收藏本站
《广西大学》 2004年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

禽呼肠孤病毒感染流行病学调查与广西地方分离株S1基因的测序和克隆

李斌  
【摘要】:禽呼肠孤病毒(avian reovirus,ARV)的感染在世界各地均有发生,其中的鸡的关节炎/腱鞘炎是由ARV导致的最重要的疾病。此外,ARV感染更多的是导致腹泻、消化道功能紊乱、饲料转化率低、羽毛生长差,以及生长缓慢等病征。同时,ARV的感染也可引起免疫抑制,导致并发和或继发的疾病,给养鸡业造成了严重的危害。近年来越来越受到养禽业者和研究人员的重视。 课题分别对ARV的反转录-聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)快速诊断方法、病毒的分离和鉴定、流行病学的调查、以及广西地方分离株S1基因的核苷酸序列等进行了研究。 参考已经发表的ARV参考毒株S1133 S1基因cDNA的序列,合成了两套引物AR1、AR2、AR3和S1A、S1H,分别扩增ARVS1基因的ORF1-ORF2和ORF3。首先,应用引物AR1、AR2进行基础RT-PCR,扩增到534bp的目的片段,然后应用引物AR1、AR3进行半巢式PCR,扩增到393bp的目的片段。两个扩增片段横跨S1基因中大部分的ORF1和ORF2;应用引物S1A、S1H扩增到1022bp的目的片段,此片段包含S1基因中完整的ORF3,它编码病毒重要的σ3蛋白。而与此同时,对其它常见禽病病原却均未能扩增到相应的片段。 应用建立的RT-PCR快速诊断方法直接对来自广西、安徽和山东的102份临床疑似ARV感染鸡的病料进行检测,结果有14份鉴定为阳性(阳性率为13.73%)。 对RT-PCR快速诊断方法检测为阳性的14份临床病料进行ARV分离培养的研究。所采集的病料包括肝、脾、肌腱、胸腺、骨髓、法氏囊等,用常规方法处理,分别经卵黄囊、绒毛尿囊腔接种7天龄的无特定病原(specific-pathogen-free,SPF)鸡胚。结果成功分离到4株广西地方毒株;经对比发现,以卵黄囊接种的途径进行ARV的分离效果较好。 研究还分别对广西地方分离株SH004、JD2和NN263、NN344 S1基因的两个扩增片段进行核苷酸序列的测定与克隆。SH004、JD2株534bp片段核苷酸的序列经与GenBank上发表的ARV参考毒株核苷酸序列进行同源性分析比较,发现SH004株与参考毒株S1133同源性最高,为99.6%;而JD2株与ARV参考毒株的同源性都较低,仅为79.1%-89.3%。同时还对SH004、JD2株及ARV参考毒株相应的p10、p17蛋白编码基因序列进行比对和分析。NN263株和NN344株完整的σ3蛋白编码基因被成功克隆到pMD18-T质粒载体中,为进一步的研究奠定了基础。
【学位授予单位】:广西大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:S852.65

知网文化
【引证文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 韦平,何秀苗,王桂军,李康然,蒋玲艳,李莉萍,阳秀英,慕朝师;鸡肿瘤病快速鉴别诊断试剂盒及其应用研究[J];广西科学;2005年01期
2 蒋玲艳;韦平;李莉萍;阳秀英;韦天超;磨美兰;李义杰;;鸡传染性贫血病毒与其他禽免疫抑制性疾病病毒的混合感染[J];中国兽医学报;2006年06期
3 李雪华;崔金忠;王林;王保利;刘兴友;;鸡RNA免疫抑制性病毒致病机理研究进展[J];中国兽医杂志;2008年08期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 李雪华;鸡生长与免疫抑制综合征病毒检测方法及疫苗研究[D];河南农业大学;2007年
2 崔金忠;鸡生长与免疫抑制综合征病毒对肉仔鸡生长抑制的机理[D];甘肃农业大学;2008年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 Louis Vander Heide ,刘文波;呼肠孤病毒简介[J];国外畜牧科技;2002年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 郭振环;孔祥峰;黄小燕;胡元亮;;鸡大肠杆菌病的病原菌分离鉴定和药敏试验[J];安徽农业科学;2007年02期
2 段书月;乔改伟;王平;;豫北地区猪传染性萎缩性鼻炎病原分离鉴定[J];安徽农业科学;2007年14期
3 陶海静;;鸡大肠杆菌计数方法研究[J];安徽农业科学;2007年27期
4 骆艳秋;尹柏双;徐文勇;姜成;;人参叶皂甙对鸡免疫功能调节的研究[J];安徽农业科学;2008年01期
5 汪仁莉;张珠明;何生虎;;牛心朴子体外抑菌作用的研究[J];安徽农业科学;2009年31期
6 刘俊伟;张海棠;王飞;陈俊杰;司红英;;山羊痘病的临床诊断技术研究[J];安徽农业科学;2010年27期
7 车达;金鑫;陈莹莹;费景春;姜丹丹;吴丹;王笑玉;;延边黄牛气肿疽间接ELISA诊断方法的建立[J];安徽农业科学;2011年02期
8 范志宇;恽时锋;王芳;王欣;胡波;张则斌;徐为中;奚力中;;兔支气管败血波氏杆菌不同感染途径研究[J];现代农业科技;2008年18期
9 甄莉;贾海燕;陈勇;;中草药治疗鹌鹑大肠杆菌病试验[J];现代农业科技;2008年19期
10 邢涛;;家畜常见的沙门氏菌简介[J];现代农业科技;2008年23期
中国重要会议论文全文数据库 前4条
1 杭柏林;胡建和;马红娜;姚四新;王丽荣;刘丽艳;;鸡盲肠中乳酸菌的分离鉴定及药敏试验[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
2 朱中武;鲁杏华;黄萍;孟芳;唐连飞;喻珊;李丹丹;;规模化猪场猪结核病诊断及根除措施研究[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
3 吴信明;沈志强;连洪梅;刘吉山;赵蕾;李峰;;广西鸭致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验[A];首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集(2008)[C];2008年
4 黄志坚;;一起仔猪渗出性皮炎的诊断与防治[A];福建省科协第十一届学术年会畜牧兽医分会论文集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前8条
1 范红结;猪源链球菌类M蛋白基因的克隆、序列分析、表达及动物免疫试验[D];南京农业大学;2003年
2 王蕾;禽呼肠孤病毒野毒株σC基因、抗原性及致病性比较研究[D];山东农业大学;2007年
3 曾智勇;猪呼肠孤病毒SC-A株的分离鉴定及全基因组cDNA文库的构建和分子遗传特征分析[D];四川农业大学;2006年
4 徐彪;栉孔扇贝大规模死亡病原学研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2008年
5 赵战勤;支气管败血波氏杆菌的重组沙门氏菌基因工程疫苗研究[D];华中农业大学;2008年
6 杨龙圣;幼兔病毒性出血症免疫失败原因及防制措施的研究[D];南京农业大学;2008年
7 蒙学莲;小反刍兽疫病毒血凝素蛋白及其受体的研究[D];中国农业科学院;2012年
8 郭东春;多杀性巴氏杆菌兔体内差异表达基因及其突变株构建的研究[D];中国农业科学院;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王广伟;枣庄地区鸡大肠杆菌病的防治研究[D];山东农业大学;2010年
2 刘腾飞;犬副流感病毒的检测和NP基因的克隆、表达及其重组蛋白的免疫学活性的研究[D];新疆农业大学;2010年
3 车达;气肿疽梭菌单克隆抗体的制备及鉴定[D];延边大学;2011年
4 王烨;马链球菌兽疫亚种新保护性抗原的鉴定[D];南京农业大学;2011年
5 胡佳佳;兔源支气管败血波氏杆菌PRN蛋白的表达及其免疫保护性研究[D];南京农业大学;2011年
6 方立超;不同的饲粮能量和蛋白质水平对肉鸡肉质及痛风症发生率的影响[D];西南农业大学;2001年
7 鱼艳荣;表达两种不同外膜蛋白的禽大肠杆菌融合株的构建及初步应用[D];西北农林科技大学;2001年
8 王建;猪链球菌病疫苗的研制[D];南京农业大学;2001年
9 刘杰;产毒素多杀巴氏杆菌的发酵培养及其生物学特性的研究[D];东北农业大学;2001年
10 陈志宝;三种诺氟沙星注射液体外抑菌试验及在健康猪体内药动学的比较研究[D];中国人民解放军军需大学;2002年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 罗平涛,肖凡,谢仕荣,吴震,赵玉山;影响肉仔鸡生长性能的因素[J];山东家禽;2003年09期
2 高鹏飞,董继红,李忠建,高海燕;浅析影响肉鸡快速生长的因素[J];家禽科学;2005年02期
3 王刚;刘思当;韩燕燕;王久强;;肉仔鸡氟喹诺酮类药物中毒的病理诊断及发病机制[J];家禽科学;2007年09期
4 解爱英,林国英,李娟,周淑;家禽常用药物中毒症及其防治[J];山东畜牧兽医;2005年03期
5 默塔巴;亦戈;;免疫抑制对禽类健康的威胁[J];动物保健;2006年08期
6 刘应鹏,刘兴友,王艳玲,江倩,李雪华;鸡病毒性免疫抑制病的研究进展[J];中国畜牧兽医;2005年05期
7 何秀苗,王桂军,韦平;应用PCR技术对家禽病毒性肿瘤病进行鉴别诊断的研究进展[J];广西科学;2000年04期
8 龙进学,韦平,磨美兰,阳秀英;传染性法氏囊病病毒分子生物学研究的一些进展[J];广西大学学报(自然科学版);2003年01期
9 龙进学,韦平,阳秀英;传染性法氏囊病快速诊断技术的建立及其应用[J];广西大学学报(自然科学版);2003年02期
10 窦世玲;;肉仔鸡饲养的管理技术[J];甘肃畜牧兽医;2007年01期
中国硕士学位论文全文数据库 前6条
1 王桂军;PCR技术鉴别诊断鸡肿瘤病的应用研究[D];广西大学;2002年
2 商营利;鸡混合感染J亚群白血病病毒与网状内皮增殖病病毒免疫抑制机理研究[D];山东农业大学;2003年
3 王建新;J亚群禽白血病病毒感染对肉鸡生长和免疫功能的影响及其env基因的克隆[D];山东农业大学;2003年
4 达来宝力格;鸡传染性法氏囊病毒检测方法的建立[D];河北农业大学;2004年
5 蒋玲艳;鸡传染性贫血PCR诊断方法的建立及其广西流行病学研究[D];广西大学;2004年
6 张立元;日粮蛋白质水平对优质鸡生长、屠宰性能及部分肉品质性状的影响[D];扬州大学;2006年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘明成;;家禽病毒性免疫抑制病的危害和防控[J];安徽农业科学;2009年28期
2 慕朝师;韦平;阳秀英;;家禽免疫抑制性疾病的危害及其主要防控办法[J];广西畜牧兽医;2009年05期
3 吴焕荣;赵全兴;杨欣欣;杨慧玲;国琳;潘志刚;;鸡传染性贫血病LAMP检测方法的建立[J];山东畜牧兽医;2013年10期
4 张新珩;刘远佳;吴波良;陈峰;孙宝丽;马静云;谢青梅;;鸡传染性贫血病毒广东分离株GD-1-12致病性研究[J];动物医学进展;2014年01期
5 康昭风;谢金防;韦启鹏;谢明贵;武艳平;邹志恒;李思明;;江西省主要养鸡地区鸡传染性贫血病的血清学调查[J];黑龙江畜牧兽医;2011年17期
6 武军;;鸡传染性贫血的诊断与类症鉴别[J];农技服务;2008年04期
7 王非;蒋建一;华炯刚;母安雄;云涛;王桂军;魏建忠;刘光清;;鸡ILV、IBV、NDV和AIV多重RT-PCR检测方法的初步建立[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2007年04期
8 邓博文;卓家婷;;RE引起家禽免疫抑制的作用机理及其防制[J];畜牧兽医科技信息;2007年06期
9 邓博文;梁炜;吴宏新;劳创波;邓思浩;;AL引起家禽免疫抑制的作用机理及其防治[J];畜牧兽医科技信息;2007年09期
10 周祥;韦平;滕丽琼;;整合进禽反转录病毒长末端重复序列的马立克氏病病毒的分离鉴定[J];畜牧与兽医;2007年08期
中国重要会议论文全文数据库 前3条
1 阳秀英;韦平;黄志永;磨美兰;韦天超;李康然;韦住奉;赖家宏;朱学勤;;我国部分省区鸡传染性法氏囊病病毒的分子流行病学研究[A];中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2008年
2 张胜斌;韦平;吴天威;吴丹;吴志金;崔治中;吕礼芳;全琛宇;冯世文;玉赵平;王广仁;;广西地方优良鸡品种ALV感染情况及净化经验[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会鸡淋巴白血病防控技术研讨会论文集[C];2010年
3 张胜斌;吴天威;吴丹;吕礼芳;全琛宇;冯世文;玉赵平;王广仁;韦平;崔治中;;广西三黄鸡禽白血病流行病学调查[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会鸡淋巴白血病防控技术研讨会论文集[C];2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 颜赟;鸡免疫抑制性病毒共感染的流行病学调查[D];山东农业大学;2010年
2 孟斌;山东省白羽肉鸡免疫抑制病病原学和血清学调查[D];山东农业大学;2010年
3 杨明;鸡传染性贫血病毒与其它免疫抑制性疾病共感染的相互作用[D];山东农业大学;2010年
4 郭文龙;规模化肉鸡场主要免疫抑制性疫病的分子流行病学调查及传播特点分析[D];山东农业大学;2010年
5 高均伟;间接免疫组化法检测人工感染CSISV在SPF雏鸡和肉仔鸡体内的分布[D];河南科技学院;2010年
6 朱国坡;RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测CSISV在SPF雏鸡体内分布[D];河南科技学院;2010年
7 唐茂恒;烟台地区规模化肉种鸡场免疫抑制性疫病的流行病学调查[D];山东农业大学;2010年
8 王鑫;不同来源纤维肉瘤的鉴别诊断及人工致病试验[D];山东农业大学;2011年
9 李彦;REV重组env蛋白间接ELISA诊断试剂盒的研制与应用[D];山东农业大学;2011年
10 阳秀英;我国部分省区鸡传染性法氏囊病病毒分离株的分子流行病学研究[D];广西大学;2006年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈士友,陈溥言,蔡宝祥;单克隆抗体用于比较禽呼肠孤病毒株的抗原关系[J];南京农业大学学报;1993年01期
2 谢芝勋,刘加波,庞耀珊,谢志勤,邓显文;应用半套式聚合酶链反应检测禽呼肠孤病毒S1基因的研究[J];中国兽医杂志;2001年03期
3 廖敏,李康然,谢芝勋;禽呼肠孤病毒分子生物学研究进展[J];广西农业生物科学;2000年02期
4 廖敏,谢芝勋,刘加波,庞耀珊,邓显文,谢志勤,唐小飞;应用RT-PCR检测人工感染鸡体内禽呼肠孤病毒的动态分布[J];广西畜牧兽医;2004年05期
5 陈士友,陈溥言,蔡宝祥;一株分离自外观正常鸡胚的禽呼肠孤病毒的鉴定[J];畜牧兽医学报;1993年03期
6 廖敏,谢芝勋,刘加波,邓显文,庞耀珊,谢志勤,唐小飞;禽呼肠孤病毒分离株δ_3蛋白基因克隆及序列分析[J];中国预防兽医学报;2004年05期
7 乐牧;;禽病毒性关节炎的防制[J];青海畜牧兽医杂志;1989年06期
8 谢芝勋,刘加波,廖敏,庞耀珊,谢志勤,邓显文,李康然,唐小飞,何竞铭;反转录聚合酶链反应和核酸探针检测禽呼肠孤病毒研究的概述[J];广西畜牧兽医;2003年05期
9 许秀梅;苏敬良;黄瑜;傅光华;程龙飞;赵继勋;;两株鸭源禽呼肠孤病毒S3基因序列分析[J];中国兽医杂志;2008年01期
10 潘光炎;养鸡技术讲座 第六十四讲 禽呼肠孤病毒感染(上)[J];甘肃畜牧兽医;1994年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王莹;谢芝勋;刘加波;庞耀珊;邓显文;谢志勤;谢丽基;;禽呼肠孤病毒四种核酸检测方法的比较[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
2 廖敏;谢芝勋;谢志勤;刘加波;庞耀珊;邓显文;唐小飞;何竞铭;;一步法RT-PCR检测禽呼肠孤病毒的研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2002年
3 王莹;谢芝勋;刘加波;庞耀珊;邓显文;谢志勤;谢丽基;;禽呼肠孤病毒直接免疫荧光检测方法的建立[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
4 邓显文;谢芝勋;刘加波;庞耀珊;唐小飞;;禽呼肠孤病毒σ2基因的克隆和表达[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
5 董嘉文;孙敏华;尚毅;胡奇林;;禽呼肠孤病毒RT-LAMP快速检测方法的建立[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集[C];2010年
6 谢芝勋;廖敏;庞耀珊;谢志勤;邓显文;刘加波;李康然;;禽呼肠孤病毒S1基因的扩增克隆与鉴定[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
7 王莹;谢芝勋;刘加波;庞耀珊;邓显文;谢志勤;谢丽基;;禽呼肠孤病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
8 蒋丽香;苏文良;刘兴利;张国中;苏敬良;赵继勋;;鸭呼肠孤病毒的分离鉴定及对SPF鸡的致病性研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年
9 王晓婷;张蕊;吕春梅;秦春芝;张国中;赵继勋;;国内蛋鸡群禽呼肠孤病毒的血清学调查与分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年
10 熊文婕;谢芝勋;唐熠;刘加波;庞耀珊;邓显文;谢志勤;谢丽基;;特异性抑制禽呼肠孤病毒δC和δNS基因复制及shRNA表达载体的构建与筛选[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前7条
1 王永坤 田慧芳;一种新鹅病——鹅出血性坏死性肝炎(又称鹅呼肠孤病毒感染)[N];中国畜牧兽医报;2006年
2 广西大学 韦平 阳秀英;家禽免疫抑制性疾病的危害及其防制策略[N];中国畜牧兽医报;2006年
3 广西大学 韦平 阳秀英;家禽免疫抑制性疾病的危害及其防制策略[N];中国畜牧兽医报;2006年
4 ;三价禽呼肠孤油苗与对种鸡有效保护[N];中国畜牧报;2002年
5 广西大学 韦平 阳秀英;家禽免疫抑制性疾病的危害及其防制策略[N];中国畜牧兽医报;2006年
6 本报记者 黄妙英 翟陆;报效祖国[N];广西日报;2005年
7 王大鹏;鸡病毒性关节炎诊断与防治[N];中国畜牧报;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 马利;禽呼肠孤病毒和传染性支气管炎病毒的环介导等温扩增检测方法的研究[D];山东农业大学;2012年
2 木其尔;禽呼肠孤病毒基因组序列模体特征分析[D];内蒙古大学;2012年
3 李爽;鸭源禽呼肠孤病毒感染雏鸭的免疫病理学研究[D];华中农业大学;2010年
4 孙美玉;禽呼肠孤病毒检测方法的建立及病毒分离鉴定[D];中国农业科学院;2012年
5 姜珂;禽呼肠孤病毒诱导细胞自噬的机制及其与病毒复制的关系[D];扬州大学;2012年
6 党娟;禽呼肠孤病毒L2基因的克隆与序列分析[D];内蒙古农业大学;2012年
7 何建文;禽呼肠孤病毒S2、S4基因的克隆与序列分析[D];内蒙古农业大学;2012年
8 李斌;禽呼肠孤病毒感染流行病学调查与广西地方分离株S1基因的测序和克隆[D];广西大学;2004年
9 万俊杰;减毒沙门氏菌介导的禽呼肠孤病毒σB/σC基因疫苗的构建及其免疫特性研究[D];四川农业大学;2011年
10 梁英;禽(鸡源)呼肠孤病毒的分离与鉴定[D];福建农林大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026