苦参碱的反胶束萃取及抑真菌作用研究

【摘要】： 反胶束萃取技术具有条件温和,萃取效率高,成本低,溶剂可重复利用,不引起萃取物变性等优点,用于纯化生物物质前景广阔。苦参碱类化合物具有抗乙型肝炎、抗癌、抗菌等多种生理功能,是一类有开发前景的先导化合物和生物活性成分,成为国内外研究与开发利用的持续热点之一。 论文对AOT/异辛烷反胶束萃取苦参碱进行了研究,考察了包括pH、离子种类和浓度、反胶束W0、温度和时间因素对萃取的影响。酸度是影响苦参碱萃取率的主要因素。在pH7~pH12之间,苦参碱的萃取率随着水相pH值的升高而增大;水相pH12时,苦参碱萃取率增加速度急剧变缓,并且苦参碱的纯度降低;水相pH值低会使Mat.的纯度提高,但pH值过低(7.0)会使有机相在萃取时发生乳化,从而破坏AOT/异辛烷反胶束体系,阻断萃取的进行。离子Na+、K+、Ca2+、反胶束W0、萃取温度对萃取也有一定影响,但这些因素的影响作用并不明显。在单因素的基础上进行了正交试验,获得AOT/异辛烷萃取苦参碱的最佳工艺条件为:pH=12,W0=30,T=35℃,相比为1:1,萃取时间为30 min,在此条件下苦参碱的萃取率为70.3%,纯度为66.8%。 论文采用了毛细管电泳分离结合紫外检测方法,对苦参碱进行定量分析,以盐酸麻黄碱(Eph)作为内标物,电泳条件:缓冲液为20 m mol/L硼砂(含30 m mol/LSDS和35%体积甲醇),电泳电压30k V,电迁移进样30k V×4 sec,检测波长208 nm。在此条件下能够同时快速对苦参碱与氧化苦参碱的含量进行测定。 论文还对苦参碱类生物碱的抑真菌作用进行了研究,结果表明:苦参碱对红色毛癣菌MIC和MFC分别是0.1 mg/mL和10 mg/mL,对絮状表皮癣菌的MIC和MFC分别是0.2 mg/mL和20 mg/mL;苦参总碱对红色毛癣菌MIC和MFC分别是0.5 mg/mL和50 mg/mL,对絮状表皮癣菌的MIC和MFC分别是1.0 mg/mL和20 mg/mL。苦参类生物碱抑菌的机制可能为破坏真菌的细胞壁和细胞膜导致细胞内容物质的外泄而死亡。