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广西地不容种质资源遗传多样性的ISSR和RAPD的分析

覃艳  
【摘要】: 广西地不容(Stephania kwangsiensis Lo.)是广西特有植物,属防己科千金藤属多年生草质落叶藤本植物,生于石灰岩的石山地区。主要产于广西西北部、西南部的靖西、凌云、那坡等县。其也是民间少数民族常用草药,其块根是生产中药颅痛定的重要原料,在临床上用于镇痛、镇静、解热等。 由于近年来广西地不容受到了人为乱采乱伐等因素的影响,蕴藏量呈逐年下降趋势,大规模人工栽培迫在眉睫。种质资源是育种的物质基础,是发现和利用基因资源的源泉。种质资源遗传多样性研究将为评估基因资源开发前景以及引种栽培和资源保护提供重要信息。研究广西地不容的遗传多样性对广西地不容的保护和拓宽栽培广西地不容种质资源具有重要意义。 本研究分别采集广西百色地区靖西居群、凌云居群、那坡居群以及引种居群,其中引种居群是引自广西靖西、凌云、那坡等县,栽培于桂林的广西植物园。4个居群叶片总计92份样品材料,利用ISSR和RAPD标记技术对4个居群遗传多样性进行了比较分析。10个ISSR引物共扩增出61条带,其中60条具多态性,多态性位点百分率为98.36%。4个居群多态性百分率在73.77%~86.89%。Nei的基因多样性指数(H)为0.3 379,Shannon信息多态性指数(I)为0.5 055。3个野生居群Nei的遗传分化系数Gst=0.1 613表明:83.87%遗传变异分布在居群内,16.13%的遗传变异分布在居群间。引种居群与3个野生居群间的遗传一致度达0.8 846。 15个RAPD引物共扩增出82条带,其中72条具多态性,多态性位点百分率为95.12%。4个居群多态性百分率在74.39%~78.05%。Nei的基因多样性指数(H)为0.3284,Shannon信息多态性指数(I)为0.4912。3个野生居群Nei的遗传分化系数Gst=0.1563表明:84.37%遗传变异分布在居群内,15.63%的遗传变异分布在居群间。引种居群与3个野生居群间的遗传一致度达0.8297。 分别根据ISSR标记和RAPD标记数据,对广西地不容居群进行了UPGMA聚类分析,结果表明:3个野生居群的个体不能单独聚为一类,居群内的遗传多样性水平较高,但居群间的遗传分化不明显。 基于这两种标记的供试材料的遗传相似系数进行了相关分析,结果表明RAPD和ISSR分析的遗传相似性在广西地不容中达到了极显著相关(相关系数r=0.8925r=0.01) 研究结果表明,ISSR和RAPD是2种有效检测居群遗传结构的分子标记;广西地不容具有较高的遗传多样性水平,引种居群与3个野生居群遗传多样性差异不大,表明迁地保护的广西地不容很大程度保持了原生居群的遗传多样性,引种保护较为成功。同时也要


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