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《广西大学》 2004年
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猪瘟病毒E2基因杆状病毒转移载体的构建及病毒诱导细胞凋亡的研究

姚淑瑜  
【摘要】:猪瘟病毒属于黄病毒科瘟病毒属的成员,基因组为单股正股RNA,全长12.3Kb,编码一个大的开放阅读框架。猪瘟广泛流行于全世界各养猪国家,给养猪业造成巨大的经济损失。在我国,猪瘟仍是重要的传染病之一,现流行呈现典型猪瘟和非典型猪瘟共存、持续感染与隐性感染共存、免疫耐受和带毒综合征共存等,所以开发新型、高效的基因工程疫苗和阐明猪瘟病毒的致病机理是控制和根除猪瘟的重要环节。 E2囊膜糖蛋白为病毒最主要的保护性抗原,可以诱导机体产生保护性抗体。用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别扩增出猪瘟病毒广西梧州株(GXWZ)、石门株(SHIMEN)E2全基因,将其分别克隆到克隆载体pMD18-T中,经酶切、PCR、序列测序鉴定,证明插入的基因为猪瘟病毒E2基因。插入的广西梧州株、石门株E2基因与过去所测广西梧州株E2基因、标准石门株E2基因的核苷酸同源性分别为99.5%和99.1%,氨基酸的同源性分别为99.2%和 旦醚登翌丝乙一一一一一一j选燮丝些遇丝应参竺昼塑终缈勉庐考资导陋照户的醚. 99.5%;经酶切和pcR鉴定确定基因插入,构建成重组克隆质粒 pMDWZEZ和pMosMEZ。用Eeo Rl、pstl分别对重组克隆质粒和转 移载体pACSGZ进行双酶切,回收目的基因ONA片段,将目的E2 基因片段亚克隆至转移载体pACSGZ中,经双酶切和pcR鉴定插入 基因和连接方向正确。构建成重组杆状病毒转载体pACWZEZ和 pACsMEZ,为进一步利用杆状病毒表达系统表达非融合的E2蛋白, 开发基因工程疫苗和E2蛋白功能研究奠定物质基础。 同时,我们对猪瘟病毒体外诱导细胞凋亡进行了初步的研究。 用猪瘟病毒广西梧州株(GXWZ)、石门株(SH!MEN)、猪瘟兔化弱毒 疫苗株(HCLV)分别在体外感染猪肾细胞(PK一15和PK一旧RSZ), 于感染后不同时间收集接毒组与对照组的细胞,抽提细胞核DNA 进行检测。实验结果显示,接毒组与对照组细胞的DNA在琼脂糖凝 胶电泳谱上均无典型的“梯状”条带(ONA 1 adder),并且对照组 与接毒组的电泳谱对比无明显差异。提示猪瘟病毒在体外不能诱导 上皮细胞引起明显的细胞凋亡。这一结果为进一步研究猪瘟病毒与 宿主细胞之间的关系,病毒的致病机理提供了理论依据。
【学位授予单位】:广西大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:S852.65

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【引证文献】
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9 赵坤,张慧辉,郭东升;猪繁殖和呼吸综合征组织灭活苗的研制[J];安徽农业科学;2005年07期
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