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《广西医科大学》 2009年
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大鼠急性心肌梗死经5-氮胞苷诱导的骨髓间充质干细胞移植后Cx43/Cx45表达水平的研究

柯红红  
【摘要】: 目的探讨体外大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchyma stemcells,MSCs)的分离、纯化、扩增及5-氮胞苷(5-Aza)对MSCs诱导分化为心肌样细胞的作用;大鼠急性心肌梗死(Acute myocardial infarction,AMI)模型的建立和经5-Aza作用的MSCs移植治疗后能否改善梗死心肌缝隙连接蛋白43(Cx43)、Cx45的异常表达。 方法在无菌条件下分离wistar大鼠股骨骨髓,采用密度梯度离心与贴壁培养法相结合进行MSCs培养、纯化和扩增。在获得稳定的细胞系后,选取生长良好的MSCs用不同浓度5-Aza分别作用不同时长,收集细胞行透射电镜观察并行α-肌动蛋白、Cx43、肌钙蛋白T的免疫细胞化学检测。wistar大鼠180只,随机分为4组,每组45只:①正常对照组(Nor组);②假手术组(Sham组);③心肌梗死+生理盐水组(MI组);④MSCs移植组(MSCs组)。采用开胸结扎冠状动脉左前降支(left anterior descending coronaryartery,LAD),术后10分钟即行心电图检查,S-T段呈弓背向上抬高,幅度超过0.2mV,伴R波振幅降低,认为AMI模型制作成功。成功存活7天并补齐的四组Wistar大鼠,按干预后4周、8周和12周又分为3个亚组,每亚组15只大鼠。MI组和MSCs组7天后二次开胸。MSCs组心肌梗死的边缘区和中心区植入诱导后的MSCs。MI组注射等量生理盐水。Sham组只开胸未行注射。于术后4周、8周和12周分别处死动物,取左心室组织在荧光显微镜下观察DAPI标记的供体细胞迁移、分布情况;同时取正常区、边缘区、梗死中心区心肌组织,-80℃保存。提取心脏组织蛋白行Western blotting测定Cx43、Cx45含量。 结果Wistar大鼠MSCs经过分离、贴壁、纯化能在体外进行增殖并保持良好的未分化潜能。经10μmol/L 5-Aza持续作用15天的MSCs,8周时呈现出心肌样细胞的典型改变,并有部分细胞出现自发搏动,频率为15-20次/分。电镜下可见大量糖原颗粒、线粒体和肌丝样结构。MSCs在体外DAPI标记率达100%,随着时间延长荧光强度逐渐减弱。干预后4周、8周、12周的Cx43在各组正常区含量均无差异(P均>0.05)。干预4周、8周、12周后,在MI组和MSCs组中,缺血区Cx43的含量均较正常区明显减少(P<0.01);4周、8周、12周MSCs组缺血区Cx43的含量多于MI组缺血区(P<0.05)。各组梗死区Cx43的含量均较正常区减少。各组梗死区Cx43的含量均较缺血区明显减少(P<0.01)。干预后8周、12周MSCs组梗死区Cx43的含量多于MI组梗死区(P<0.05)。干预后4周、8周、12周Cx45含量在各组正常区无显著差异(P均>0.05)。干预后4周,在MI组中,缺血区的Cx45的含量表达多于正常区(P<0.01)。干预后8周、12周,MI组缺血区和正常区Cx45的含量无区别(P>0.05);MSCs组缺血区Cx45的含量少于正常区(P<0.01)。干预后4周、8周、12周MSCs组缺血区Cx45的含量少于MI组(P<0.05)。各组梗死区的Cx45含量均较正常区减少(P<0.01)。4、8、12周MI组中梗死区Cx45含量少于缺血区(P<0.01),8、12周MSCs组中梗死区Cx45的含量少于缺血区(P<0.01)。MI组和MSCs组比较,梗死区Cx45的含量无统计学差异。 结论MSCs在体外有良好的增殖能力并保持其未分化潜能特性,MSCs经适宜浓度5-Aza诱导作用后可向心肌样细胞分化。AMI导致心肌Cx43、Cx45蛋白水平表达下降;经适宜浓度5-Aza诱导的同种异体MSCs移植能上调梗死区和缺血区Cx43的表达,下调缺血区Cx45的表达,对梗死区Cx45表达没有明显影响。
【学位授予单位】:广西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R542.22

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【引证文献】
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1 顾国萍;Cx30.2、Cx43和Cx45在急性心肌梗死大鼠心脏组织中的表达及阿尔马尔对其影响[D];郑州大学;2011年
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1 褚俊,徐美清,何华,陈柯,叶书来,翟志敏;犬急性心肌梗死模型制备的方法学研究[J];安徽医学;2002年02期
2 吴铁军,蔡振杰,俞世强,胡军,胡巧霞,赵科研,周和平;不同浓度5-氮胞苷对骨髓间质干细胞体外诱导分化的作用[J];第四军医大学学报;2003年15期
3 钟国强,申颖;缝隙连接与心律失常[J];广西医学;2004年12期
4 杨国勋;刘唐威;钟国强;李金轶;;心电图在家兔急性心肌梗死诊断中的应用[J];广西医学;2007年08期
5 张润峰,王继生;建立大鼠心肌梗死模型的若干问题探讨[J];山西医科大学学报;2004年01期
【共引文献】
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1 郭春雨;殷惠军;蒋跃绒;薛梅;张璐;史大卓;;急性心肌梗死大鼠心肌基因表达谱构建、鉴定及功能基因的研究[J];北京大学学报(医学版);2008年03期
2 蒋正英;覃数;叶强;胥雪莲;;保温对大鼠心肌梗死模型存活率的影响[J];重庆医学;2007年01期
3 靳激扬;;心肌梗死的动物模型制作[J];中国CT和MRI杂志;2008年04期
4 石红梅;李莉;魏建;彭定宏;杨亚丽;崔臻;;急性ST段抬高性心肌梗死患者急诊溶栓疗效及安全性分析[J];当代医学;2011年17期
5 胡国梁,黄佐,侯健,赵宝珍,黄海怡,周智慧;大鼠骨髓单个核细胞移植治疗心肌梗死[J];第二军医大学学报;2004年09期
6 戴淑芳;龙晓凤;纪丽丽;田辉;宫德正;徐静;孙艺平;;建立一种家兔心肌梗死模型的新方法[J];大连医科大学学报;2012年01期
7 李琦;余志龙;郑大东;;他汀类药物在心血管疾病中的临床应用进展[J];东南国防医药;2011年05期
8 陈章荣;罗开良;殷跃辉;胡蓉;肖骏;;蛋白酶体抑制剂MG-132改善大鼠心肌梗死后心肌结构重塑[J];第三军医大学学报;2008年08期
9 张勇,蔡振杰,陈如坤;小鼠骨髓基质干细胞定向诱导为前体心肌细胞[J];第四军医大学学报;2004年17期
10 张勇;陈如坤;;兔缺血心肌中移植自体骨髓基质干细胞的治疗作用[J];第四军医大学学报;2006年01期
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1 郑景辉;心血瘀阻证心肌微环境变化及对骨髓间充质干细胞移植的影响[D];湖南中医药大学;2010年
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6 王志红;间充质干细胞逆转大鼠衰老的作用[D];南方医科大学;2011年
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8 卜聪亚;ACEI、AT_1RA对心梗大鼠LVRM的部分干预机制——CT-1、GP130、AN、Hsp56的调控[D];重庆医科大学;2003年
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10 张润峰;FNS对MI大鼠HRV和心脏神经重构的作用及部分机制探讨[D];重庆医科大学;2004年
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2 刘雯雯;左卡尼汀对波动性高糖处理的大鼠心肌细胞脂联素受体表达影响的实验研究[D];第二军医大学;2011年
3 孔秀珍;心尖肥厚型心肌病临床观察与分析[D];郑州大学;2010年
4 武刚;骨髓间充质干细胞移植对大鼠急性心肌梗死后心肌细胞凋亡的影响[D];郑州大学;2011年
5 于波涛;不同胎牛血清浓度对大鼠骨髓间充质干细胞体外培养的影响[D];郑州大学;2011年
6 陈志亮;麝香保心丸干预模型大鼠急性心肌梗死后心室重构及抑制炎性反应的机理研究[D];南京中医药大学;2011年
7 江波;大鼠肾上腺细胞体外培养观察及鉴定[D];南昌大学;2011年
8 翟华季;冠心病与脑动脉粥样硬化狭窄的相关性研究[D];南昌大学;2011年
9 燕学波;P53抑制剂诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究[D];第四军医大学;2011年
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1 ;心电图测量标准化[J];临床心电学杂志;1999年01期
2 苏德淳;常志文;芦玲巧;王红霞;张立克;;缝隙连接蛋白43在缺血性心律失常中的作用[J];首都医科大学学报;2006年03期
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2 王电烨;β受体阻滞剂对大鼠急性缺血心肌间隙连接蛋白43的影响[D];山西医科大学;2007年
3 许为炎;急性心肌梗死骨髓间充质干细胞移植后Cx43/Cx45对心律失常的影响[D];广西医科大学;2008年
【二级引证文献】
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1 陈杰;缬沙坦对大鼠急性心肌梗死后骨架蛋白F-actin与HSP27表达的影响[D];郑州大学;2013年
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1 刘延玲,蔡凯华,唐昊;实验动物心肌梗塞模型的建立和染色方法的改进[J];动物学杂志;2002年04期
2 赵学,富维骏,袁文俊,杨宗才;清醒大鼠冠状动脉阻断再通技术及其应用[J];第二军医大学学报;1996年05期
3 艾国平,粟永萍,闫国和,冉新泽,刘晓宏,罗成基,程天民;骨髓间充质干细胞的分离与培养[J];第三军医大学学报;2001年05期
4 张本斯,王凡,邓力,羊惠君,李瑞祥;大鼠骨髓间充质干细胞的分离纯化与初步鉴定[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2003年02期
5 颉玉欣,张进贵,郭晓华,赵萌,李宗锋;体外分离大鼠骨髓间充质干细胞方法研究[J];河北医科大学学报;2004年03期
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1 ;唐都医院治疗急性心肌梗死获新突破[J];第四军医大学学报;2000年01期
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6 隋欣炯;刘志;;糖尿病酮症酸中毒合并急性心肌梗死患者的危险因素分析[A];中华医学会急诊医学分会第十六次全国急诊医学学术年会论文集[C];2013年
7 陆江;姜荣钦;;中西医结合治疗急性心肌梗死32例体会[A];2009年全国危重病急救医学学术会议论文汇编[C];2009年
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3 本报记者 曹玉祥;炎夏尤须防急性心肌梗死[N];医药养生保健报;2008年
4 关爱;防急性心肌梗死注意魔鬼时间[N];农村医药报(汉);2009年
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9 记者 田雁;我市急性心肌梗死患者呈低龄化趋势[N];大同日报;2011年
10 记者王淑军;中医药治疗急性心肌梗死作用显著[N];人民日报;2003年
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1 李四海;急诊PCI治疗急性心肌梗死的临床疗效分析[D];新疆医科大学;2010年
2 林丽容;急性心肌梗死急诊PCI治疗152例临床分析[D];福建医科大学;2011年
3 刘小青;冠心Ⅱ号联合骨髓间充质干细胞移植对大鼠急性心肌梗死的影响[D];广西医科大学;2009年
4 韩森;影响急性心肌梗死预后相关因素分析[D];山东大学;2009年
5 王德水;急性心肌梗死住院患者临床特征和治疗现状调查及近期预后多因素分析[D];中国人民解放军军医进修学院;2007年
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7 赵昕;珲春地区急性心肌梗死住院患者临床特点对比观察[D];延边大学;2007年
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