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变形链球菌单菌种早期生物膜的结构和胞外多糖作用的初步探讨

宁美芝  
【摘要】:目的:动态观察变形链球菌单菌种生物膜的形成、结构以及胞外多糖在生物膜中的分布,比较不同培养时间变形链球菌在生物膜黏附状态下和浮游状态下产生水溶性胞外多糖和水不溶性胞外多糖量的差异,分析多糖在生物膜不同形成阶段的作用。方法:1.变形链球菌微生物厌氧培养条件下在玻璃片上形成单菌种生物膜,用荧光染料BOBO~(TM)-3和Calcofluor进行荧光染色,激光共聚焦扫描显微镜连续观察其形成的生物膜结构和其中胞外多糖的分布。2.将变形链球菌分别进行静置培养和摇动培养,以得到黏附状态和浮游状态下的变形链球菌,蒽酮法测量两种状态下不同培养时间细菌产生的胞外多糖能力的差异。结果:1.变形链球菌能够在玻璃表面黏附形成致密的生物膜,多糖的黏附和聚集是生物膜初始黏附和发展的前提,在生物膜形成过程中存在细菌和多糖的消除和重建过程;成熟生物膜的特征是形成大量微菌落和沟壑间隙,邻近黏附界面的生物膜基底部细菌密度较低,而中部则较致密。在生物膜发展和成熟期,胞外多糖分布与菌落中细菌的分布基本一致,提示变形链球菌依靠其产生的胞外多糖聚集形成了生


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