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《广西医科大学》 2009年
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乳腺癌微卫星不稳定性和DNA错配修复基因突变的研究

吕丽琼  
【摘要】: 研究目的:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,它是乳腺上皮细胞在多种致癌因素的作用下,发生了基因突变,导致细胞增生失控,呈现出无序、无限制的恶性增生。乳腺癌和其他许多肿瘤一样,是一种多基因参与,多种遗传学改变累积的结果。而细胞的基因组不稳定是导致乳腺癌发生的重要遗传学改变。目前研究认为,人类肿瘤的基因组不稳定性分为两种不同的类型:一种是微卫星不稳定性(microsatellite instability,MSI),另一种是杂合性缺失(Loss of heterozygosity,LOH)。MSI的发生与错配修复基因(mismatch repair gene,MMR)关系密切,MMR基因的表型改变,尤其是两个关键基因hMSH2和hMLH1的突变可能导致基因组不稳定而产生MSI,从而促进肿瘤的发生与发展。本试验通过研究乳腺癌中微卫星不稳定性和DNA错配修复基因hMSH2的突变情况,从hMSH2外显子突变致错配修复功能缺失影响细胞遗传稳定稳定性的角度探讨乳腺癌中MSI发生的可能机制,寻找更有效的分子标志,为乳腺癌的发生及预后评估提供理论依据。 研究方法:收集广西区肿瘤医院2004年至2008年的18例远离癌组织的乳腺组织,39例乳腺良性肿瘤组织和78例乳腺癌组织,用免疫组化方法测定所有标本hMSH2蛋白的表达情况。每例标本用DNA提取试剂盒提取DNA,针对hMSH2基因的16个外显子的碱基序列特征,有目的地设计有助于筛查基因碱基突变的PCR引物,每一例标本的DNA用PCR扩增hMSH2基因的16个外显子。分别将每一例外显子的PCR产物进行SSCP分析,对泳动变位或出现异常区带的PCR扩增产物进行DNA测序。参考文献选取D2S443、D11S988、D21S1436、D3S1766、D2S2739这5个微卫星位点,在基因库中查出相应的引物序列,用PCR扩增后用12%聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染显色后进行分析。所有数据均使用SPSS13.0软件进行统计学分析,分类资料采用卡方检验,等级资料采用秩和检验,多变量数据采用Logistic回归分析。所有P值使用双侧检验。 研究结果:①18例远离癌组织的乳腺组织hMSH2的阳性表达率为94.44%(17/18),39例乳腺良性肿物的hMSH2阳性表达率为76.92%(30/39),78例乳腺癌的hMSH2阳性表达率为39.74%(31/78),三组比较差别均有统计学意义(x~2=29.383,p=0.000)。乳腺癌中hMSH2的表达率明显减少。②Lgostici回归分析发现hMSH2的表达与乳腺癌临床因素中的肿物大小、腋窝淋巴结转移及临床分期有关。在肿物较大、有腋窝淋巴结转移及临床分期较晚的乳腺癌病例中更容易观察到hMSH的表达减少。③18例远离癌组织的乳腺组织未见hMSH2基因的突变,39例乳腺良性肿物组织中有1例检测出hMSH2基因的第7外显子突变(409C→G),78例乳腺癌组织中有9例检测出hMSH2基因的突变,分别是外显子6(322G→A,2例)、外显子7(378A→T)、外显子12(623C→G)、外显子12(631A→G,同义突变)、外显子13(727T→G)、外显子14(796A→C,2例同义突变)、外显子14(801A→G)。总突变率为11.54%(9/78),三组比较差别均有统计学意义(x~2=4.332,p=0.037)。在乳腺癌组织中更容易观察到hMSH2的突变。④18例远离癌组织的乳腺组织未见MSI发生,39例乳腺良性肿物组织中有5例至少1个位点发生MSI,MSI的发生率为12.82%(5/39)。78例乳腺癌中有35例至少1个位点出现MSI,MSI的发生率为44.87%(35/78),三组比较差别均有统计学意义(x~2=20.365,p=0.000),乳腺癌组织中更容易发生MSI。⑤Lgostici回归分析发现MSI与乳腺癌hMSH2的表达和临床因素中的临床分期、腋窝淋巴结转移有关。在临床分期晚及有腋窝淋巴结转移的病例更多的发现MSI。⑥关联分析发现hMSH2突变与蛋白表达减少有关(x~2=6.624,p=0.01),与MSI的发生有关(x~2=10.572,p=0.01)。hMSH2蛋白表达与MSI发生有关(x~2=7.463,p=0.006)。9例hMSH2突变的病例均有hMSH2蛋白的表达缺失及MSI的发生。 研究结论:①hMSH2在远离癌的乳腺组织中高表达,在乳腺良性肿物中表达下降,而在乳腺癌中表达率更低。hMSH2的表达缺失与乳腺癌的肿物较大、腋窝淋巴结转移及临床分期晚有关,提示hMSH2蛋白有可能作为乳腺癌判断预后的一个分子标志。②hMSH2基因在乳腺癌中无明显突变热点,突变分散于第6,7,12,13,14外显子,总突变率为11.54%。③乳腺癌中普遍存在着MSI,并与乳腺癌的临床分期和腋窝淋巴结转移有关,提示MSI可能作为判断乳腺癌临床分期的一个分子标志,可能对推测预后提供帮助。④hMSH2基因的突变导致有功能的hMSH2蛋白缺失,进而有可能影响MMR系统的功能,从而可能导致产生微卫星DNA的不稳定性,提示hMSH2在MMR系统中的起着重要作用,与乳腺癌的MSI发生关系密切。
【学位授予单位】:广西医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R737.9

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 谢发君;陈玮莹;温博贵;;微卫星不稳定性与结肠癌的研究进展[J];癌变.畸变.突变;2007年01期
2 张舒林,汤兵祥,梁庆正,李遂莹,何苡,杨丽萍;人类第9号染色体微卫星改变与非小细胞肺癌发生及转移的关系[J];中国肺癌杂志;2000年05期
3 赵金鹏,韩丽,潘尚哈,周尊强,刘昶;乳腺癌微卫星不稳定性研究[J];哈尔滨医科大学学报;2005年02期
4 李志刚,周晓军,孔庆兖,易龙,孟奎;乳腺浸润性导管癌微卫星不稳定性[J];临床与实验病理学杂志;2004年01期
5 刘泽军;新发现的人类错配DNA修复蛋白——hMLH3[J];生命的化学;2001年02期
6 冼志红,丛文铭,张树辉;毛细管电泳法检测肝细胞癌微卫星不稳定性的影响因素[J];世界华人消化杂志;2004年08期
7 翟瑜,苏力,杜权,杨月卿,郭贵军,李保庆,单保恩,王桂琦;食管癌组织3p、18q位点微卫星DNA序列不稳定性的研究[J];诊断学理论与实践;2005年02期
8 张树辉,丛文铭,冼志红,吴孟超;肝细胞癌8号染色体微卫星变异及其与临床病理特征的关系[J];中华病理学杂志;2004年05期
9 宋英娜,郎景和;子宫内膜癌的微卫星不稳定性与临床病理和雌、孕激素受体水平的关系[J];中华妇产科杂志;2000年05期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 董琳;李瑛;王全凯;孙金秀;许建宁;;甲基丙烯酸环氧丙酯致人支气管上皮恶性转化细胞DNA修复基因点突变的研究[J];癌变.畸变.突变;2009年01期
2 宋茜;效小莉;何惠华;;雌、孕激素受体及C-erbB2在子宫内膜癌中的表达和意义[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2009年06期
3 李瑛;许建宁;;DNA错配修复基因hMSH2与肿瘤关联的研究进展[J];国外医学(卫生学分册);2008年01期
4 吕丽琼;刘剑勇;张志明;赵荫农;张春燕;张力图;唐凯;;乳腺癌微卫星不稳定性及其与临床病理关系的研究[J];广西医科大学学报;2010年04期
5 郭怀斌;翟瑜;苏力;脱红芳;郭贵军;王春城;暴雷;;微卫星杂合性缺失与甲状腺癌相关性研究[J];河北医药;2009年17期
6 高展;刘楠;宋菡姝;戚基萍;;错配修复基因hMSH_2启动子甲基化与胶质瘤的关系[J];黑龙江医学;2011年10期
7 何苡,张舒林,高三友,杨丽萍,杨志荣;肺癌组织微卫星不稳定性及p16基因甲基化与肺癌发生、发展关系的研究[J];河南医学研究;2004年04期
8 李志刚,周晓军,孔庆兖,易龙,孟奎;乳腺浸润性导管癌微卫星不稳定性[J];临床与实验病理学杂志;2004年01期
9 殷晓璐;沈艳莹;;髓母细胞瘤8号染色体短臂的杂合性丢失[J];临床与实验病理学杂志;2007年04期
10 韩艳萍;刘宛;李艳芝;李培军;张巧丽;郭艳丽;;镉胁迫对拟南芥幼苗形态 生理和错配修复相关基因表达的影响研究[J];农业环境科学学报;2009年06期
中国博士学位论文全文数据库 前9条
1 高国庆;花生微卫星DNA的分离与多态性研究[D];福建农林大学;2002年
2 赵岩;子宫内膜癌中错配修复基因hMLH1与PTEN突变、微卫星不稳定性的相关性研究[D];中国医科大学;2006年
3 翟祥军;乳腺癌危险因素及其遗传易感性的分子流行病学研究[D];南京医科大学;2006年
4 张喆;成人乳腺干细胞体外分离、培养、生物学特性鉴定及基因组不稳定性的研究[D];吉林大学;2007年
5 倪海峰;鼻咽癌中微卫星不稳定与错配修复基因启动子甲基化研究[D];广西医科大学;2008年
6 刘国辉;错配修复基因、抑癌基因及微卫星不稳定性与乳腺癌相关性研究[D];吉林大学;2008年
7 丁月云;王不留行、黄芪对奶牛乳腺上皮细胞体外增殖与分泌功能影响的研究[D];南京农业大学;2008年
8 彭丽秀;激素受体与子宫内膜样腺癌发病的分子机制研究[D];中南大学;2009年
9 于淼;碱基切除修复基因MUTYH与结直肠癌的易感性的相关研究[D];中国医科大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王威;原花青素抑制人结肠癌细胞增殖及分子机制研究[D];暨南大学;2011年
2 马琳;NSAIDs对Iovo结肠癌细胞株hMLH1、hMSH2及MSI作用的初步研究[D];河北医科大学;2011年
3 毛礼蛟;CD44V6、TGF-β1和TGF-βRⅡ在乳腺癌中的表达和作用的研究[D];安徽医科大学;2001年
4 朱艳宾;遗传性子宫内膜癌临床病理特征及hMSH_2、hMLH_1基因表达的研究[D];天津医科大学;2002年
5 尹玲;P27、P53、PCNA在子宫内膜增生过长、腺癌中的表达及意义[D];安徽医科大学;2002年
6 付琼;乳腺癌和癌前病变微卫星不稳定性及错配修复基因表达的研究[D];浙江大学;2006年
7 刘兴顺;hEXO1基因单核苷酸多态与大肠癌易感性研究[D];山西医科大学;2006年
8 夏继飞;鸡马立克肿瘤发生后2号染色体微卫星标记变化的研究[D];南京农业大学;2006年
9 卿海燕;喉鳞状细胞癌微卫星不稳定性及杂合性丢失的研究[D];吉林大学;2007年
10 张立建;p16基因甲基化检测指导非小细胞肺癌放疗靶区设计的初步探讨[D];青岛大学;2007年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 丛文铭,吴孟超;肝癌基因组不稳定性的研究现状与展望[J];第二军医大学学报;2002年01期
2 张树辉,丛文铭,冼志红,吴孟超;肝细胞癌微卫星变异的研究[J];第二军医大学学报;2003年04期
3 张宇伟;大肠癌中微卫星位点不稳定性检测的研究[J];国外医学.遗传学分册;1997年03期
4 卢小梅,陈书媛,黄受方,张长淮;乳腺癌石蜡切片中显示雌、孕激素受体方法和阳性结果判断标准的探讨[J];中华病理学杂志;1996年06期
5 翟瑜,苏力,王桂琦,李保庆,单保恩;微卫星不稳定性与食管癌的关系[J];中华胸心血管外科杂志;2003年03期
6 李卫东,王亮,王秀琴,张春林,张涛,毛学正,吴旻;食管癌组织染色体位点特异性的杂合性丢失和微卫星DNA序列不稳定[J];中华医学遗传学杂志;1996年04期
7 赵雍凡,张军航,陈国弟,辛军平;中国人原发性食管癌微卫星DNA序列的不稳定性研究[J];中国胸心血管外科临床杂志;2000年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李艳萍;史福军;汪艳丽;;主要组织相容性复合体在人乳腺癌组织的表达[J];解剖科学进展;2005年04期
2 周晟;许三鹏;李娜萍;;乳腺癌组织中DNA依赖蛋白激酶的表达变化[J];华中科技大学学报(医学版);2005年06期
3 梁颜笑;杜洪;李雯;许进;;FHIT在乳腺癌中的表达及意义[J];现代医院;2006年07期
4 籍敏;王全红;;bcl-2在乳腺癌中的表达及意义[J];山西医科大学学报;2007年04期
5 段智;李代强;;MCM_5和E_2F-2在乳腺癌组织中的表达及意义[J];中国现代医药杂志;2007年04期
6 李春蕊;刘文励;孙汉英;周剑峰;;瘦素mRNA和瘦素受体mRNA在乳腺癌合并肥胖症患者乳腺癌组织中的表达及其与临床病理的关系[J];中国现代医学杂志;2007年13期
7 张慧娟;张波;张春红;张丽杰;;乳腺癌组织中VEGF的表达及临床意义[J];实用肿瘤学杂志;2007年05期
8 李玉兰;郑立红;;肿瘤抑制基因ING4在乳腺癌中的表达及其临床意义[J];中国优生与遗传杂志;2009年02期
9 张新;李茂竹;张锋;李海兵;;S100A4蛋白在乳腺癌中的表达和意义[J];中国医药指南;2009年05期
10 纪利;汪辉;魏军成;叶双梅;周丽;卢运萍;马丁;;岩藻糖转移酶9在乳腺癌中的表达及其临床意义[J];肿瘤防治研究;2009年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王英丽;朱丽娜;刘力华;;原癌基因HER-2超表达可能是老年性乳腺癌的重要病因学因素[A];全国肿瘤流行病学和肿瘤病因学学术会议论文集[C];2011年
2 高岩;郑敏;;Id mRNA在乳腺癌中的表达与彩色多普勒超声表现的相关性[A];中国超声医学工程学会第三次全国浅表器官及外周血管超声医学学术会议(高峰论坛)论文汇编[C];2011年
3 陈英剑;孙晓明;胡成进;闻新棉;;乳腺癌组织KLK5 mRNA的表达水平及其与临床病理特征的关系[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
4 丁春艳;桑梅香;单保恩;;MAGE-A4在乳腺癌组织和细胞系中的表达及对乳腺癌细胞凋亡的影响[A];河北省免疫学会第六次免疫学大会资料汇编[C];2010年
5 吴鸿雁;余慧萍;樊祥山;孟凡青;周强;;乳腺癌组织中DNA-PKcs表达及其与临床病理特征关系的研究[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年
6 黄超;赖建华;杨慧;李琳;余敏;谭德勇;;ARD1基因在乳腺癌中的表达研究[A];中国遗传学会七届一次青年研讨会暨上海高校模式生物E——研究院第一届模式生物学术研讨会论文汇编[C];2005年
7 杨开颜;俞康;李剑敏;黄卡特;周韧;;乳腺癌组织中P51基因的表达及其意义[A];2005年浙江省肿瘤外科学术会议论文汇编[C];2005年
8 赵缜;刘维燕;陈前;谢蕴;浦文;;Rab4和Rab22在乳腺癌中的表达及意义[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
9 郑春梅;王薇;卢晓潇;李丹;;乳腺癌47例血管密度与TF相关性分析[A];中华医学会第十次全国超声医学学术会议论文汇编[C];2009年
10 黄晓曦;陈依期;许东坡;高凌云;王镛;;金属蛋白酶组织抑制因子在乳腺癌中的表达及其应用意义[A];2001'全国肿瘤外科学术会议论文汇编[C];2001年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 张中桥;bag-1及bcl-2可为乳腺癌早诊标记[N];中国医药报;2004年
2 特约记者 李积轩;今年船市令人忧[N];中国船舶报;2002年
3 张中桥;VEGF对乳腺癌的生长起重要作用[N];中国医药报;2002年
4 战忠利;VEGF表达增高与乳腺癌转移相关[N];中国医药报;2003年
5 记者 毛磊;乳腺癌干细胞被美专家发现[N];新华每日电讯;2003年
6 中关村在线 村里人;CRT要涨价?主板市场扑朔迷离[N];华夏时报;2002年
7 凝烟;最新的体验[N];中国电脑教育报;2002年
8 ;主板价格情况分析[N];计算机世界;2000年
9 ;IC录音机市场快速扩大[N];中国信息报;2000年
10 王群;倾向性COX-2抑制剂的临床研究[N];中国医药报;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 吕丽琼;乳腺癌微卫星不稳定性和DNA错配修复基因突变的研究[D];广西医科大学;2009年
2 王杰;Duffy抗原趋化因子受体(DARC)抑制人乳腺癌细胞的生长和肺转移[D];复旦大学;2006年
3 何英;抗骨桥蛋白抗体治疗乳腺癌骨转移的实验研究[D];中南大学;2007年
4 刘国辉;错配修复基因、抑癌基因及微卫星不稳定性与乳腺癌相关性研究[D];吉林大学;2008年
5 毕晓峰;乳腺癌相关蛋白表达分析及与临床预后关系的研究[D];中国协和医科大学;2008年
6 孔令泉;无意义mRNA降解系统在人乳腺癌中的作用研究[D];重庆医科大学;2007年
7 郑一琼;FHL1在乳腺癌紫杉联合蒽环类药物新辅助化疗中的预测价值[D];中国人民解放军军医进修学院;2009年
8 路璐;糖皮质激素的代谢酶及受体在乳腺癌组织中的表达及临床意义研究[D];吉林大学;2012年
9 董华英;化疗后乳腺癌组织中的癌干细胞微球体分离培养与鉴定[D];重庆医科大学;2011年
10 令亚琴;甲状腺素受体B1基因在乳腺癌组织中的表达调控研究[D];甘肃农业大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 龙飞;PRL-3、MVD与乳腺癌临床病理特征关系研究[D];中国医科大学;2005年
2 王崇杰;乳腺癌高危型人乳头状瘤病毒感染的临床研究[D];山东大学;2009年
3 黄任贵;生长激素受体和生长抑素受体2、3、5在人乳腺癌组织中表达及相关性研究[D];广西医科大学;2005年
4 廖代祥;乳腺癌中LRP16基因的表达及功能研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2005年
5 于晶;KLK4 mRNA实时荧光定量检测方法学建立及初步临床应用[D];山东大学;2005年
6 郭莉;抑癌基因TSG101及其剪接变异体在乳腺癌中表达的研究[D];暨南大学;2005年
7 韩艳春;p38MAPK信号分子与uPA在乳腺癌中表达的相关性研究[D];中国医科大学;2006年
8 郭艳丽;应用8号人染色体α-卫星探针和FISH技术检测乳腺肿瘤中的超二倍体细胞[D];华南热带农业大学;2006年
9 李文金;乳腺癌芳香化酶表达与临床病理因素的关系[D];苏州大学;2007年
10 张春苗;PARP-1在非典型增生乳腺组织中的表达及意义的研究[D];中国医科大学;2009年
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