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《重庆大学》 2007年
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板蓝根注射液的毛细管电泳分析

杨元娟  
【摘要】: 毛细管电泳技术是近十几年发展起来的一种高效分离分析技术,它具有高效、快速、进样体积小、溶剂消耗少、抗污染能力强、自动化程度高、分离模式多样等优点,在中药分析中显示出很大的优势和潜力。板蓝根注射液是临床常用清热解毒抗感染的中药制剂之一,目前还缺乏统一的国家质量控制标准,不同厂家的产品,其成分和含量差异很大,为了有效地控制板蓝根注射液的质量,建立一种简便、稳定的质量控制方法势在必行。 本论文致力于通过考察优化毛细管电泳运行条件,在用毛细管区带电泳法(CZE)来分析板蓝根注射液活性成分的基础上,建立一种基于配位作用的毛细管电泳法(CICE),采用非衍生直接紫外吸收检测,来对板蓝根注射液中的主要氨基酸组分进行定性定量分析的方法,以达到能更简便、快速地实现板蓝根注射液中多组分的同时分离分析及定量,为建立板蓝根注射液的国家质量控制标准提供借鉴和参考,这也是本论文的创新之处。 本论文的主要研究内容和结果为: 首先通过全面考察毛细管区带电泳的实验运行条件,在优化条件下,对板蓝根注射液中多种有效成分进行分离分析,主要采用标准品加入法来对板蓝根注射液中的五种有机酸(丁香酸、水杨酸、苯甲酸、邻氨基苯甲酸、咖啡酸)进行了定性分析。结果显示,这五种有机酸成分在板蓝根注射液中的含量都不高,出峰很低,尤其是丁香酸、水杨酸、苯甲酸、邻氨基苯甲酸的出峰时间都很邻近,不易达到基线分离。所以本人认为仅用CZE法检测丁香酸、水杨酸、苯甲酸、邻氨基苯甲酸不宜作为板蓝根注射液质量的控制指标。 在上述优化条件下,还分别对三个生产厂家的板蓝根注射液成分进行了CZE分析,通过比较其CZE谱图,发现各厂家产品的出峰数目、出峰时间、出峰位置、峰面积及峰高均有较大差异,说明目前临床上使用的不同生产厂家的板蓝根注射液组分和含量都有明显差异,这也是目前中药注射液所共同存在的问题。因此迫切需要建立一些更严格有效的分离分析方法,来对板蓝根及其它中药注射液进行全面的成分分析、鉴别和含量的测定,这对严格控制产品质量,制定规范统一的质量控制标准都有重要意义。 本论文建立了一种基于配位作用的毛细管电泳手段,采用非衍生直接紫外吸收检测,对板蓝根注射液中的主要氨基酸组分进行了分析,通过考察CICE运行缓冲液中配位中心离子的浓度、缓冲液的酸碱度、运行电压、进样时间以及毛细管内径等诸多因素,以及在这种分离模式下对分离效果和检测的影响。并在优化的实验条件下,对板蓝根注射液中的两种游离氨基酸(精氨酸和辅氨酸)进行定性和定量分析。 本论文还通过采用纸片琼脂扩散法(K-B法)和试管连续稀释法,来进行了板蓝根注射液的抗菌活性研究。结果显示板蓝根注射液对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、大肠埃希菌、伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌都无明显的抗菌作用,仅对福氏志贺菌有轻微的抗菌作用。板蓝根注射液为水煮醇沉法提取制成的溶液,可能在其加工制备提取过程中破坏了其中的主要抗菌活性成分,导致其抗菌活性的明显降低。这也提示应该对板蓝根注射液的制作方法及提取工艺加以改良和优化,使其尽可能多的保留下原药中的抗菌活性成分,以提高该药的临床抗菌疗效。
【学位授予单位】:重庆大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R286

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