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《广西医科大学》 2011年
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姜黄素对膀胱癌细胞株T24 miRNA表达谱的影响及其机制的探讨

刘红军  
【摘要】:背景与目的 姜黄素(curcumin)是印度香料姜黄中主要的姜黄类化合物,主要通过抑制细胞生长、促进细胞凋亡而发挥抗肿瘤效应,其具体机制包括了对多个信号通路的调节。最近有研究表明姜黄素能通过微小RNA(microRNA, miRNA)发挥抗肿瘤效应。miRNA是一类长约22nt的小分子RNA,与靶mRNA碱基不完全配对而抑制mRNA的翻译或完全配对直接降解mRNA,从而发挥转录后基因表达调控作用。在肺癌和胰腺癌细胞中发现姜黄素能影响miRNA表达谱,通过癌基因微小RNA(oncogenic microRNA, oncomiR)的改变进而发挥其抗肿瘤效应[1,2];同时不同细胞中miRNA谱的改变存在差异。我们拟研究姜黄素对膀胱移行细胞癌细胞系T24 miRNA表达谱的影响,探讨姜黄素抗膀胱癌细胞的miRNA的机制。 方法 采用Affemitrix miRNA芯片检测姜黄素对T24细胞miRNA表达谱的影响,以2倍改变值为阈值,筛选出差异表达miRNA分子;采用miRPATH在线软件分析差异表达miRNA分子参与的信号通路,并与文献中姜黄素对相关信号通路的影响进行比较。Western blot检测相关信号通路中差异miRNA分子靶基因蛋白的表达。 结果 12.5μM姜黄素处理后,T24细胞表达谱发生了改变(以2倍为阈值);与溶剂对照组比较,姜黄素处理24h组有4个miRNA分子表达差异明显,hsa-miR-185和hsa-miR-494表达下调,hsa-miR-671-5p和hsa-miR-1307表达上调;姜黄素处理48h组有7个miRNA分子表达差异明显(hsa-miR-181b、hsa-miR-138、hsa-miR-149、hsa-miR-339-5p、hsa-miR-193b、hsa-miR-455-3p和hsa-miR-744),且其表达均上调。 MiRPATH在线软件(microT_4.0版本)靶基因预测软件总共检索到的靶基因2946个,参与KEGG信号通路的靶基因数目总共有592个。这些靶基因参与的信号通路包括了KEGG归类的六种信号通路,其中信号转导、细胞移动、生长与死亡、细胞通讯、癌相关信号通路与肿瘤的发生发展密切相关。通过文献复习,我们从相关信号通路中选择了一些与细胞生长密切相关的靶基因进行验证,结果表明,细胞周期素cyclinD1表达下降,促凋亡因子Bax和Bid表达上调,核转录因子p65表达下调,TGF-β效应因子Smad3、Smad4,蛋白翻译启动因子成员EIF4E及血管生成因子VEGFA表达下调。 结论 姜黄素处理能使膀胱癌T24 miRNA表达谱发生改变;差异表达miRNA分子调节信号的通路中相关分子的表达可能是姜黄素抗膀胱肿瘤效应的重要机制。
【学位授予单位】:广西医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R285.5

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