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《四川大学》 2006年
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重金属离子与菠菜23 kD和17 kD蛋白相互作用的光谱学研究

吴守锋  
【摘要】:高等植物PSⅡ中存在33、23和17kD 3种外周蛋白,分别由细胞核基因组中psbO,PsbP和BsbQ基因编码,具有维持PSⅡ水裂解活性的功能。其中17kD蛋白可以增加Cl~-的结合,而23kD蛋白与维持Ca~(2+)和Cl~-的结合相关。 本论文分三部分:应用光谱学探讨重金属离子分别与菠菜23kD和17kD外周蛋白的相互作用,利用生物信息学方法探讨23kD和17kD蛋白的演化趋势及利用纯化的外周蛋白免疫新西兰兔制备抗血清。 第一部分:用荧光光谱和紫外差吸收光谱分析了溶液中23kD蛋白与Hg~(2+)和Mn~(2+)相互作用的性质以及由金属离子结合所引起的蛋白可能构象变化。主要结果是:(1) 在不同pH条件下(2.0—10.0),金属离子与23kD蛋白的相互作用有差异,表现为光谱学性质的不同。在所有pH条件下,Hg~(2+)和Mn~(2+)都能对蛋白内源荧光产生明显的淬灭效应。金属离子对荧光光谱最大荧光发射峰的位置影响不大,仅有±1nm的变化,表明金属离子的结合对23kD蛋白芳香族氨基酸残基的微环境有轻微影响。(2) 紫外差吸收光谱检测到明显的配体向金属的电荷转移(LMCT,ligand-to-metal charge transition)谱带。不同pH下Hg~(2+)的LMCT带形状非常相似,强度随着金属离子浓度增加而显著上升;而Mn~(2+)体系中,当pH2.0时甚至出现了负信号,这种现象还鲜有报道。LMCT谱带的结果表明23kD蛋白中存在着多个Hg~(2+)或Mn~(2+)的结合位点。对pH7.0条件下金
【学位授予单位】:四川大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:X173

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