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《四川大学》 2005年
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实时定量PCR分析脂肪酸合酶在口腔鳞癌中的表达

王玉凤  
【摘要】:【目的】 利用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-PCR)技术相对定量脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FAS)在口腔鳞癌、癌旁以及正常口腔组织中的表达情况,为通过脂肪酸合成途径进行口腔鳞癌诊断、治疗方案的选择提供依据。 【方法】 选择已确诊的口腔鳞癌患者共20例,切取其新鲜手术标本的癌组织、癌旁组织及边界正常组织,将组织切剪成碎块,提取细胞总RNA,经寡聚脱氧胸腺嘧啶逆转录为cDNA,加入相应的Taqman引物、探针在FTC2000实时荧光定量基因扩增仪实施定量PCR扩增,以脂肪酸合酶(FAS)作为待测基因,葡萄糖3-磷酸甘油醛脱氢酶(gluceraldehyde phosphate dehydrogenase,GAPDH)作为内标基因以监测RT-PCR系统的稳定性,进行定量及系列稀释,建立标准曲线,确定实时RT-PCR的扩增效率。然后,监测20份待检标本的FAS和GAPDH的循环阈值(Ct)。分别采用△△Ct法和2~(-△△Ct)进行数据分析,相对定量FAS的表达,比较FAS在三种组织中的表达情况。 【结果】 术后病理诊断证实,20例均为鳞癌。FAS在癌组织中表达最高(5.000±1.0760),在癌旁次之(6.450±1.063),而在正常组织中表达最低(7.625±1.223)。其中17例患者癌组织中的FAS mRNA表达水平皆高于正常组织4倍以上,最高达16倍(P0.05)。有13例
【学位授予单位】:四川大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R739.8

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