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《四川大学》 2005年
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组织工程化肌及成肌细胞移植的实验研究

孙天威  
【摘要】:目的:(1)探讨应用体外培养的同种异体兔成肌细胞和小肠黏膜下层复合后,体外培养构建兔组织工程化肌,修复骨骼肌缺损;(2)观察经局部肌肉注射移植的体外培养同种异体兔成肌细胞在骨骼肌内的表达;(3)观察通过鼠尾静脉注射移植体外培养的同种异体成肌细胞后,成肌细胞在体内的分布及对动物的全身影响。 方法:(1)取出生7d内幼兔四肢肌组织,经多步酶消化法与差速贴壁法获得足量、纯净成肌细胞,用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记,与小肠黏膜下层体外复合培养构建组织工程化肌,植入异体兔体内修复腓肠肌1.5 cm×1.0 cm大小的骨骼肌缺损作为实验组;用单纯小肠黏膜下层修复对侧同样骨骼肌缺损作为对照组;用单纯骨骼肌缺损作为空白对照组。术后4、6和8周各处死动物取材,行大体和组织学观察、局部细胞免疫的定量分析和免疫组织化学检测;(2)取出生7d内幼兔四肢肌组织,经多步酶消化法与差速贴壁法获得足量、纯净成肌细胞,用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记,溶于1ml液体中,于兔后腿腓胀肌行多点注射,对照组行生理盐水局部注射,术后三周行注射肌肉大体和组织学观察及BrdU特异性染色,观察成肌细胞在肌肉组织中的表达;(3)取出生3天内的幼鼠四肢骨骼肌,经多步酶消化法与差速贴壁法获得足量、纯净成肌细胞,应用5-~(125)I-2-′脱氧尿嘧啶核苷(~(251)I-UdR)标记成肌细胞,实验组经鼠尾静脉注射1ml已标记的体外培养成肌细胞悬液,对照
【学位授予单位】:四川大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R318.0;R622.2

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【参考文献】
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