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《重庆大学》 2004年
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一种新型小口径人工血管的制备

覃素华  
【摘要】:目前,各种直径大小的血管移植物的需求日益增多。临床应用中,一般认为Dacron(涤纶)、ePTFE(聚四氟乙烯)等合成型血管在大口径血管移植中效果可靠,有肯定的远期通畅率。但是,在小口径血管(内径<6mm)移植中,由于血管中高张力、低血流的特殊状态,导致了很高的移植失败率。小口径血管移植物(内径<6mm)的研究仍然面临很大困难:合成型血管由于吻合处易发生内膜增生和血栓形成,远期通畅率并不满意;自体血管由于来源有限,异体血管和异种血管由于易产生免疫排斥反应,临床应用也受到限制;组织工程化血管的制备工艺还不成熟。因此,构建一种良好的小口径血管移植物正成为人工血管研究的热点。本研究采用原代培养的兔动脉内皮细胞作为种子细胞,以超低温处理去除内皮细胞的大鼠颈动脉血管为血管基质,旋转加静态培养使其完成内皮化,然后进行植入兔股动脉的动物实验,为小口径血管移植材料的研究尝试新的思路,并探讨异种血管移植的免疫排斥及早期通畅率等问题。 本研究的主要内容和结论是: 1 采用改进的Ⅱ型胶原酶消化法获取兔动脉内皮细胞,进行原代及传代培养,并对细胞进行鉴定。光镜下观察,酶消化法分离、培养的原代兔动脉内皮细胞呈典型的“铺路石”状镶嵌排列,细胞为扁平多角形。透射电镜下可见培养细胞浆内Weibel-Palade小体。结果表明,培养的原代内皮细胞具有内皮细胞的正常特征,可以用于我们的实验研究。 2 采用超低温处理去除Wistar大鼠颈总动脉(内径约1mm)的内皮细胞。HE染色和扫描电镜观察的结果显示,采用超低温处理的Wistar大鼠颈动脉血管内皮细胞完全去除,处理后的血管其他组织保留完整。 3 原代培养至 2-3代的兔动脉内皮细胞 (RAECs)高密度(2×10~6cell/cm~2)接种于去除内皮细胞的大鼠血管内腔面,旋转培养2h后,再在37℃,5%CO_2条件下静态培养3—5天。AgNO_3染色和扫描电镜下观察:将RAECs种植于超低温处理后的大鼠颈总动脉内腔面3-5天后,细胞完全覆盖血管内壁,融合成单层。 4 以正常异体兔股动脉(Rabbit artery grafts, RAGs)组和去内皮Wistar大鼠颈动脉(Deendothelialized rat artery gratis,DRAGs)组作为对照组,将重新内皮化Wistar大鼠颈动脉(Reendothelialized rat artery grafts,RRAGs)植入兔股动脉,进行动物实验(每组六只),检测组织病理学变化、内皮细胞覆盖情况及其早期的通畅率。通过扫描电镜和HE染色切片观察:移植后1周,RRAGs组移植段内腔有大量内皮细胞,外膜少量淋巴细胞浸润,与RAGs组结果类似;而DRAGs组内腔弹力 重庆大学硕士学位论文 中文摘要 膜裸露,少量内皮细胞覆盖,外膜大量淋巴细胞浸润。移植后4周,RRAGs组移 植段通畅,内腔基本被内皮细胞覆盖,细胞沿血流方向排列,与RAGs组类似; 而DRAGs组血管移植段有大量血栓形成。RRAGs组和RAGs组的四周累计通畅 率分别为66.7%和83.3%,而DRAGs组则只有50%。 关键词:异种血管移植,原代兔内皮细胞培养,超低温处理血管,血管内皮化 今
【学位授予单位】:重庆大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R318.1

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