收藏本站
《广西大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

杧果ISSR标记及其优良单株的早期鉴定

郭永泽  
【摘要】: 杧果是世界五大热带水果之一,也是我国著名的热带水果。为了弄清我国杧果主栽品种及地方品种的亲缘关系,探索早期快速鉴定优良单株的方法。本论文选用一种简便、快速、可靠的分子标记——ISSR技术,探讨其在杧果的亲缘关系、遗传多样性、品种鉴定以及在杧果炭疽病和生理病害早期鉴定中的应用。主要研究结果如下: 1、改良了杧果基因组DNA的提取方法,提取出的杧果基因组DNA质量高,适合于ISSR扩增;叶绿体DNA的提取是采用先提取叶绿体,再经过蔗糖梯度(70%.60%.45%.30%.)纯化,然后采用CTAB法裂解叶绿体得到高纯度的叶绿体DNA。 2、优化了适于杧果属植物ISSR扩增的反应体系和反应程序:总体积20μL,10mmol/L Tris-HCl(pH 8.3),50mmol/L KCl,1.5mmol/L MgCl_2,0.2mmol/L dNTP,0.25μmol/L primer,1 Ur Taq polymerase(Takara Biotechnology,Japan),60ng DNA。扩增反应的程序:94℃5min预变性;94′C 1min,47℃—53℃(叶绿体DNA是50℃-55℃)1min,72℃2min,40个循环;72℃延伸10min。 3、从120条ISSR引物中筛选出20条条带清晰、多态性丰富的引物用于基因组DNA扩增;从50条ISSR引物中筛选出8条适合于叶绿体DNA扩增的引物,其中有7条是基因组DNA和叶绿体DNA共有的引物。 4、从30个引物中筛选出6个多态性好的ISSR引物建立DNA指纹图谱用于区分吕宋杧品种(系)。分析DNA指纹图谱,发现这6个引物中每个引物都能区分吕宋系列品种(系),吕宋杧和其它供试的7个品种(系)同源性低,而这7个品种(系):高州吕宋杧、湛江吕宋杧、田阳香杧、金钱杧、柳州吕宋杧、粤西一号、攀西红吕宋同源性较高,可归为一类。表明ISSR—PCR技术对杧果品种(系)的鉴定非常有效,能区分亲缘关系很近的品种(系)。 5、以38个杧果栽培种、扁桃、冬杧为试材,并从42个ISSR引物中筛选出9个多态性好的引物进行ISSR—PCR研究,聚类分析发现所有供试的23个广西地方品种与秋杧、马切苏杧、象牙杧和爱文杧归为一个大类,而且广西本地杧果品种之间的亲缘关系较近。 6、对广西农科院果树资源圃的33个杧果品种和2个近缘种扁桃、冬杧分别进行基因组DNA和叶绿体DNA ISSR分析。选出多态性好的7个ISSR共有引物,用UPGMA进行聚类分析,若以0.73为相似系数分界点,叶绿体DNA ISSR把35个样品分为四类,而基因组DNA-ISSR将35个样品归为二类。虽然叶绿体DNA ISSR比基因组DNA ISSR扩增的条带数少,但是它的多态性比率却高于基因组ISSR(79.4%vs 70.7%)。在杧果亲缘关系分析上,叶绿体DNA ISSR分析优于基因组DNA ISSR分析。 7、利用ISSR技术鉴别杧果生理病害。从42条ISSR引物中选用9条引物,对20个杧果样品进行ISSR—PCR研究,探讨其与果实生理病害关系。结果表明:20个杧果品种聚类为两组,8个患果实生理病害的品种聚类为一组,12个不表现果实生理病害的品种聚类为另一组。根据这一结果,可利用这9条引物对杧果品种是否易患生理病害进行早期初步鉴定。 8、利用ISSR技术鉴别杧果炭疽病。从120条ISSR引物中选用8个ISSR的引物,对台农一号、水英达、爱文、海顿等20个杧果品种进行炭疽病抗病性分析,结果显示ISS—PCR聚类关系与杧果炭疽病的抗性有很大的相关性,表明ISSR技术可作为早期鉴定杧果炭疽病抗性的一种方法
【学位授予单位】:广西大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S667.7

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 赵英;;分子标记在芒果上的应用研究[J];农业研究与应用;2013年05期
2 房志超;黄建峰;高爱平;;芒果ISSR反应体系的建立与优化[J];热带作物学报;2011年02期
3 闫林;黄丽芳;谭乐和;范睿;王晓阳;陈鹏;董云萍;;咖啡ISSR与RAPD-PCR反应体系优化[J];热带作物学报;2012年05期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 任军方;利用ISSR标记对海南保亭槟榔遗传多样性的研究[D];海南大学;2010年
2 胡翠平;百合杂交F1代遗传变异性状分析[D];东北农业大学;2013年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 宋婉,续九如;果树种质资源鉴定及 DNA 指纹图谱应用研究进展[J];北京林业大学学报;2000年01期
2 刘平,彭士琪,刘孟军,彭建营;分子标记在果树上的应用及前景展望[J];河北农业大学学报;2002年01期
3 房经贵,刘大钧,马正强;利用双杂合位点标记资料构建芒果遗传图谱[J];分子植物育种;2003年03期
4 孙洪,程静,詹克慧,张相武,杨艳会;ISSR标记技术及其在作物遗传育种中的应用[J];分子植物育种;2005年01期
5 张志宏,景士西,王关林;果树基因工程研究进展[J];果树科学;1995年03期
6 邓九生,赖炽昌,彭民璋;几个杧果品种的RAPD分析[J];果树科学;1999年02期
7 张潞生,李传友,贾建航,李绍华,王斌,肖兴国;猕猴桃雌雄性别的AFLP鉴别中DNA模板的制备[J];果树科学;1999年03期
8 彭建营,束怀瑞,彭士琪,孙仲序;与枣核性状相关联的RAPD标记的筛选[J];果树学报;2001年05期
9 乔玉山,房经贵,沈志军,章镇;果树农艺性状基因的分子标记及其应用[J];果树学报;2004年02期
10 杨廷策;芒果炭疽病发生与品种关系的调查[J];广西植保;1998年02期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 张承林;芒果(Mangifera indica L.)果实的生理病害及其病因的研究[D];华南农业大学;1997年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 谢永芳,舒坤贤,梁亦龙,袁帅,张继承;小鼠胚胎发育中期肠细胞增殖与凋亡的研究[J];癌变.畸变.突变;2005年01期
2 王子良,许丽艳,李恩民;质粒制备和反应温度对嵌套缺失技术的影响[J];癌变.畸变.突变;2005年02期
3 康振桥;季艳霞;杨志勇;苏光;崔彦芝;;血管内皮生长因子亚型在人乳腺癌细胞中的表达差异[J];癌变.畸变.突变;2006年03期
4 安刚;黄天华;谢庆东;王德刚;;pCXN2-mIZUMO对C57BL/6小鼠生育能力的影响[J];癌变.畸变.突变;2007年04期
5 朱斌;杨罗艳;赵晓昆;;膀胱癌多药耐药基因MDR-1与金属硫蛋白-3表达的关系[J];癌变.畸变.突变;2007年05期
6 ;山东果树资源概述[J];山东农业科学;1979年02期
7 郑红军;孙明远;宋福林;魏海蓉;李勃;;核果类果树分子标记研究进展[J];山东农业科学;2006年04期
8 王际振;刘亚琼;杨兵;王献;;ISSR分子标记及其在园林植物遗传育种中的应用[J];山东农业科学;2008年08期
9 毕玉平,廖俊杰,单雷,王兴军,徐平丽;番茄双抗TMV和CMV基因工程的研究[J];山东农业科学;1997年06期
10 单雷,毕玉平,王兴军,徐平丽,李广存;双抗TMV和CMV转基因番茄后代的遗传分析[J];山东农业科学;1998年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 徐义流;张绍铃;;梨活体花柱内花粉RNA的降解[A];食品安全的理论与实践——安徽食品安全博士科技论坛论文集[C];2005年
2 李好先;曹尚银;郭俊英;薛华柏;刘丽;谭洪花;张森;;分子标记类型及其在石榴种质资源研究中的应用[A];中国石榴研究进展(一)[C];2010年
3 邹鸣;彭尽晖;;观赏园艺植物花叶鉴定技术研究进展[A];园艺学文集5[C];2010年
4 张林;成海钟;周玉珍;娄晓鸣;吕文涛;张文婧;;62个朱顶红品种ISSR遗传多样性分析[A];中国球根花卉研究进展2011[C];2011年
5 朱立武;陈捷;叶振风;衡伟;贾兵;张水明;孙俊;;砀山酥梨幼果花萼发育及其调控技术研究[A];梨科研与生产进展(五)[C];2011年
6 李晓光;张建光;;梨叶片光合作用研究进展[A];梨科研与生产进展(五)[C];2011年
7 高军;孟志军;赵春江;张瑞瑞;任守华;;基于个体识别的果园精细管理系统的设计与实现[A];中国农业工程学会2011年学术年会论文集[C];2011年
8 王春花;成军;郎振为;吴煜;杨艳杰;张黎颖;刘妍;;基因表达谱芯片技术筛选XTP3蛋白反式调节基因[A];第一届全国人工肝及血液净化学术年会暨全国人工肝及血液净化攻关协作组成立大会论文集[C];2004年
9 唐南洪;王晓茜;李秀金;陈燕凌;;构建特异高表达人谷氨酰胺合成酶基因(hGS)的肝细胞[A];第三届全国重型肝病及人工肝血液净化学术年会论文集(上册)[C];2007年
10 王强;张茂君;;分子标记及其在苹果属植物研究上的应用[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张青婵;A亚群禽白血病病毒不同分离株的基因组和生物学特性比较[D];山东农业大学;2010年
2 张升祥;家蚕气味结合蛋白基因的研究[D];山东农业大学;2009年
3 李振东;东祁连山高寒草地优势植物内生细菌多样性研究[D];甘肃农业大学;2010年
4 姚小磊;基于TGF-β1与Bcl-2的抗干眼症中药高通量筛选体系的建立[D];湖南中医药大学;2010年
5 宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
6 秦伟;新疆野苹果繁育特性及种质资源亲缘关系研究[D];新疆农业大学;2010年
7 何小勇;翅荚木种源遗传多样性及其抗低温胁迫能力研究[D];中南林业科技大学;2007年
8 文亚峰;人心果品种资源亲缘关系及其授粉亲和性的研究[D];中南林业科技大学;2006年
9 杨谷良;梨新S基因的分离克隆及部分品种的S基因型、AFLP鉴定[D];中南林业科技大学;2007年
10 闫小玲;基于cpDNA单倍型和SSR分析的银杏群体遗传结构和谱系地理学研究[D];浙江大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 罗杨;柑橘变异材料的遗传鉴定与品质分析[D];华中农业大学;2010年
2 郑瑜;银杏核心种质构建初探[D];华中农业大学;2010年
3 曹晶;风疹病毒(RV)包膜糖蛋白E1特异基因片段的原核表达[D];南京医科大学;2009年
4 罗素娟;家蚕细胞周期依赖性蛋白激酶家族(CDK)的研究[D];浙江理工大学;2010年
5 陈晓平;家蚕30kD载脂蛋白19G1的表达和功能的初步研究[D];浙江理工大学;2010年
6 刘静;家蚕BmycaCR基因的原核表达和亚细胞定位研究[D];浙江理工大学;2010年
7 葛红秀;家蚕钙磷蛋白(BmCAPS)的原核表达及定位分析[D];浙江理工大学;2010年
8 梁莉惠;家蚕BmCH基因的原核表达和亚细胞定位研究[D];浙江理工大学;2010年
9 梁晓艳;人脂联素基因的原核表达纯化、抗体制备及应用[D];郑州大学;2010年
10 贾波;山东木瓜主栽品种的植物学性状及果实品质研究[D];山东农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 胡怡秀,臧雪冰,丘丰,聂焱,胡余明,胡淑梅,潘畅怀,周月婵;槟榔对小鼠精子的影响研究[J];癌变.畸变.突变;1999年01期
2 何振革;;海南省槟榔产业发展存在问题及对策[J];安徽农学通报;2007年13期
3 白玉;;DNA分子标记技术及其应用[J];安徽农业科学;2007年24期
4 雷新涛;陈业渊;张建斌;金志强;;芒果种质资源分子标记研究进展[J];安徽农业科学;2009年32期
5 汪岚,韩延闯,彭欲率,滕彩珠,周明全,胡中立,宋运淳;ISSR标记技术在莲藕遗传研究中的运用[J];氨基酸和生物资源;2004年03期
6 陈良秋;;海南岛槟榔园常见病虫害的防治[J];现代农业科技;2006年10期
7 陈良秋;;印度槟榔种质资源概述[J];现代农业科技;2007年05期
8 张克中,赵祥云,梁励,黄善武,张启翔;王百合雄性不育突变体小孢子败育的细胞学研究[J];北京林业大学学报;2003年03期
9 李群,肖猛,郭亮,李静,段文霞,陈放,王丽;四川省珍稀濒危植物延龄草遗传多样性分析[J];北京林业大学学报;2005年04期
10 张立荣,徐大庆,刘大群;SSR和ISSR分子标记及其在植物遗传育种研究中的应用[J];河北农业大学学报;2002年01期
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 邓建华;[N];海南日报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 莫饶;咖啡多胚现象与无融合生殖特性的分析鉴定及其育种利用的初步研究[D];华南热带农业大学;2005年
2 吴祝华;百合属部分种亲缘关系与岷江百合群体遗传结构研究[D];南京林业大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郝瑞娟;百合常规杂交及后代培养的研究[D];西北农林科技大学;2005年
2 姜福星;百合种质资源遗传多样性ISSR研究[D];南京林业大学;2006年
3 吴会芳;药用植物天麻遗传多样性的ISSR分析和SSR初分析及其保育策略[D];中国科学院研究生院(武汉植物园);2006年
4 马虹;利用RAPD标记研究百合的遗传多样性[D];上海交通大学;2007年
5 马丹慧;杏种质资源亲缘关系及分类地位的ISSR和SSR分子标记研究[D];吉林农业大学;2007年
6 孙芳;中国刺槐群体遗传多样性的ISSR分析[D];河北农业大学;2008年
7 邱长玉;茉莉花遗传多样性及亲缘关系的ISSR分析[D];广西大学;2008年
8 邓秀成;海南省槟榔产业链优化研究[D];华中农业大学;2008年
9 陈伟峰;羊蹄甲属植物杂交及亲本亲缘关系的鉴定[D];河南农业大学;2009年
10 赵德新;应用形态学和ISSR标记分析茄子遗传多样性[D];河南农业大学;2009年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 张红梅;邵元华;龙甜甜;项艳;王进;汤锋;;多花黄精ISSR反应体系的建立及正交优化设计[J];安徽农业大学学报;2012年03期
2 战晴晴;周亚奎;杨云;甘炳春;卢丽兰;;槟榔SSR反应体系的建立[J];江西农业学报;2012年09期
3 史辉;黄其梅;叶美娜;阮少江;陈勇;;爱玉ISSR反应体系的建立与优化[J];吉首大学学报(自然科学版);2014年02期
4 闫林;黄丽芳;谭乐和;范睿;王晓阳;陈鹏;董云萍;;咖啡ISSR与RAPD-PCR反应体系优化[J];热带作物学报;2012年05期
5 张安世;刘莹;赵利新;;均匀设计优化太行菊ISSR-PCR反应体系[J];生物技术;2013年05期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 张红梅;安徽省黄精种质资源遗传多样性的ISSR分析[D];安徽农业大学;2013年
2 张聪子;蛇莓种质资源多样性的RAPD分析[D];湖南中医药大学;2014年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 朱立武;柑桔叶片与种子蛋白质电泳带型分析[J];安徽农学院学报;1988年01期
2 成锁占;杨文衡;;果树资源的同工酶研究进展[J];河北农业大学学报;1988年02期
3 曲泽洲,王永蕙,张凝艳,李华;同工酶在枣品种分类研究中的应用[J];河北农业大学学报;1990年04期
4 彭建营,束怀瑞,彭士琪;一种适合枣和酸枣基因组DNA的提取方法[J];河北农业大学学报;2000年04期
5 刘平,彭士琪,刘孟军,彭建营;分子标记在果树上的应用及前景展望[J];河北农业大学学报;2002年01期
6 汤良玉,刘超,吴方正;大气氟化物在桑蚕体中积累的定量研究[J];蚕业科学;1984年03期
7 陈亮,杨亚军,虞富莲,高其康,陈大明;15个茶树品种遗传多样性的RAPD分析[J];茶叶科学;1998年01期
8 许蕊仙;蒋先华;秦智伟;;模糊聚类分析在甘蓝品种资源数量分类上的应用[J];东北农学院学报;1985年04期
9 刘兴久;许景刚;汪树明;;模糊聚类分析在土壤分类中的应用[J];东北农学院学报;1988年02期
10 海林,翁跃进;小麦耐盐种质遗传多样性的RAPD分析[J];西北植物学报;2000年06期
【相似文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 应东山;78份杧果种质指纹图谱构建[D];海南大学;2012年
2 罗睿雄;杧果抗炭疽病种质资源及分子标记初步筛选[D];海南大学;2013年
3 王惠;基于高通量测序鉴定金煌杧软鼻病相关致病基因的研究[D];广西大学;2012年
4 蔡燕徽;城市基调树种滞尘效应及其光合特性研究[D];福建农林大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026