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《广西医科大学》 2008年
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表皮干细胞对角质形成细胞增殖的影响

魏潇  
【摘要】: [目的]表皮干细胞作为皮肤发生修复重建的关键源泉,其生物学作用尚不清楚。本实验通过探讨表皮干细胞对角质形成细胞的黏附、增殖等生物学行为的影响,进一步揭示表皮干细胞在组织修复过程中可能的生物学作用。 [方法]以Ⅳ胶原作为底物,培养表皮细胞。利用Ⅳ胶原的快速黏附法分离培养表皮干细胞。然后利用免疫细胞化学分别对角蛋白19和β1整合素进行鉴别。将制备的表皮细胞悬液接种在包被有Ⅳ胶原24孔板上(共6板)。随机分为2组:A组为未弃掉表皮干细胞组,B组为弃掉表皮干细胞组。制备好表皮细胞悬液后,调整细胞密度为1×10~5/ml,接种于铺有Ⅳ胶原的24孔板上。温箱内孵育15分钟后吸掉其中B组的上清液,调整细胞密度为1×10~5/ml后接种在24孔板上继续作角质形成细胞的培养。分别取培养1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天细胞每天取4孔在显微镜下进行细胞计数,取其平均值,绘制生长曲线图。 [结果]培养出来的表皮干细胞通过鉴定角蛋白19和β1整合素均有阳性表达;显微镜下可见A组(未弃掉表皮干细胞组)细胞在第2天即可看到大部分细胞贴壁,第3天可见细胞成集落样生长,且在第6天时大部分细胞连成片;而B组(弃掉表皮干细胞组)细胞贴壁相对缓慢,且形成的集落小而少。通过绘制生长曲线可见A组(未弃掉表皮干细胞组)细胞较B组(弃掉表皮干细胞组)细胞生长速度要快,并且在各时像点细胞数均高于对照组。 [结论]表皮干细胞对角质形成细胞的增殖有正性调节作用,表皮干细胞可能通过分泌某种“表皮干细胞因子”对角质形成细胞发挥作用。
【学位授予单位】:广西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R329

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