糖苷水解酶家族5纤维素酶的定向改造[D];南京林业大学;2011年
8 郭艳;HCV 1b型全基因组扩增及序列分析[D];第三军医大学;2011年
9 齐建;粘球菌DK1622胞内游离钙离子浓度的测定及钙结合蛋白基因的预测[D];山东大学;2010年
10 杨鹏;新型JEV复制子载体的构建及表达炭疽PA的JEV复制型DNA载体的免疫原性研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026