外源DNA导入玉米自交系创造变异及其利用的研究

【摘要】：本实验采用浸种法和花粉管通道法将外源DNA导入不同玉米自交系，通过对其后代农艺性状观察、染色体数目统计、叶片结构及过氧化物酶同工酶酶谱分析，得到结果如下： 1、浸种法 (1)提取黑皮甘蔗、孟加拉超甜玉米自交系以及糯玉米12-9-10自交系的总DNA，分别以三种浓度300μg／ml、500μg／ml、700μg／ml导入不同玉米自交系，获得最佳导入浓度为300μg／ml。 (2)组合糯玉米12-9-10×黑皮甘蔗(DNA)，DNA浓度为300μg／ml处理的D_0代变异率为5.56％，获得一株变异株D_(0(糯×甘300))，其叶片结构偏向供体，过氧化物酶同工酶酶谱在Rf_5=0.33和Rf_6=0.40各出现一条供体特有而受体没有的酶带，在Rf_8=0.61出现一条供受体都没有的酶带。该变异株收种种植后，D_1代只出现一株矮杆、早熟、叶色浓绿、非对生的变异株D_(1(糯×甘300))，D_2代则出现分离，得到非对生植株与对生植株的比例为112：53。 (3)组合糯玉米12-9-10×孟加拉超甜玉米(DNA)，DNA浓度为300μg／ml和500μg／ml处理的D_0代变异率分别为11.76％、5.88％，获得变异株D_(0(糯×孟甜300))-1、D_(0(糯×孟甜300))-2和D_(0(糯×孟甜500))，其中D_(0(糯×孟甜300))-2的过氧化物酶同工酶酶谱在Rf_6=0.59出现供体特有而受体没有的一条中强酶带，其它两株酶谱无变异。变异株D_(0(糯×孟甜300))-2和D_(0(糯×孟甜500))收种植株后，D_1代分 外源DNA导入玉米自交系创造变异及其利用的研究 别又出现了2株变异株和1株变异株。 (4)组合超甜玉米5一48义糯玉米12一9一10(DNA)，DNA浓度为3 00 pg/ml 的处理在D。代获得一株变异株D。、甜、。3。。)，其过氧化物酶同工酶酶谱在 Rf6=0.62出现一条供受体都没有的强带，收种种植后，D，代出现一株变异 株D，。甜、。30。)。其余处理的植株后代未出现变异。 2、花粉管通道法 (1)提取糯玉米12一9一10自交系和孟加拉超甜玉米自交系的总DNA，DNA 浓度为500 pg/m1，分别在受体孟加拉超甜玉米自交系和糯玉米12一9一10自 交系授粉后17h、19h、21h、23h导入外源DNA，其结果为:组合孟加拉超 甜玉米x糯玉米12一9一10(DNA)的外源DNA导入效果:17h19h2 lh23h， 其中17h处理的变异率最高，2.91%;组合孟加拉超甜玉米x糯玉米12一9一10 自交系(DNA)的外源DNA导入效果:1 gh)2 lh1 7h、2 3h，其中1 gh处理的 变异率最高，1.22%。 (2)染色体数目分析结果:CK孟甜、CK。及各个处理后的植株，在所观察 的50个细胞中，或多或少都有一部分细胞染色体数目比正常20条增加或 减少几条，其原因有待进一步探讨和验证。 3、相同组合糯12一9一10X孟甜(DNA)，相同的DNA导入浓度5 oop留ml， 采用花粉管通道法的Dl代变异率1.22%高于采用浸种法的D;代变异率 0 .59%。

【关键词】：浸种法 花粉管通道法 外源DNA 受体 变异 过氧化物酶同工酶
【学位授予单位】：广西大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：S513
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