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《广西大学》 2004年
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抗狂犬病病毒单克隆抗体的制备以及初步应用研究

冯励  
【摘要】:狂犬病是一种古老的能引起人和动物严重的中枢神经系统病变的传染性疾病,此病症状一旦出现则造成致命的脑脊髓炎,无法治疗。接种疫苗是防治本病的唯一措施。目前,世界上对狂犬病的致病机理仍然不清楚,因此为了根除本病,必须对狂犬病病毒的致病性基因进行探索,找出与致病性相关的基因。 本实验将狂犬病病毒ERA毒株在适宜的条件下培养72小时,收集无细胞上清,经离心沉淀、Zn(AC)_2浓缩、10%~55%质量浓度的蔗糖密度梯度离心纯化,RT-PCR分析证明,产物中含有高效价的狂犬病病毒。以上述纯化病毒免疫BALB/c小鼠,取脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞融合,经有限稀释法克隆3次,间接ELISA筛选和固相化ELISA方法鉴定,最终获得五株分泌抗狂犬病病毒的杂交瘤细胞株,分别命名为E1-1、E1-2、E1-4、E1-5和E1-6。 将五株单抗的杂交瘤细胞株接种BALB/c小鼠腹腔生产单抗腹水,间接ELISA测定其效价达1:2000~1:8000。五株单抗可以与野毒119、BM、LA和F-牛四个毒株反应,表明其是针对狂犬病病毒的单抗;但与不同科病毒HCV、PCV、PRRSV和PRV均不发生交叉反应,显示这五株单抗对狂犬病病毒具有良好的特异性;细胞中和试验证实,其中三株单抗E1-1、E1-2 广资又矛硕士毕业论文 和El一5具有良好的细胞中和活力.
【学位授予单位】:广西大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:S852.43

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