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《广西科技大学》 2014年
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一些呋喃香豆素调味剂分子潜在毒性机理和快速预警检测方法的研究

王倩倩  
【摘要】:为研究花椒毒素、香柠檬烯、花椒毒酚这三种呋喃香豆素调味剂分子的潜在毒性,本文首先用共振散射光谱法检测了这三种药物分子分别与大肠杆菌作用后的大肠杆菌DNA信号,证明这三种药物分子可以进入到大肠杆菌细胞内并与其DNA结合;然后运用紫外-可见分光光度法、DNA热变性实验、粘度实验、琼脂糖凝胶电泳实验、共振散射光谱法研究这三种药物分子与DNA的相互作用关系,通过比较这几种方法,选择出较为简便和快捷的共振散射光谱法,并用其检测和推算这三种分子与DNA的结合饱和值,再参照溴化乙锭和异补骨脂素的结合饱和值,来建立一种快速评价平面呋喃香豆素分子潜在毒性的新方法;最后考察环境因素对这三种药物分子与DNA相互作用的影响。主要研究结果如下: 1.用共振散射光谱法研究花椒毒素、香柠檬烯、花椒毒酚进入大肠杆菌DNA的能力,结果表明,这三种药品均能部分进入到大肠杆菌细胞内,并与大肠杆菌DNA结合,且其进入大肠杆菌的能力相差不大,只有微小的区别,作用至8.5h时,香柠檬烯组与花椒毒酚组的信号强度几乎相同,花椒毒素组的稍次之,说明香柠檬烯与花椒毒酚进入大肠杆菌的能力比花椒毒素稍强。 2.通过紫外-可见分光光度法、DNA热变性实验、粘度实验、琼脂糖凝胶电泳法、共振散射光谱法来探究这三种药品与DNA的相互作用的方式,其中琼脂糖凝胶电泳法表明该三种药品确实与DNA发生了作用,共振散射光谱法、紫外-可见分光光度法,DNA热变性实验、粘度实验的结果均表明这三种药物分子与DNA之间可能存在嵌插结合。且由比较得出,这几种方法在研究花椒毒素、香柠檬烯、花椒毒酚与DNA相互作用方式中,共振散射光谱法更为灵敏和快捷。 3.用共振散射光谱法检测并推算出在中性环境中花椒毒素、香柠檬烯、花椒毒酚与DNA的结合饱和值分别为0.18、0.18、0.24,而溴化乙锭、异补骨脂素与DNA的结合饱和值分别为:14.70、0.34,由此可知,花椒毒酚的毒性稍大于花椒毒素和香柠檬烯的毒性,但这三者的毒性均略小于异补骨脂素的毒性,远小于溴化乙锭的毒性,由此来建立一种快速评价平面呋喃香豆素分子潜在毒性的新方法。 4.用共振散射光谱法探究环境因素对花椒毒素、香柠檬烯、花椒毒酚与DNA结合饱和值的影响,改变环境条件或因素,这三种药物分子与DNA的结合能力也发生改变:酸性环境、碱性环境、葡萄糖、低浓度的Zn2+存在的环境可降低花椒毒素与DNA的结合饱和值,氯化钠、谷氨酸、维生素C、L-脯氨酸可使其结合饱和值增大;葡萄糖、Zn2+可降低香柠檬烯与DNA的结合饱和值,酸性环境、氯化钠、L-脯氨酸、维生素C可使其结合饱和值增大,碱性环境、苏氨酸对其结合饱和值无影响;葡萄糖、低浓度的Zn2+存在的环境可降低花椒毒酚与DNA的结合饱和值,酸性环境、氯化钠、维生素C、L-脯氨酸可使其结合饱和值增大,碱性环境和苏氨酸对其结合饱和值无影响。
【学位授予单位】:广西科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:O657.3;R284

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