收藏本站
《广西师范大学》 2004年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

沙田柚花粉壁蛋白和酸柚花粉壁蛋白的比较

吕建珍  
【摘要】:采摘沙田柚(Citrus grandis Var. Shatinyu Hort)以及野生酸柚(Citrus grandis L.)盛花期的雄花,将两者的花粉放入冷的pH6.7、1%Nacl缓冲液{10%蔗糖、0.45mM Ca2+(Cacl2 ·6H2O)、1.63 mM B(H3BO3)},在 5min,10min,20min,30min,40min,50min,60min,3h等不同时间内抽滤、提取其壁蛋白后直接透析除盐,然后在紫外分光光度计280nm下测定OD值。由于免去了研磨、缓冲液静置提取、冷冻离心等步骤,因此大大缩短了材料的处理时间。不同时间取样测定结果表明:(1)两者花粉壁释放的蛋白质在40min内随提取时间的增加而增加,40min后不再继续释放,并保持一定的释放量:沙田柚自40min后,花粉壁蛋白的释放量一直保持在0.364 mg/ml的水平上;而酸柚自40min后,壁蛋白的释放量一直保持在0.488 mg/ml的水平上。(2)5min提取的滤液中蛋白含量已达全部释放蛋白质的一半以上,这同Lewis在月见草中的结果是一致的。(3)进一步的分析发现,酸柚花粉壁蛋白质的释放,无论在速度上,还是在量上,都比沙田柚的大。以酸柚花粉壁不同时间提取物为对照组,采用非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、等电聚焦(IEF-PAGE)、双向电泳(IEF/SDS-PAGE)等电泳技术对沙田柚和酸柚花粉壁不同时间蛋白提取物进行比较分析。结果发现:(1)两者不同时间花粉壁渗出液经非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离,考马斯亮蓝 R-250 染液染色,都可明显分出7个区带,并且,在Ⅴ区,两者共同出现谱带A。所不同的是沙田柚5min蛋白提取液图谱中已经含有绝大部分蛋白谱带,随后,各时间提取液图谱中的蛋白谱带在此基础上于各区中或增或减;而酸柚直到提取时间为40min时,其图谱中才基本上包含有绝大部分的蛋白谱带,随后的50min、60min、3h谱带的分布就是在此基础上有增有减,并且这种增减情况主要发生在Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ与Ⅵ区间、Ⅶ区。(2)两者花粉壁蛋白经变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后都出现多条染色带,经与在同样条件下电泳的标准蛋白比较,并辅助 SPSS数理统计软件对两者的SDS-PAGE图谱分布情况进行统计分析发现沙田柚不同时间提取液中所含的主要蛋白质的分子量主要是分布于1、3、4、5等四个区间内。而酸柚花粉壁则主要含有分子量位于2、4、5等三个区间内的蛋白质。(3)两者的等电点测定结果表明,在pH8.0区域内、pH6.5~5.8、pH5.8~5.4、pH5.4~4.4之间,沙田柚与酸柚不同时间花粉壁蛋白提取液的IEF图谱都具有共同的谱带。所不同的是随着提取时间的增加,沙田柚花粉壁的碱性蛋白增加,而 WP=3 酸柚既有碱性蛋白的增加,又有酸性蛋白的增加。(4)经银染法染色后的沙田柚和酸柚花粉壁蛋白图谱,分辨率较高,可分辨出近100个蛋白质斑点。两者的蛋白质格局完全不一样,就pH值分布区域而言,沙田柚花粉壁的蛋白质斑点主要分布于pH7.2-5.8之间,而酸柚的花粉壁蛋白质斑点密集于pH8.0-6.5;pH5.4-3.95两个区域范围之间;就分子质量分布区域而言,沙田柚花粉壁的蛋白质斑点主要密集于14.4Ku~43.0Ku,而酸柚在20.1Ku~43.0Ku和31.0Ku~97.4Ku两个区域内分布有较多的蛋白质斑点。值得注意的是:沙田柚花粉壁蛋白在pH7.2~5.8范围内存在有很多小分子量的蛋白质,如a、b、c、d、e点,其中有一点e落入花柱S-糖蛋白范围内(pH6.2~9.5,MW 24KD~32KD),根据对S-核酸酶在不亲和反应中作用机制的两种假说,它们很有可能与花粉S基因产物有关。这些电泳结果表明:(1)相似性可能反映花粉中可溶性蛋白的共同性;(2)明显差异性反映了植物品种和基因的差异,可作为遗传分析的一种附属手段。 此外,根据实验结果,讨论了沙田柚和酸柚花粉壁蛋白的比较及其意义,同时也探讨了花粉自交不亲和性调控的可能的作用机制。以期为解释沙田柚配子体自交不亲和——花粉S基因产物作用机制提供理论依据,为花粉S蛋白质的分离、鉴定提供理论基础。
【学位授予单位】:

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 石憬林;食用花粉是否“必须脱敏”和“必须破壁”[J];养蜂科技;1996年03期
2 梁世平,夏惠君,周嫦,杨弘远;烟草花粉脱外壁过程中发现的一种特殊花粉壁结构[J];电子显微学报;1996年05期
3 刘金兰,徐珍秀,聂以春;棉花花粉不同发育时期的扫描电镜观察[J];华中农业大学学报;1994年01期
4 刘林,白华举;西瓜花药与花粉显微结构研究[J];中国西瓜甜瓜;2003年05期
5 刘长恩,朱林;应用扫描电子显微镜研究葡萄花粉的简报[J];园艺学报;1981年04期
6 苗前,蓬丽艳,杜红霞;玉米花粉破壁的利弊[J];蜜蜂杂志;1999年10期
7 杨晓萍,余志勤;油菜花粉破壁方法研究[J];华中农业大学学报;2004年06期
8 朱奇,陈彦,朱亚农;花粉医疗机制的最新研究进展[J];养蜂科技;1998年04期
9 徐树华;我国水稻主要雄性不育类型花粉发育的细胞学观察[J];中国农业科学;1982年02期
10 许具晔;蜂花粉对人体的保健作用[J];农产品加工;2004年10期
11 徐祖荫,孙启跃,李干洲;破壁花粉形态学检查计算标准刍议[J];蜜蜂杂志;1994年02期
12 简世楷;;提高花粉的产量和质量[J];蜜蜂杂志;1984年04期
13 许玲;胡云梯;;不同水解方法对测定花粉中色氨酸含量的影响[J];新疆农业大学学报;1987年04期
14 浦惠明,戚存扣;甘蓝型油菜花粉的低温保存研究[J];江苏农业科学;1991年02期
15 李忠谱;花粉的应用[J];养蜂科技;1994年06期
16 刘炳仑;我国14种有毒蜜粉源植物的花粉形态[J];中国养蜂;1995年03期
17 王开发,张玉兰,李超,陆雁勇;复方花粉饲料添加剂饲养鸵鸟试验[J];养蜂科技;1998年03期
18 ;新型花粉饲料添加剂[J];饲料与畜牧;2000年02期
19 黄文诚;花粉在美容业上的应用[J];畜牧兽医科技信息;2001年10期
20 唐芸;鹅掌楸属植物花粉生活力的检测[J];广西林业科学;2002年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 孙丽萍;;花粉抗疲劳作用的研究[A];中国营养学会特殊营养第七届学术会议会议资料汇编[C];2009年
2 叶满红;周斌;张大隆;;茶花粉治疗大鼠前列腺肥大分子机理研究[A];第四届中国畜牧科技论坛论文集[C];2009年
3 刘人杰;刘凤霞;王忠祥;于相丽;李铁刚;;102例白桦花粉致敏临床资料分析[A];中华医学会2009年全国变态反应学术会议论文汇编[C];2009年
4 陈大荣;祁桂丽;;刮痧砭术疗法治疗过敏性神经性皮炎体会[A];中国针灸学会2009学术年会论文集(上集)[C];2009年
5 周斌;吴玉娟;;花粉与蜜蜂级型分化关系的研究[A];海峡两岸第四届蜜蜂生物学研讨会论文集[C];2004年
6 郅军锐;任顺祥;;胡瓜钝绥螨和花粉对天竺葵上西花蓟马的作用(英文)[A];农业生物灾害预防与控制研究[C];2005年
7 朱萍萍;廖惠珍;王章敬;刘凌燕;;花粉枸杞对大鼠镉中毒性损伤的拮抗作用[A];中国毒理学会第四届全国学术会议论文(摘要)集[C];2005年
8 郑珺;孙兰香;王紫秋;雷凯琴;;油菜花粉中槲皮素和山柰素总含量的HPLC法测定[A];第二届浙江中西部科技论坛论文集第七卷(药学分卷Ⅱ)[C];2005年
9 黄飞龙;马三梅;陶爱林;王永飞;邹泽红;赖荷;;刺苋花粉过敏原Prf23的表达优化及其免疫学鉴定[A];中华医学会2009年全国变态反应学术会议论文汇编[C];2009年
10 齐名;邢嘉翊;王艾丽;熊华;;二球悬铃木花粉的变应原蛋白分析[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 邬时民;花粉市场花落“洋人家”[N];医药经济报;2001年
2 陆基宗;花粉制品的利与弊[N];中国医药报;2001年
3 胡春黎;春季踏青谨防花粉过敏[N];中国中医药报;2008年
4 中国蜂产品协会;蜂花粉浑身都是宝[N];保健时报;2006年
5 钟音;即溶花粉成女性饮品新时尚[N];中国现代企业报;2009年
6 宋丽华;春暖花开防过敏[N];中国中医药报;2009年
7 周宁人;小心花粉与果蔬交叉过敏[N];大众卫生报;2009年
8 史晓蒙;花粉营养丰富功效非凡[N];医药养生保健报;2007年
9 无锡市第一医院副主任药师 陆基宗;植物精华属花粉[N];中国医药报;2006年
10 王娟;我国科学家采用生物技术破壁蜂花粉[N];中国乡镇企业报;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐晓辉;玉米柱头全基因组表达谱分析及花粉—柱头互作相关基因的鉴定[D];山东农业大学;2012年
2 郎志宏;马铃薯(Solanum tuberosum L.)花粉特异表达基因SBLR的克隆、分析及对玉米的遗传转化[D];中国农业大学;2003年
3 赵丽娟;小黑杨(Populus simonii×P.nigra)花粉功能基因组和蛋白质组研究[D];东北林业大学;2011年
4 赵燕;马铃薯(Solanum tuberosum L.)花粉特异表达基因ST901的克隆及其功能研究[D];中国农业大学;2004年
5 尚忠林;细胞外钙调素对花粉细胞内钙离子的影响及其信号传递途径的研究[D];中国农业大学;2001年
6 冯晓黎;生长素对花药及植物维管发育作用的研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2005年
7 马金霞;非编码基因zm401对玉米小孢子发育的影响[D];中国农业大学;2005年
8 耿金虎;我国主要应用赤眼蜂种的若干应用基础研究[D];中国农业大学;2005年
9 黄国涛;美人蕉属(Canna)植物引种与品种分类研究[D];南京林业大学;2005年
10 徐国华;梨自花与异花授粉后花粉胞内钙离子水平及花柱自发荧光变化研究[D];南京农业大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 吕建珍;沙田柚花粉壁蛋白和酸柚花粉壁蛋白的比较[D];广西师范大学;2004年
2 贝广霞;实用花粉静电分选装置的试验与研制[D];山东农业大学;2004年
3 李迎军;意大利蜜蜂春繁期代用花粉中适宜钙磷水平的研究[D];山东农业大学;2012年
4 陈建军;白皮黄瓜种子败育的初步研究[D];华中农业大学;2004年
5 郑本乐;意大利蜜蜂春繁阶段代用花粉中适宜蛋白质水平的研究[D];山东农业大学;2012年
6 朴永浩;苹果梨授粉用花粉的采集、运输及贮藏特性研究[D];延边大学;2002年
7 魏晓峰;花粉/种子表达融合启动子合成及其表达载体构建[D];西南大学;2010年
8 冯永庆;板栗短雄花序芽变形态、生化及细胞学研究[D];新疆农业大学;2005年
9 陈珊;蜡梅属植物花粉低温及超低温保存研究[D];华中农业大学;2005年
10 王鹏;角额壁蜂在苹果梨园生活力下降的原因分析[D];延边大学;2008年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978