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《广西师范大学》 2006年
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大黄抗SARS病毒有效成分的研究

刘卫兵  
【摘要】: 目的: 从中国传统中药大黄中寻找抗SARS病毒的活性部位。 材料: 从常用抗病毒中药中选择了红豆杉、苦参碱、甘草、紫玉盘、甜茶、木耳多糖、青蒿琥脂、荔枝核、鸦胆子、雄蚕蛾、罗汉果甜甙、罗汉果鞣质、黄芩甙、芒果、大黄、贯众十六种中药。分别用植物化学方法提取分离,制备十六种药材的提取物。 方法: 底物序列Thr-Ser-Ala-Val-Leu-Gln-pNA被活性3CLpro蛋白酶识别并切割序列内的Gln-pNA之间化学键,切割后产生的pNA在405nm有光吸收值,可被酶标仪定量检测。在96孔透明板中进行反应,体系含有2.7 uM 3CLpro重组蛋白, 2%DMSO,50 mM Tris·Cl (pH 7.5), 1 mM DTT, 1 mM EDTA,和250 uM TQ6-pNA。反应时间为3小时,分别在0小时,1小时,2小时,3小时测405nm吸收值。计算得到3CLpro的催化速率Vo(酶催化反应过程中,单位时间内产物生成的量)。以不加抑制剂的酶催化活性为100%催化活性,计算出化合物的抑制活性。以3CLpro筛选为模型,进行活性筛选。以IC50值为指标,评价提取物抗SARS病毒的活性。对红豆杉、苦参碱、甘草、紫玉盘、甜茶、木耳多糖、青蒿琥脂、荔枝核、鸦胆子、雄蚕蛾、罗汉果甜甙、罗汉果鞣质、黄芩甙、芒果、大黄、贯众十六种提取物进行活性筛选,用活性筛选结果指导下一步的分离工作。筛选结果证实十六种提取物中有两种提取物对SARS病毒有抑制作用,其中大黄提取物的抑制率最高。针对大黄提取物进行分离,对每一个分得组分用3CLpro筛选模型进行活性筛选。 大黄75%乙醇提取物加水,分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,
【学位授予单位】:广西师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R284

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