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《广西大学》 2004年
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水牛卵母细胞体外成熟影响因素的研究

胡冰  
【摘要】:本研究对水牛卵母细胞体外成熟的影响因素进行了探讨。结果发现,当在成熟培养系统中添加5×10~6/mL新鲜内膜细胞或50%条件液(TCCM)时,水牛卵母细胞孤雌激活后的分裂率(48.0%,50.2%)和囊胚发育率(40.6%,50.4%)均有所提高,但差异不显著(p>0.05)。当在成熟液中添加25%的TCCM时,卵母细胞孤雌激活后的分裂率(78.3% vs 55.0%)和囊胚发育率(53.4% vs 38.1%)均明显提高(p<0.05)。比较来自不同细胞培养阶段TCCM成熟培养效果发现,来自D3~D4的TCCM的卵母细胞孤雌激活囊胚发育率(62.9%)显著高于来自D0~D2和D5~D6的TCCM(44.1%和49.3%,p<0.05)。在IVM液中添加10%发情牛血清(ECS),卵母细胞第一极体排出率显著高于添加5%和10%胎犊血清(FBS)(p<0.01)的卵母细胞,但卵母细胞激活后的分裂率(63.8% vs 68.0%和68.3%)和囊胚发育率(36.0% vs 49.4%和46.4%)无显著差异(p>0.05)。然而,添加10%FBS组的卵母细胞分裂率(68.3%)和囊胚发育率(46.4%)明显高于添加10%发情水牛血清(EBS)组的卵母细胞(58.0%,33.1%;p<0.05),虽然其卵母细胞的极体排出率(62.7%)显著低于10%EBS组(74.6%,p<0.05)。在卵母细胞成熟培养液中添加10%的新鲜BFF,显著提高卵母细胞孤雌激活后的囊胚发育率(39.6% vs 27.8%,p<0.05),但卵母细胞的第一极体排出率则显著低于未添加组(p<0.05)。并且当BFF的浓度从10%提高到20%时,第一极体排出率进一步降低。 以上结果表明:(1)水牛新鲜卵泡内膜细胞及其条件液有利于水牛卵母细胞的体外成熟;(2)卵泡内膜细胞条件液的适宜收集时间是3~4d,适宜的添加比例是25%;(3)FBS(胎牛血清)主要促进水牛卵母细胞质的成熟,而ECS(发情牛血清)则主要促进水牛卵母细胞核的成熟;(4)卵泡液对水牛卵母细胞质的成熟具有促进作用,但对水牛卵母细胞核的成熟则具有抑制作用。
【学位授予单位】:广西大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:S823

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