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《四川大学》 2006年
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玉竹凝集素(polygonatum odoratum(Mill.)Druce lectin,POL)的纯化、性质和构象研究

吕鸿周  
【摘要】:本文对玉竹凝集素(Polygonatum odoratum(Mill.)Druce lectin,POL)的研究主要包括分离纯化、性质、活性以及结构几个方面。百合科植物玉竹的根状茎经高速组织粉碎机粉碎,生理盐水浸取、硫酸铵分级沉淀透析除去硫酸铵得到玉竹凝集素粗品,将粗品过阳离子交换柱CM-Sepharose和SephacrylS-200凝胶过滤层析得到玉竹凝集素纯品。经SDS-PAGE检测为单一蛋白带,亚基分子量为14.2KD,用SephacrylS-100凝胶过滤测得其表观分子量为48KD,表明POL是由四个相同亚基组成的蛋白质。POL能凝集兔血红细胞,其凝集兔血细胞效价为3.9ug/ml。糖抑制实验结果表明,甘露聚糖是POL的凝血活性的专一性抑制糖,其它的糖类对其凝血活性的影响不明显。 POL的荧光光谱研究表明:在激发光为280nm时,其最大荧光发射峰位在328nm处,荧光光谱未见有酪氨酸(Tyr)残基的发射峰,表明Tyr残基的荧光基本上通过能量转移到Trp上,并使荧光强度增强,在激发光谱为295nm时,其最大荧光发射峰位也在328nm处,比游离Trp的最大荧光发射峰(348nm)蓝移了近20hm,说明Trp周围的极性较弱,处于疏水的微环境。研究不同温度和不同pH条件下玉竹凝集素的凝血活性和荧光光谱的变化表明,当温度达到60℃时,30分钟后其仍保留80%的凝集活性,当温度逐渐上升时,活性随着温度的升高而逐渐丧失,当温度达到100℃时,20分钟内其活性完全丧失。荧光光谱研究表明,其荧光强度随着温度的升高逐渐增强,并且最大发射波长峰位发生红移,表明该凝集素的构象发生了一定变化,即荧光基团所处微环境的极性增强。不同pH的活性研究表明,POL在Ph3—9范围内活性比较稳定,在pH5.6
【学位授予单位】:四川大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:TQ464

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【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 王宝林;长白山玉竹超微粉碎技术及其保健食品开发研究[D];吉林农业大学;2011年
2 孙君;玉竹乳酸发酵饮料工艺研究[D];吉林农业大学;2013年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前4条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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2 卢小三;两个杨树无性系再生体系的建立及抗虫基因Cry1C+9C转化的初步研究[D];华中农业大学;2010年
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8 王海朋;桑树转景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶基因(MSBPase)的研究[D];山东农业大学;2011年
9 田华英;香樟组培快繁和再生体系的建立及植物表达载体pCAMBIA2300-ACA的构建[D];曲阜师范大学;2011年
10 刘飞飞;大豆凝集素对体外培养的兔小肠上皮细胞的影响及靶位点的标记[D];吉林农业大学;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 朱小平;吴东儒;;玉竹多糖的研究——分离纯化及其性质[J];安徽大学学报(自然科学版);1989年01期
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3 刘屹峰;乳酸菌的生理特性和生物学功能[J];丹东纺专学报;2002年02期
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中国博士学位论文全文数据库 前1条
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中国硕士学位论文全文数据库 前3条
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 阮康成;卑其新;郑乐;;光子计数荧光偏振仪[J];分析仪器;1992年02期
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4 胡苹,安成才,李毅,陈章良;原核表达的天花粉蛋白和另外两种蛋白具有体外抗真菌活性[J];微生物学报;1999年03期
5 刘清亮,徐晓龙,王淳,谢波平,余华明;稀土及过渡金属离子对蛇毒内抗凝血因子荧光光谱的影响[J];中国稀土学报;1992年02期
【相似文献】
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1 吕鸿周;玉竹凝集素(polygonatum odoratum(Mill.)Druce lectin,POL)的纯化、性质和构象研究[D];四川大学;2006年
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