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《四川大学》 2007年
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山葵黑根病菌拮抗菌的筛选、鉴定及防治研究

陈静鸿  
【摘要】: 山葵,属十字花科多年生草本植物,产于日本富士山和台湾阿里山,是生产芥末的主要原料,沿海人们喜食生鱼片,以芥末为佐餐,被日本人民称为生活必需品。美国,加拿大,澳洲也有出口,因此市场销售量大。近年国外研究发现:山葵还具有杀菌防病、防腐利尿、发汗、清血、增进食欲、减脂和软化血管的功能,从而更增加了山葵的需求。因此,种植山葵有很好的经济社会效益。近年山葵已在大陆大量种植,我省青城、邛崃、雅安、乐山、绵阳、凉山等地区都建有种植基地,全国种植面积不下数十万亩。但其植株被一种黒根病感染,黑根病病原菌为一种丝状真菌——墨入菌(Phoma wasabiae Yokogi)引起。凡感染黒根病的山葵其产值下降50%以上。 本研究用稀释分离法对成都、简阳、雅安等地区的农田、自然保护区的13个土壤样品进行放线菌和细菌的分离,共分离到放线菌119株,细菌67株。以山葵墨入菌为供试菌,采用点对峙培养筛选法对分离到的101株放线菌,57株细菌进行初筛,结果显示,对山葵墨入菌具有拮抗活性的放线菌38株,细菌10株。再通过打孔法复筛,得到产生抑菌圈最大的菌株SA2。 根据传统的表型分类、生理分类,化学分类和现代16S rDNA序列分析的分子分类方法,即多相分类,对拮抗菌株SA2进行形态特征,生理生化特征分析以及16S rDNA序列分析。SA2为产芽胞细菌,周身鞭毛,芽胞中生,椭圆形,菌呈短杆状,菌体长1.9-2.8μm,宽0.6-1.1μm,具有运动性。LB培养基斜面30℃培养72h后,菌落呈乳白色,产生折皱。以16S rDNA序列为基础构建了包括14株相关种属细菌在内的系统发育树,其中,与芽孢杆菌属细菌有很高的同源性(92%-98.3%),与苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)十分接近,序列相似性值98.3%。 通过对平板对峙筛选的最强拮抗菌S11,S13,SA2,SA16进行室内盆栽试验,选取盆栽试验效果最好的菌株SA2进行田间试验。试验地选在成都市都江堰龙池镇的山葵种植场黑根病发病率在50%以上的场地。盆栽试验结果表明:SA2拮抗细菌菌株对山葵黑根病有良好的防治效果,对山葵黑根病的防效为85.57%。山葵种植1,3,5个月后,SA2对黑根病防效分别为74.12%,76.57%和78.98%,有较好的防治效果,且随时间的延长而增加。
【学位授予单位】:四川大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S435.672

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