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《广西医科大学》 2012年
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青蒿琥酯对人腺样囊性癌NACC细胞系的作用及其对裸小鼠荷瘤模型的影响

李异兴  
【摘要】:目的: 检测青蒿琥酯(ART)对人腺样囊性癌NACC细胞系体外增殖和凋亡的影响并评价其对裸鼠荷NACC细胞移植瘤模型的抑瘤效果,探讨青蒿琥酯作为腺样囊性癌治疗药物的可能性及相关机制。 方法: MTT法检测体外培养的人腺样囊性癌NACC细胞经不同浓度ART处理后的抑制效果。克隆形成实验检测对细胞增殖的影响。倒置显微镜及电镜下观察细胞形态学的改变;细胞划痕实验检测ART对细胞迁移能力的改变;流式细胞仪检测细胞凋亡情况及对细胞周期的影响。 建立裸鼠NACC实体瘤模型,注射7天后移植瘤形成,随机分为ART50.0、100.0、200.0mg/kg组、顺铂(DDP2.Omg/kg)组、联合组(ART50.Omg/kg+DDP1.0mg/kg)及对照组,经腹腔注射给药,隔日一次,共8次,观察肿瘤生长,绘制曲线图,并计算抑瘤率。接种23天后,处死动物,剥取瘤体,HE染色观察肿瘤组织病理学改变,免疫组织化学法检测Ki-67、CXCR4的阳性表达。 结果: NACC细胞体外实验:(1)MTT法检测显示ART在体外对人腺样囊性癌NACC细胞增殖有明显抑制作用,24、48、72h的半抑制浓度(IC50)分别为113.09、74.80、35.61μg/ml;呈明显的时间、剂量依赖性(P0.05)。(2)ART处理后的细胞出现染色质固缩,细胞器减少,形成凋亡小体,呈典型的细胞凋亡改变。(3)ART可以明显地抑制NACC细胞的迁移。(4)ART12.5μg/m1组凋亡率为(15.19±0.77)%,与对照组差异无显著性。其余各浓度组(25.0、50.0、100.0、200.0μ g/m1)的凋亡率分别为(17.92±0.26)%、(27.95±0.40)%、(58.91±3.81)%、(89.58±2.94)%,各组与对照组比较差异有显著性,各用药组间两两比较差异有显著性。(5)12.5、25.0、50.0μg/ml ART组均可见细胞被阻滞在G1期,当浓度达到50.0、100.0、200.0μg/ml时,ART可将细胞阻滞于G2期。 NACC细胞移植瘤模型检测结果: (1)ART50.0mg/kg组、ART lOO.Omg/kg组、ART200.0mg/kg组、DDP组和联合组实体瘤抑瘤率分别为36.01%、48.95%、78.67%、64.69%、63.29%。(2)瘤组织标本形态学观察显示:对照组肿瘤细胞生长旺盛,ART50.0mg/kg组、ART100.0mg/kg组、ART200.0mg/kg组见大量凋亡及坏死癌细胞,其中以ART200.0mg/kg组最明显。ART200.0mg/kg组、DDP组和联合组Ki-67的阳性表达率显著低于对照组(P0.01),ART100.0、200.0mg/kg组、DDP组和联合组CXCR4的阳性表达率显著低于对照组(P0.01)。 结论:(1)ART对人腺样囊性癌NACC细胞的增殖具有明显的抑制作用,并能诱导其凋亡,随ART浓度的上升,细胞凋亡率逐渐升高,呈明显的药物浓度依赖性。(2)ART可将NACC细胞阻滞在G1或G2期。(3)ART能够抑制NACC细胞裸鼠移植瘤的生长,提高NACC细胞对顺铂的敏感性,下调移植瘤中Ki-67、CXCR4的表达有关。
【学位授予单位】:广西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R285.5

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