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《广西医科大学》 2009年
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葡萄籽原花青素对2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡的干预机理研究

刘湘红  
【摘要】: 目的:通过体内动物实验方法,探讨葡萄籽原花青素(GSPE)对2型糖尿病(T2DM)致大鼠胰岛细胞凋亡的干预机理。 方法:取SPF级SD雄性大鼠适应性饲养一周后,给予高脂饮食后腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病大鼠模型。动物造模成功后分4组。(1)普食对照组:普通饮食喂养,以消毒的自来水灌胃干预。(2)糖尿病对照组:高脂饲料喂养,注射STZ成模后以消毒的自来水灌胃干预。(3)治疗1组[GSPE(250mg/kg.d)剂量组]:高脂饲料喂养,注射STZ成模后给予高剂量GSPE灌胃干预。(4)治疗2组[GSPE(50mg/ kg.d)剂量组]:高脂饲料喂养,注射STZ成模后给予低剂量GSPE灌胃干预。各组灌胃干预4周。大鼠高脂喂饲结束后采血检测空腹血糖(FBG)、空腹血清胰岛素(FINS),血甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)。各组实验动物终止实验后,即麻醉大鼠,取血清和胰腺组织,检测以下指标:制作光镜病理切片做HE染色,观察胰腺组织细胞形态结构;TUNEL法观察胰岛细胞凋亡的形态学变化及细胞凋亡率;免疫组织化学法检测细胞死亡信号转导效应酶caspase-3在胰岛中的表达情况;检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)的活力及血清中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量;检测血清中TNF-α、IFN-γ的含量。 结果:(1)本实验成功的建立了2型糖尿病动物模型。(2)2型糖尿病大鼠发生胰岛细胞凋亡。(3)2型糖尿病大鼠SOD的活力和GSH的活性降低,MDA、NO的产量升高,与普食对照组相比具有显著性差异(P0.05);GSPE能改善糖尿病引起上述指标的异常,与糖尿病对照组相比较,具有显著性差异(P0.05),(4)糖尿病时大鼠血清中的TNF-α,IFN-γ等促凋亡因子增加,与正常对照组大鼠血清中TNF-α、IFN-γ的水平相比较有显著性差异(P0.05),而GSPE能抑制上述因子的释放,与糖尿病对照组相比较有显著性差异(P0.05)。(5)GSPE可以拮抗2型糖尿病时胰岛细胞的凋亡,降低胰岛细胞的凋亡率,与糖尿病对照组相比较,差异有显著性意义(P0.05)。(6)GSPE可以阻断caspase-3的促凋亡途径,从而改善胰岛细胞的凋亡状况,与糖尿病对照组相比,差异有显著性意义( P0.05)。 结论:当机体内发生糖尿病病变时,机体内出现氧化应激作用、胰岛细胞中的凋亡因子表达,并且胰岛细胞发生凋亡;而GSPE可通过抗氧化、抗炎症及调控凋亡因子的表达而发挥抗凋亡的作用,从而抑制胰岛细胞的凋亡。
【学位授予单位】:广西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R587.1

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