1、荧光定量逆转录——聚合酶链反应检测地中海贫血β与γ珠蛋白mRNA水平的研究2、脐带血移植治疗重型β地中海贫血的探讨

【摘要】： 目的 1、探讨实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应 （FQ-RT-PCR）对血红蛋白珠蛋白mRNA水平检测的应用。2、研 究地中海贫血病人外周血及新生儿脐带血中α与γ珠蛋白mRNA水 平及临床意义。方法 用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应技术检 测38例地中海贫血病人和25例正常对照组外周血以及23例新生儿 脐带血中α与γ珠蛋白mRN水平。结果全部17例重型β地贫病人 的γ/（β＋γ）mRNA比值均增高，其平均值（7.83±22.17％）显著 高于正常对照组（1.55±4.14％）（P＜0.001）及轻型β地贫（ 0.99± 1.01％）（P＜0.001 )。轻型β地贫及正常对照组的γ/（β＋γ）mRNA比 值两组比较无明显差别（P＞0.05）。脐带血中γ/（β＋γ）MRNA比值 （44.08±22.41％）显著高于正常对照组（α＜0.001）。脐带血中胎儿 血红蛋白（HbF）比值（58.11±7.19％）也显著高于正常对照组（0.63 ±0.32％）（P＜0.001）。FQ-RT-PCR方法采用全闭管检测，不需对PCR 产物后处理，不仅避免了假阳性污染及其他潜在性误差，而且实时 检测确保定量准确。结论 1．实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应技 术是一种敏感性高、特异性强、定量准确的新方法，适合于血红蛋 白珠蛋白mRNA水平的定量测定。2．重型β地贫病人的γ/（β＋γ） mRNA比值显著高于正常人及轻型β地贫。γ/（β+γ）mRNA比值增 高是重型β地贫病人的特征之一。轻型β地贫的γ/（β＋γ）mRNA比值 与正常人比较无明显差别。检测地贫病人的β与γ珠蛋白mRNA水 平有助于地贫病人的临床诊断及疗效观察。3．脐带血中 Y ／（＋Y） InRNA比值及HbF 比值显著高于正常对照组。对脐带血珠蛋白 InRNA水平的研究有助于对人体发育过程中珠蛋白基因表达调控的 了解。