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《广西大学》 2008年
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广西猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF3基因克隆及分子流行病学调查研究

刘海鹏  
【摘要】: 猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征的传染病。该病自发现以来给世界各国养猪业造成了巨大的经济损失。2006年夏秋之季,我国部分地区发生猪“高热病”疫情,对养猪业造成巨大损失,发现了高致病性猪繁殖与呼吸综合征变异病毒,证实疫情主要是由该病毒引起的。 本研究通过RT-PCR技术对2006月年至2008年2月送检的56份病料进行PRRSV检测,结果30份为阳性,阳性率达54%。本实验对这30份阳性病料作为研究对象,根据北美洲株ATCC-VR2332和中国标准株CH-1a的序列利用Primer设计一对针对ORF3基因的特异性引物GP3-1/GP3-2,通过RT-PCR扩增出约900bp的基因片段,与预期的目的片段大小相符。将其插入克隆载体质粒pMD18-T。构建重组质粒,对克隆的ORF3基因进行序列测定,测序结果显示ORF3基因全长765bp。包含完整的ORF3基因的开放阅读框架,编码254个氨基酸。将ORF3基因序列与VR-2332、FJ04A、JXA1、HuN、LV、VR2332、RespPRRS MLV和CH-1a的ORF3基因进行同源性比较,结果显示,30份毒株的ORF3基因序列之间的核苷酸同源性为90.8%~99.9%,推导编码的氨基酸序列之间的同源性为92.6%~100%;与VR-2332、FJ04A、JXA1、HuN、LV、RespPRRS MLV和CH-1a株的核苷酸同源性分别为87.9~90.0%、89.4%~90.7%、92.1%~99.7%、91.9%~99.4%、40.7%~41.2%、88.2%~89.6%、93.1~96.7%。与VR-2332、FJ04A、JXA1、HuN、LV、RespPRRS MLV和CH-1a株推导编码的氨基酸序列之间的同源性分别为90.2~92.5%、91.3%~93.8%、93.0%~99.7%、93.8%~99.6%、54.9%~56.9%、90.2%~92.5%、95.9~97.6%。表明国内流行毒株的ORF3基因区域变异较大,证实30份毒株均属美洲型。 把30株流行毒株与国内外已发表的48株PRRSV相应序列进行比较,并建立了遗传进化树。本研究获得的30株流行毒株均属于3个亚群中的亚群Ⅱ,并且ORF3基因序列的同源性和2006至2007年“高热病”期间分离得到的国内代表株较高,达到了97.7%~99.7%。 推导编码氨基酸的比较结果表明,分属于不同亚群的广西不同地区流行的PRRSV毒株在ORF3基因编码蛋白的潜在糖基化位点数7个。分别位于29aa、43aa、50aa、131aa、152aa、160aa、195aa。 本研究通过对PRRSV ORF3基因序列变化的比较,了解PRRS的流行状况,探索高致病性猪繁殖与呼吸综合征变异病毒的变异规律,为控制本病流行打下基础。
【学位授予单位】:广西大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:S858.28;S852.65

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李勇,梅书棋,郑新民,樊俊华,孟庆友,杨宜生;用RT-PCR对湖北省部分猪场猪繁殖与呼吸综合症的检测[J];华中农业大学学报;2000年04期
2 花象柏;对我省当前PRRS的流行情况之管见[J];江西畜牧兽医杂志;2003年02期
3 丁壮,万遂如,金宁一;2003年我国几种猪传染病流行动态[J];农产品市场周刊;2004年10期
4 姜平,简中友,马志勇,蔡宝祥,张振兴;中国某地区猪繁殖和呼吸综合征流行病学调查及病毒分离[J];南京农业大学学报;1996年03期
5 姜平,董永毅,许家荣,蔡宝祥,王立钧,倪兆朝;华东部分省市PRRS和猪伪狂犬病血清流行病学调查[J];畜牧与兽医;1999年06期
6 孟令伟,孙颖杰;猪蓝耳病的几种血清学诊断方法[J];中国动物检疫;1995年02期
7 沈强,卫秀余,金爱华,洪永权,姚龙涛;猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗的安全性及效力试验[J];中国兽医科技;2000年05期
8 郭宝清,陈章水,刘文兴,崔益洙;从疑似PRRS流产胎儿分离PRRSV的研究[J];中国畜禽传染病;1996年02期
9 蔡雪晖,郭宝清,柴文君,刘文兴,翁长江,刘光清;检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA方法的建立[J];中国预防兽医学报;2000年02期
10 刘文兴,蔡雪晖,郭宝清;猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)分离鉴定及其与欧、美PRRSV抗原的比较[J];中国畜禽传染病;1998年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴家强,颜世敢,胡北侠,任素芳,黄艳艳,张秀美;细胞培养对PRRSV-SD分离株滴度的影响[J];山东农业科学;2002年06期
2 刘澜;;荧光PCR技术在动物医学中的应用[J];安徽农学通报;2008年23期
3 金光明,杨倩;猪繁殖与呼吸综合症免疫学研究[J];安徽农业科学;2003年01期
4 赵坤,李敬玺,王三虎,王丽荣,王承民,李军民;河南地区PRRS的病原分离鉴定及血清学调查[J];安徽农业科学;2005年09期
5 卢高峰;夏平安;邱璜;李伟娟;王中明;刘明莉;;PRRSV Hn-1/06株GP5蛋白基因的克隆及表达载体的构建[J];安徽农业科学;2008年26期
6 隋慧;杨金生;;猪繁殖与呼吸综合征和猪2型圆环病毒病二联核酸疫苗的构建及其免疫效力[J];安徽农业科学;2009年11期
7 刘成倩;肖长峰;易建中;关平原;吴双林;陈斌;张天庆;;猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达[J];安徽农业科学;2009年22期
8 朱良强;王非;占松鹤;刘华;王军;何长生;江定丰;郑举;;安徽省猪蓝耳病疫苗临床免疫效果调查[J];安徽农业科学;2009年27期
9 梁望旺;熊忠良;刘泽文;杨克礼;伍锐;邓均华;段正赢;余爱冬;唐文娟;徐涤平;;猪繁殖与呼吸综合征病毒HBKM2株ORF7基因的克隆、序列分析及原核表达[J];安徽农业科学;2009年35期
10 尹国友;孙婕;陈兰英;赵祯;;猪繁殖与呼吸综合症流行株ORF_5基因遗传变异分析[J];安徽农业科学;2010年08期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 赵鹏;猪繁殖与呼吸综合征病毒在抗体选择压下的变异[D];山东农业大学;2010年
2 李红;CD163及其它蛋白在PRRSV感染细胞过程中的相互作用[D];山东农业大学;2011年
3 邢凤;猪抗PRRSV相关基因的鉴定及功能分析[D];山东农业大学;2011年
4 张德庆;C3d分子佐剂核酸疫苗的构建与免疫效果研究[D];山东农业大学;2011年
5 王刚;高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株感染所致的免疫损伤及免疫调控机理[D];山东农业大学;2011年
6 姜举娟;PRRSV HuB1株的分离鉴定及甘草酸体外抗PRRSV感染的研究[D];东北林业大学;2010年
7 郝晓芳;甘肃省猪繁殖障碍性疾病病毒性病原的分子流行病学调查及HP-PRRSV DNA疫苗的研究[D];中国农业科学院;2011年
8 周丹;猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株核酸疫苗的研究及免疫效果比较[D];四川农业大学;2011年
9 张博;H1N1亚型猪流感病毒分离鉴定、鉴别诊断及M2e重组质粒免疫效力研究[D];四川农业大学;2011年
10 张磊;感染PRRSV GD株强弱毒株Marc145细胞的差异表达基因筛选及调控研究[D];西北农林科技大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 宋飞;猪圆环病毒2型(WH株)和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒混合感染致病性的研究[D];华中农业大学;2010年
2 李燕;猪干扰素刺激基因ISG20的克隆、真核表达及其对PRRSV增殖的影响[D];华中农业大学;2010年
3 徐珊珊;重组杆状病毒介导的高致病性猪繁殖与呼吸综合征基因工程疫苗研究[D];华中农业大学;2010年
4 肖犟;PRRSV对断奶仔猪生产性能和免疫力相关指标的影响[D];华中农业大学;2010年
5 王艳伟;PRRSV感染激活RANTES产生的信号通路研究[D];华中农业大学;2010年
6 胡智斌;湖北省高致病性猪蓝耳病活疫苗(JXA1-R株)试用报告[D];华中农业大学;2010年
7 史平玲;猪FcγRⅢ介导PRRSV抗体依赖增强作用研究[D];郑州大学;2010年
8 孟祥珍;潍坊地区猪“高热病”流行病学调查和防控[D];山东农业大学;2009年
9 薛梅;潍坊地区猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查[D];山东农业大学;2010年
10 张金强;山东地区猪繁殖与呼吸综合征病毒感染状况调查与遗传变异分析[D];山东农业大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 简中友,姜平,马志勇,蔡家利,蔡宝祥,张振兴;ELISA 检测猪繁殖呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体方法的建立及血清流行病学调查[J];中国动物检疫;1997年05期
2 郭宝清,陈章水,刘文兴,崔益洙;从疑似PRRS流产胎儿分离PRRSV的研究[J];中国畜禽传染病;1996年02期
3 吴东来,郭宝清,李桂芝,蔡雪晖,王继科,褚桂芳;猪生殖-呼吸道综合征病毒抗原在死胎及新生仔猪体内的分布[J];中国预防兽医学报;1999年02期
4 仇华吉,郭宝清,童光志,刘文兴,于力;猪繁殖 - 呼吸道综合征病毒(PRRSV)CH-1a株基因型鉴定[J];中国兽医学报;1998年02期
5 杨汉春,黄芳芳,张旭,田海燕,查振林;用单克隆抗体鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株[J];中国兽医杂志;1998年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 沙娜瓦尔·塔希;张伟;王传锋;冉多良;;猪繁殖与呼吸综合征病毒新疆株ORF3基因的克隆与测序[J];新疆农业大学学报;2010年03期
2 李鹏;郑其升;李斐;周斌;曹瑞兵;陈溥言;;猪繁殖与呼吸综合征病毒河北地方株GF1107株ORF7基因的克隆与表达[J];中国兽医学报;2006年05期
3 沈国顺;薛娜;王宇;;猪繁殖与呼吸综合征病毒辽宁分离株ORF5基因的克隆与序列分析[J];中国畜牧兽医;2010年08期
4 党占国;夏平安;高进勇;尹彦涛;王建举;崔保安;陈溥言;;猪繁殖与呼吸综合征病毒河南分离株GP5基因的克隆及在293T细胞中表达[J];河南农业大学学报;2008年02期
5 赵娜;田宏;吴锦艳;满自萍;尚佑军;何生虎;刘湘涛;;猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的克隆及杆状病毒表达载体的构建[J];华北农学报;2009年01期
6 赵娜;田宏;祁燕蓉;满自萍;吴锦艳;尚佑军;何生虎;刘湘涛;;猪繁殖与呼吸综合征病毒兰州分离株ORF3基因的克隆及杆状病毒载体的构建[J];西北农业学报;2009年03期
7 刘成倩;肖长峰;易建中;关平原;吴双林;陈斌;张天庆;;猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达[J];安徽农业科学;2009年22期
8 杨玉艾;肖晶;杨亮宇;初晓辉;毕保良;孙永科;;猪PRRSV云南分离株主要蛋白基因克隆及序列分析[J];动物医学进展;2010年05期
9 范旭;李伟娟;刘玉松;徐红运;张凤华;赵琳;段志刚;夏平安;崔保安;;猪繁殖与呼吸综合征病毒河南分离株的遗传变异分析[J];河南农业大学学报;2010年02期
10 刘焕;冉多良;王一成;袁秀芳;徐丽华;;猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的克隆、表达与免疫印迹[J];新疆农业大学学报;2008年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 何晓明;张冠群;马静云;谢青梅;陈峰;毕英佐;;猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白的克隆与原核表达[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集[C];2008年
2 林志雄;何晓明;马静云;罗琼;谢青梅;陈茹;罗长保;陈荣光;田纯见;;PRRSV分离株GP5的基因序列分析及msyB-GP5融合表达质粒的构建[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集(上册)[C];2009年
3 魏宏;林锋强;庄向生;周伦江;王隆柏;;猪繁殖与呼吸综合征病毒福州株ORF2-7基因结构分析[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(上)[C];2005年
4 徐引弟;王治方;张青娴;焦海燕;郭成留;;猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株与普通株二重RT-PCR鉴别方法的建立与应用[A];中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2008年
5 希尼尼根;程安春;汪铭书;陈孝跃;文明;周伟光;郭宇飞;陈斌;贾仁勇;;猪繁殖与呼吸综合征病毒四川分离株ORF5基因的克隆及序列分析[A];中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第七次学术研讨会论文集[C];2004年
6 邓雨修;李玉峰;姜平;蒋文明;汤景元;;不同引物RT-PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的比较研究[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(上)[C];2005年
7 朱连德;;猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异和疫苗免疫保护[A];中国猪业发展大会暨中国畜牧业协会猪业分会第二届会员代表大会论文集[C];2007年
8 周艳君;安同庆;薛强;仇华吉;刘金霞;王云峰;田志军;彭金美;童光志;;猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白的表达及其单克隆抗体的制备[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
9 梁大明;;关于防控猪繁殖与呼吸综合征的反思[A];中国畜牧兽医学会养猪学分会2009年学术年会“回盛生物”杯全国养猪技术论文大赛论文集[C];2009年
10 李俊;王金宝;张祯涛;周顺;;猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)分子生物学研究进展[A];山东畜牧兽医学会养猪专业委员会第一届学术研讨会论文集[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;空调竞争:莫克隆彩电[N];厂长经理日报;2001年
2 ;克隆联想PC[N];中国经营报;2002年
3 本报记者 赵伟;奇瑞:克隆年代的另类[N];中国质量报;2001年
4 鲁钟鸣;要创新不要克隆[N];新华每日电讯;2001年
5 本报记者 马莹;在中国克隆国际名牌展览[N];中国贸易报;2001年
6 本报记者 侯朝晖;“克隆”人体 赚![N];厂长经理日报;2001年
7 经济学家温铁军○本报记者杨晓平;无法克隆的现代化[N];中华工商时报;2002年
8 本报记者 姚福泰;中国会克隆国际“6+3”的格局吗[N];中国汽车报;2002年
9 记者 姚备;复星重整克隆公司股权[N];中国证券报;2000年
10 本报记者 陈晓红;任鸣不愿克隆“人艺风格”[N];中国艺术报;2000年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张焱如;马生长激素(GH)基因序列、分子进化及其多态性的研究[D];内蒙古农业大学;2005年
2 李敏;牛免疫球蛋白重链基因中JH,Eμ片段敲除的研究和JH,Cμ基因的分析[D];中国农业大学;2005年
3 张运雄;欧文氏杆菌CXJZ95-198非纤维素降解特性及manA基因的克隆研究[D];中国农业科学院;2006年
4 黄晋玲;晋A棉花线粒体基因组BAC文库的构建及重要功能基因的筛选[D];中国农业科学院;2006年
5 黄俊琼;IL-31在皮肤炎症中的作用及作用机制研究[D];苏州大学;2007年
6 任鄄胜;水稻抗病基因同源序列分析及抗稻瘟病候选基因克隆[D];四川农业大学;2008年
7 黄志立;纳豆激酶基因的克隆及其在大肠杆菌与毕赤酵母中的表达[D];华南理工大学;2001年
8 王严;曲霉植酸酶基因的克隆及其表达研究[D];大连理工大学;2007年
9 喻麟;猪生长激素基因cDNA克隆与表达效应研究[D];四川大学;2007年
10 高志强;猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因组分子遗传特征分析[D];中国农业大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘海鹏;广西猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF3基因克隆及分子流行病学调查研究[D];广西大学;2008年
2 卢桂娟;猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查研究[D];广西大学;2005年
3 韩贞珍;猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF6、ORF5基因的克隆、核酸疫苗构建及鉴定[D];延边大学;2007年
4 邵蕾;猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的制备及初步应用[D];吉林农业大学;2007年
5 周盛华;快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫胶体金诊断试纸条的研制[D];东北农业大学;2008年
6 袁婧;猪繁殖与呼吸综合征直接免疫荧光诊断方法的建立及其应用[D];东北农业大学;2008年
7 郭海龙;猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪体内细胞因子与病毒的定量检测[D];中国农业科学院;2002年
8 安同庆;利用噬菌体展示技术鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原表位[D];中国农业科学院;2004年
9 刘伍梅;PRRSV感染Marc-145细胞的病毒形态发生学、细胞超微结构变化及细胞凋亡的研究[D];四川农业大学;2005年
10 鲁韦韦;猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立[D];南京农业大学;2008年
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