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《广西大学》 2005年
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阿斯巴甜的生物合成

吴满刚  
【摘要】:阿斯巴甜(Aspartame),化学名:α-L-天门冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯,是一种低热氨基酸甜昧剂,其甜度约为蔗糖的200倍,且甜昧类似蔗糖无苦昧和金属后味,因此被广泛应用于食品,饮料和药品中。阿斯巴甜是现今世界上少数得到多数国际组织和国家批准使用的人造甜昧剂,相对于目前市场上存在的甜昧剂,具有极大的市场潜力。 阿斯巴甜的合成方法主要为化学合成法和生物酶法两种。目前国内外的工业生产方法仍以化学合成法为主,通过氨基保护、缩合、水解、酯化、中和等反应步骤来完成。这种方法虽然产量较高,可副产物较多,而且工序较复杂,步骤较多。酶法合成具有反应温度比较低,工艺简单等优势,由于反应专一性强越来越受到人们的重视。 本实验通过简便、快速的筛选方法,从自然环境中分离筛选出能够在以阿斯巴甜为单一营养源的培养基上生长的菌株,挑选分解能力较强的菌株D1进行合成实验,有少量阿斯巴甜合成。对D1菌株进行一系列的诱变,得到一株较强合成能力的菌株ASPD1,能够不以氨基保护天冬氨酸一步酶法直接合成阿斯巴甜。 对所筛ASPD1菌株进行形态和分子鉴定,属于接合菌纲,毛霉目,犁头霉属(Absidia ramosa)。通过对该菌发酵条件的研究,确定了最佳产酶发酵条件为:发酵温度32℃,pH5.0,最佳培养基为麸皮3%,淀粉3%,MgSO_4·7H_2O
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