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《广西医科大学》 2008年
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急性心肌梗死骨髓间充质干细胞移植后Cx43/Cx45对心律失常的影响

许为炎  
【摘要】: 背景冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)是目前导致死亡的最主要的疾病之一。急性心肌梗死(AMI)后最主要的病理生理机制是心肌细胞缺血损伤、坏死,坏死的心肌细胞被纤维细胞所替代,丧失了收缩功能,最后导致不可逆的心室重构。种子细胞移植能修复或替代损伤的细胞,骨髓间充质干细胞(MSCs)移植治疗AMI具有光明的前景,但干细胞移植治疗尚处在初级阶段,人们对于其安全性尚存怀疑。MSCs移植后是否存在致心律失常作用?目前的相关研究鲜见报道。 目的探讨MSCs移植后能否改善AMI后梗死区及其边缘区的Cx43、Cx45表达及其对心律失常的影响。 方法60只Wistar大鼠随机分为正常对照组(Nor)、假手术组(Sham)、AMI+生理盐水(NS)组及AMI+MSCs组。采用开胸结扎冠状动脉左前降支(LAD)方法建立心肌梗死(AMI)模型,将从骨髓中分离、纯化和培养扩增并利用4,6-二脒基-2-苯基吲哚(4,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)标记的MSCs移植到梗死中心区和梗死边缘区。记录室性心律失常类型,12周处死动物,western blotting测定Cx43、Cx45(以Cx含量与GAPDH含量的比值表示)。 结果(1)Wistar大鼠MI模型的建立在AMI组,二次开胸并移植MSCs后存活12周的占63%(19/30)。以病理组织学检查为标准,ST段或J点抬高(>0.2mV)对AMI诊断的灵敏度为88.2%(15/17),特异性为100%(10/10)。在AMI组大体病理可见较明显的梗死瘢痕形成的大鼠中出现病理性Q波,绝大部分呈现QS型。(2)体外Msc原代贴壁生长,为形态均一的长梭形,排列密集。传代至5-6代时细胞基本维持原有形态生长,并不出现分化。(3)MSCs移植后第2、4、8和12周四个时段对DAPI标记的MSCs情况进行检测,发现经DAPI标记的MSCs在移植后的四个时段均可在荧光显微镜下检测到荧光,随着移植时间的延长,荧光逐渐减弱。(4)Nor组的Cx43含量(0.78±0.10)、Sham组Cx43含量(0.70±0.08)、AMI+NS组和AMI+Msc组所对应的正常区、梗死边缘区及梗死区Cx43的含量分别为(0.68±0.09、0.35±0.05、0.24±0.01)和(0.69±0.04、0.46±0.03、0.29±0.02),AMI+NS组梗死边缘区的Cx43显著低于AMI+Msc组梗死边缘区(P<0.05)。(5)Nor组Cx45含量(0.38±0.08),Sham组Cx45含量(0.36±0.06),AMI+NS组和AMI+Msc组所对应的正常区、梗死边缘区及梗死区Cx45的含量分别为(0.34±0.08、0.30±0.05、0.27±0.06)和(0.35±0.07、0.31±0.09、0.26±0.04),AMI+NS组梗死边缘区和AMI+Msc组梗死边缘区Cx45表达无显著差异(P>0.05);(6)Nor组诱发1例室速(1/15,6%);Sham组诱发1例室颤(1/15,6%);AMI+NS组诱发4例室颤,2例多形性室速,2例单形性室速(8/15,53%);AMI+Msc组诱发1例单形性室速,1例多形性室速(2/15,13%)。 结论(1)开胸结扎LAD建立AMI模型简单、方便、重复性好;(2)心肌内注射同种异体MSCs治疗AMI是可行、有效;(3)AMI后梗死边缘区Cx43表达减少,Msc移植后能改善Cx43的表达,减少室性心律失常的发生率。
【学位授予单位】:广西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R542.22

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【引证文献】
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