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《四川大学》 2007年
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参附注射液对兔移植肺缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

蒲江涛  
【摘要】: 背景及目的:肺移植是治疗终末期肺疾病的惟一有效手段,但是仍然有许多相关问题须待解决。除了供体肺的严重缺乏外,原发性移植物功能异常是最常见的早期死亡原因之一,这主要是跟供体肺的缺血再灌注损伤有关。保持移植物的最佳状态对于减轻肺移植术后缺血器官功能障碍至关重要。参附注射液是红参和附子的提取物,其主要成分是人参皂甙和乌头类生物碱。现代药理学证明,人参附子均具有较强清除氧自由基、抗脂质氧化反应的作用。同时人参皂甙能提供能量基质,增加底物水平磷酸化,促进三磷酸腺苷、磷酸肌酸的合成,保护细胞线粒体钙泵活性,减少线粒体膜磷脂降解,保护膜系统完整;附子能抑制血小板的聚集,改善缺血组织的微循环。基于这些活性成分的药理作用,参附注射液具有减轻组织器官缺血再灌注损伤的作用。近年来的研究也证实参附注射液对心、脑、肝、肾、肠等许多脏器的缺血再灌注损伤有较好的保护作用,能显著改善遣些脏器的功能。但还没有见到将参附注射液应用于肺移植方面的研究报道。本研究设想参附注射液能减轻肺移植的缺血再灌注损伤,对供肺起到保护作用,通过建立兔左肺自体原位移植模拟模型,观察参附注射液对供肺缺血再灌注损伤的保护作用,旨在为供肺保护提供新方法。 方法:20只健康新西兰白兔,体重2.25±0.25kg,随机等分为对照组(NS组)和实验组(SF组)。通过在体游离左肺静脉、左肺动脉和左主支气管并予分别阻断,60分钟后重新开放恢复灌注,建立兔左肺自体原位移植模拟模型。SF组在阻断前30分钟静脉注射参附注射液2.5ml/kg,阻断时经左肺动脉插管灌注参附注射液5ml/kg和林格氏液25ml/kg,开放后经肺动脉插管注入参附注射液5ml/kg;NS组采用相同的方法以生理盐水代替参附注射液。分别在阻断前、再灌注后15分钟、再灌注后30分钟、再灌注后60分钟采左肺静脉血2ml。再灌注60分钟后取左肺组织。检测肺静脉血中丙二醛(MDA)含量及总超氧化物歧化酶(SOD)的活力、肺组织的干湿比重(D/W)。光镜观察肺组织的病理变化。 结果:(1)丙二醛(MDA)含量:在阻断前、再灌注后15分钟、再灌注后30分钟、再灌注后60分钟各时点NS组和SF组MDA的含量分别为1.2577±0.3418、1.4734±0.3526、1.5649±0.4120、1.6465±0.6361及1.2852±0.2751、1.0646±0.3259、1.1353±0.3071、1.1443±0.1782。阻断前NS组和SF组MDA的含量无明显差异(P>0.05)。再灌注15分钟后SF组的MDA含量较阻断前下降;随着时间的延长,NS组与SF组的MDA含量均呈上升趋势;但SF组MDA含量明显低于NS组。两组比较有显著差异(P<0.05)。 (2)超氧化物歧化酶(SOD)活力:阻断前、再灌注后15分钟、再灌注后30分钟、再灌注后60分钟各时点NS组和SF组总SOD活力分别为98.7033±7.9979、97.64166±16.9688、88.5113±10.2482、89.6966±5.1720及109.6201±14.6034、105.2885±7.3424、105.0111±15.3270、108.2611±11.4156。阻断前SF组SOD活力明显高于NS组(P<0.05),再灌注后两组SOD活力均呈下降趋势,以NS组下降幅度明显。两组间比较有显著性差异(P<0.01)。SF组再灌注后各时间点SOD活力与缺血前比较无显著差异(P>0.05)。 (3)肺组织的干湿比重(D/W):NS组的D/W为0.1949±0.0202,SF组为0.2298±0.0071,SF组显著高于NS组(P<0.01)。 (4)肺组织的病理变化:NS组肺组织水肿明显,大量的炎细胞浸润,肺泡腔内片状渗出;而SF组表现为肺泡间隔水肿轻微,少量炎细胞浸润,渗出不明显。 结论:1.参附注射液可以有效降低供肺缺血再灌注损伤后机体丙二醛的含量,提高超氧化物歧化酶的活力,对供肺的缺血再灌注损伤有较好的保护作用。其机制可能在于它能有效的抑制机体脂质过氧化反应的发生,增强机体清除氧自由基的能力。 2.参附注射液可以有效地减轻缺血再灌注损伤后的肺水肿。其机制可能与参附注射液的“多靶点效应”有关。 3.本实验的模拟肺移植动物模型为改进的自体原位肺缺血再灌注模型,简单方便,易于操作,适于更多的肺移植实验研究。
【学位授予单位】:四川大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R285.5

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