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《四川大学》 2003年
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嗜麦芽窄食单胞菌对氟喹诺酮类抗菌药的分子耐药机制研究

陶传敏  
【摘要】: 目的 研究嗜麦芽窄食单胞菌的体外药敏情况,为临床选药提供实验依据;主动外排泵抑制剂CCCP对氟喹诺酮类药物的耐药的影响,了解主动外排机制对其耐药的影响;研究嗜麦芽窄食单胞菌拓谱异构酶Ⅱ和Ⅳ的突变与氟喹诺酮类药物的耐药关系,为新药开发提供实验依据。 方法对收集到的144株临床分离的嗜麦芽窄食单胞菌采用琼脂二倍稀释法测定其对9种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)。主动外排泵抑制剂—氰氯苯肼(CCCP)对喹诺酮类抗菌药物耐药性的影响,即在CCCP(5ug/ml)存在时,观察加替沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、司帕沙星的MIC的改变。选择对环丙沙星MIC>2mg/L且主动外排机制阴性的菌株,对其gyrA和parE的喹诺酮决定区域基因分别进行PCR扩增,纯化后直接测序。  结果 144株嗜麦芽窄食单胞菌对多种常用抗菌药物呈现多重耐药,但对复方新诺明、替卡西林/克拉维酸以及氟喹诺酮类抗菌药的耐药率较低,尤其是新型的氟喹诺酮类抗菌药具有很强的抗菌活性,其中抗菌活性由高到低依次是加替沙星、司帕沙星、左氟沙星和环丙沙星。CCCP能增强氟喹诺酮类抗菌 药物的抗菌活性,尤其使环丙沙星的耐药率降低了13.3%。主动外排 机制不仅存在于FQNS耐药菌株,而且也存在于FQNS敏感菌株。但 是主动外排机制对FQNs耐药菌株的影响较大,占1/3以上。嗜麦芽 窄食单胞菌在DNA解旋酶最常见的83位和87位没有突变,同时在 G”A的整个QRDRs没有氨基酸的改变,并且其83位是Gin而不是其 它革兰阴性菌常见的Ser或T七r。5株菌中的parE各有1株菌在402和 432突变,但是该突变与FQNS耐药不相关。 结论临床标本中嗜麦芽窄食单胞菌的分离率有增加的趋势,该 菌对抗菌药物呈现多重耐药,但对复方新诺明、替卡西林/克拉维酸以 及FQNS的耐药率较低,经验上可选用复方新诺明或氟哇诺酮类抗生 素治疗,对于严重感染可采用复方新诺明和替卡西林/克拉维酸联合或 新型氟哇诺酮类治疗。主动外排泵抑制剂CCCP在体外能降低FQNS 的抗菌活性,尤其是对FQNS耐药的菌株影响更明显。嗜麦芽窄食单 胞菌对FQNS耐药与主动外排泵有关,可能与外膜的通透性降低有 关,但与DNA解旋酶和拓谱异构酶IV的靶位点改变关系尚不明确, 需进一步研究。
【学位授予单位】:四川大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R96

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