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《广西医科大学》 2011年
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钙化性纳米微粒与人肾小管上皮细胞相互作用研究

孟冬冬  
【摘要】:目的观察体外细胞培养体系中人肾小管上皮细胞与钙化性纳米微粒的相互作用,探讨钙化性纳米微粒对人肾小管上皮细胞的损伤机制,探讨钙化性纳米微粒在肾结石形成中的可能作用。 方法体外建立人肾小管上皮细胞与钙化性纳米微粒共同培养体系,并使用NADPH氧化酶抑制剂apocynin进行干预处理。分别运用光镜、电镜观察人肾小管上皮细胞在与钙化性纳米微粒相互作用过程中的形态变化。实验分为四组,采用比色法测定24h后各组细胞培养液中乳酸脱氢酶、丙二醛、透明质酸的含量,同时检测细胞内NADPH氧化酶活性,采用RT-PCR测定各实验组细胞NADPH氧化酶亚基p22phox和p47phox mRNA的表达情况。 结果钙化性纳米微粒在体外能导致人肾小管上皮细胞的形态学改变,通过电子显微镜观察到人肾小管上皮细胞能够吸附、吞噬钙化性纳米微粒。钙化性纳米微粒也能导致人肾小管上皮细胞NADPH氧化酶p22phox、p47phox亚基mRNA的表达明显增强,同时伴有细胞氧化应激(oxidative stress,OS)损伤,使用apocynin干预后上述基因表达减少,同时细胞的氧化应激损伤也减轻。 结论在体外人肾小管上皮细胞具有粘附、吞噬钙化性纳米微粒的能力;钙化性纳米微粒能够引起人肾小管上皮细胞NADPH氧化酶的活性增强,导致细胞的氧化应激损伤。
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