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脂肪基质细胞多向分化能力及其在组织工程中应用的研究

林云锋  
【摘要】:在临床医学中,因创伤、感染、肿瘤术后及先天缺陷导致组织缺损的修复重建,一直是困扰各专业医生的棘手难题。当前临床上使用的各种组织修复与重建方法虽然各有优缺点,但总体来说不尽人意。组织工程是应用细胞生物学和工程学的原理,对病损组织结构、功能的修复与重建进行研究开发的一门新兴科学。种子细胞是组织工程的首要因素,脂肪基质细胞(Adipose tissue-derived stromal cells,ASCs)是近年来研究最热门的种子细胞,被认为是最有可能用于临床的种子细胞之一。ASCs具有向脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞和成肌细胞等多向分化的能力,加之脂肪贮备量大、取材方便的优势,使其更具实际的应用价值。 本课题采用酶消化法获取绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)转基因小鼠脂肪基质细胞,通过体外多向诱导的培养方法,研究内源性GFP对ASCs分化能力的影响;然后以腺病毒(Adenoviral vectors,Ad)为载体,转染外源性GFP基因到Balb/c小鼠ASCs中,比较内、外源性GFP对小鼠ASCs分化能力的影响;进而研究外源性GFP对人脂肪基质细胞分化能力的影响。在此基础上,结合组织工程的方法,研究ASCs体外成软骨分化能力,并使用经过成软骨诱导的ASCs复合藻酸盐支架材料,种植于裸鼠皮下,研究ASCs形成异位软骨组织的能力;再使用经过成骨诱导的ASCs复合纳米双相磷酸钙陶


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