收藏本站
《西南交通大学》 2012年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

十种中药单体成分的抗动脉粥样硬化活性筛选研究及机理研究

崔文婷  
【摘要】:动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是动脉一种慢性的、炎症性的血管病变。“炎症学说”、“损伤-反应学说”等已成为AS发病机制的主流学说之一。在炎症信号转导中,核转录因子-κB(Nuclear transcription factor kappa B,NFKB).丝裂原活化蛋白激酶(MAPK).Janus激酶-信号转导转录激活因子(JAK=STAT)以及T细胞共刺激分子介导的共刺激信号通路具有重要意义。本研究选取NFκB,MAPK通路中细胞外调节蛋白激酶(extra cellular regulated protein kinases,ERK)和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)药物筛选靶点,构建成三个典型的炎症信号通路,以模拟参与动脉粥样硬化病变的炎症通路,希望通过此高通量模型筛选出抗AS活性强药物。 本研究以NFKB,ERK及JNK为信号靶点(他们可分别引发各自的信号通路转导),分别构建出此三种动脉粥样硬化病变的炎性信号通路模型,即分别将携带有NFκB,ERK,JNK目的基因片段的重组质粒以脂质体转染法转入特征性细胞—脐静脉内皮细胞(HUVECS),构建出稳定遗传细胞株用于药物筛选。因为此三种转染细胞含有各自目的基因基序的增强子、GLuc(Gaussia Luciferase)报告基因和灭稻瘟素(Blastincidin)抗性筛选基因,故通过检测GLuc报告基因表达水平可反映各细胞株NFKB,ERK或JNK的活化状态,以待筛药物对NFκB,ERK,JNK等活化抑制作用强度,判断的药物的作用活性。此外,在本实验体系中引入己知NFκB,ERK,JNK的共有激活剂脂多糖(liPoPolysaccharide,LPS),结果证明LPS可以时间和剂量依赖性地促进pBGLuc-NFκB,pBGLuc-ERK,pBGLuc-JNK质粒转染的HUVECS细胞的GLuc报告基因的表达,而pBGLuc转染对照细胞效果不明显(增强子基序对目的基因作用明显),证明pBGLuc-NFKB,pBGLuc-ERK,pBGLuc-JNK等重组质粒携带的目的基因均正常表达。由于LPS使NFKB,ERK和JNK活化至一定水平,提高了实验体系中GLUC荧光素酶的基础水平,更加有利于发现待测化合物对这三种信号通路的抑制作用。该筛选体系具有稳定、特异、高通量等特点,利用该体系,我们对10种中药单体进行了活性筛选,并从中发现了一些对LPS诱导的NFκB,ERK及JNK的活化具有较强抑制作用的化合物。其中,川芎嗪,CB-301,芒柄花苷和CB-202对LPS诱导的JNK活化具有显著的抑制作用;而在LPS诱导活化的ERK引发的通路中,CB-301,贝母素乙,CB-202和贝母素甲等均对其有显著抑制作用;在NFKB引发的信号通路模型中分别得到β-谷甾醇,CB-202,CB-301及毛蕊异黄酮苷等四种抑制NFκB表达的单体化合物。 因此,本研究成功构建了高通量初筛抗动脉粥样硬化抑炎活性药物的特征性模型。此模型可用于高通量筛选抑制炎性AS活性的药物。因其作用机理明确,故此模型的构建为进一步的抗AS药物体内活性研究奠定了前期药物开发的基础。
【学位授予单位】:西南交通大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R285

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姜勇,刘爱华,赵克森;丝裂原活化蛋白激酶信号传导系统[J];第一军医大学学报;1999年01期
2 刘慧琼,郭书好,沈英森,李晓蒙;半夏中β-谷甾醇的抗氧化作用研究[J];广东药学院学报;2004年03期
3 金晶,刘耕陶;NF-kB的研究进展[J];国外医学.药学分册;2000年03期
4 陈建勇;王聪;王娟;曹礼荣;;MAPK信号通路研究进展[J];中国医药科学;2011年08期
5 耿小勇;陈一文;秦明照;;Toll样受体4在动脉粥样硬化中的作用研究进展[J];中国动脉硬化杂志;2008年01期
6 彭毅;邵紫韫;丁世芳;;动脉粥样硬化中的细胞因子及细胞因子相关信号通路[J];中国动脉硬化杂志;2008年02期
7 王文东;齐若梅;;转化生长因子β/Smad3信号通路与动脉粥样硬化[J];中国动脉硬化杂志;2011年10期
8 汪德清,沈文梅,田亚平,孙仲怡,丛建波,吴可;黄芪有效成分对氧自由基清除作用的ESR研究[J];生物化学与生物物理进展;1996年03期
9 董家龙;李菊香;洪葵;;Rho相关激酶Rock在心血管疾病中的研究进展[J];国际病理科学与临床杂志;2009年03期
10 张代娟;刘同美;刘江月;崔晓栋;郭军堂;王建英;叶笃筠;;青心酮对载脂蛋白E缺陷小鼠主动脉粥样硬化形成及斑块中主要细胞的TLR4表达的影响[J];中国现代应用药学;2010年01期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 谭春江;泛素蛋白酶体通路在动脉粥样硬化中作用的研究[D];汕头大学;2007年
2 周宏宇;基于报告基因和核因子-κB信号通路的抗炎化合物筛选及三个活性化合物的抗炎作用及机理研究[D];沈阳药科大学;2008年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 钟彦;宋若会;刘钢;屠彦红;吴飞虎;金龙;马守亮;;咽康宁配合等离子消融治疗慢性扁桃体炎疗效观察[J];中医药临床杂志;2008年01期
2 辛华;吴飞虎;刘钢;朱玲;;咽康灵治疗急性扁桃体炎临床疗效观察及其对患者白细胞计数的影响[J];中医药临床杂志;2009年06期
3 陈梅花;王慧春;朱艳媚;陈志;;贝母的药理研究[J];安徽农学通报;2007年01期
4 韩志萍;;大扁杏仁挥发油化学成分的气相色谱-质谱分析[J];安徽农业科学;2008年23期
5 史高峰;韩学哲;陈学福;吕玲玉;吕秋楠;;微波辅助提取甘草渣中的总黄酮工艺研究[J];安徽农业科学;2008年32期
6 王丽;彭锐;李隆云;;川贝母新资源太白贝母的研究进展[J];安徽农业科学;2011年36期
7 李小兵;谢晓梅;周铜水;;高效液相色谱法同时测定黄芪中4种异黄酮的含量[J];安徽医药;2008年05期
8 郝文,张立华;血栓通合黄芪注射液治疗急性脑梗死35例[J];安徽中医学院学报;2000年04期
9 陈建业;中药放射防护剂的研究进展[J];癌症;1999年02期
10 卢彦琦,贺学礼;黄芪化学成分及药理作用综述[J];保定师范专科学校学报;2004年04期
中国重要会议论文全文数据库 前8条
1 闫向阳;张玉军;;甘草黄酮提取条件的响应面优化及抑制亚硝化反应的研究[A];河南省化学会2010年学术年会论文摘要集[C];2010年
2 王恬;顾莞婷;;植物甾醇的生物学功能及其在动物生产中的应用[A];动物营养研究进展——中国畜牧兽医学会动物营养学分会第八届全国代表大学暨第十届学术研讨会论文集[C];2008年
3 汪德清;田亚平;宋淑珍;王玲;;黄芪总黄酮抗突变作用的实验研究[A];第六届全国自由基生物学与自由基医学学术会议和海峡两岸自由基生物学与自由基医学学术会议论文集[C];2004年
4 汪德清;田亚平;宋淑珍;王玲;蒋东升;;301牌保康胶囊的急性毒性和遗传毒性研究[A];第六届全国自由基生物学与自由基医学学术会议和海峡两岸自由基生物学与自由基医学学术会议论文集[C];2004年
5 严作廷;王东升;巩忠福;杨国林;谢家声;李世宏;梁纪兰;曾宪成;余四九;;中药复方制剂产复康对小鼠的抗氧化作用研究[A];首届中国兽药大会动物药品学暨中国畜牧兽医学会动物药品学分会2008学术年会论文集[C];2008年
6 徐芳;高林善;;牛黄降压丸(胶囊、片)降压疗效及药理研究概述[A];第八次全国中西医结合虚证与老年医学学术研讨会论文集[C];2005年
7 张霞;关小玲;陈欣欣;;蛋白消合剂对肾病综合征大鼠SOD、MDA和-OH影响的实验研究[A];第23届全国中医儿科学术研讨会暨儿科名中医讲习班论文汇编[C];2006年
8 王金辉;刘巍;戴荣华;;蜜炙黄芪的化学成分研究[A];中华中医药学会四大怀药与地道药材研究论坛暨中药炮制分会第二届第五次学术会与第三届会员代表大会论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 段琦梅;黄芪、党参质量评价及其提取物活性研究[D];西北农林科技大学;2010年
2 叶茂;复方金刚藤胶囊的临床前研究[D];华中科技大学;2011年
3 许淳惟;薏苡仁酯抑制内皮细胞相关炎症因子之实验研究[D];广州中医药大学;2011年
4 许淳彰;薏苡仁酯抑制主动脉平滑肌细胞增殖之研究[D];广州中医药大学;2011年
5 刘志刚;泄浊除痹方治疗高尿酸血症物质基础研究[D];广州中医药大学;2011年
6 李鸥;中药配伍优化干预动脉粥样硬化易损斑块作用的研究[D];中国中医科学院;2011年
7 王祺;独参汤联合骨髓间充质干细胞治疗急性心肌梗死大鼠的相关研究[D];辽宁中医药大学;2011年
8 钟耀文;黄芪建中汤临床应用的规律探析[D];南京中医药大学;2011年
9 李霞;平贝母淀粉改性及抗炎抗氧化作用研究[D];天津大学;2010年
10 李丹平;红黑二丸中甾醇类物质提取、鉴定及生理活性的研究[D];华中农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 高丽;中华秋海棠甾醇类化合物的提取、纯化及微胶囊化研究[D];华中农业大学;2010年
2 彭培培;血管活性药物对大鼠盐酸吸入性肺损伤动脉氧分压的影响[D];南京医科大学;2009年
3 杜盛阳;黄芪联合生长因子诱导人脐带间充质干细胞分化为神经细胞的实验研究[D];郑州大学;2010年
4 兰海滨;白附子混悬液对H_(22)荷瘤小鼠端粒酶活性及p16和bcl-2基因表达相关性研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
5 曹纯洁;抗凝护心Ⅱ号对大鼠缺血再灌注损伤后心肌组织MMP-9的影响[D];黑龙江中医药大学;2010年
6 冯贵仁;石榴皮对大肠湿热证模型小鼠IL-1β、IL-6及sIgA等影响的实验研究[D];新疆医科大学;2010年
7 韩鸿萍;暗紫贝母药用有效成份提取工艺及化学成份的研究[D];青海师范大学;2010年
8 姬颖洁;蛋白水解物提高人造奶油贮藏稳定性的研究[D];江南大学;2010年
9 罗正;基于抗氧化效果的银杏叶活性成分提取工艺优化及其抗氧化活性的评价[D];中南林业科技大学;2008年
10 李瑜娟;脉通方对糖尿病大鼠耳蜗功能影响的实验研究[D];成都中医药大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 汪丽燕;韩传环;王萍;;皖贝与川贝和浙贝止咳祛痰的药理作用比较[J];安徽医学;1993年03期
2 沃兴德,洪行球,魏佳萍,高承贤,李万里,金明敏,唐利华,丁志山;姜黄醇提取物对高脂血症患者脂代谢及肝肾功能的影响[J];浙江中医学院学报;1999年01期
3 黄冰冰,樊明文,杨祥良,韩定献;中草药对牙周病菌生长的影响[J];第四军医大学学报;2003年05期
4 姜勇,刘爱华,赵克森;丝裂原活化蛋白激酶信号传导系统[J];第一军医大学学报;1999年01期
5 刘家国,胡元亮,陈玉库,张宝康,孔祥峰;几种天然药物成分在体外CEF中最大安全浓度的测定[J];动物医学进展;2002年03期
6 徐向荣,王文华,李华斌;荧光法测定Fenton反应产生的羟自由基[J];分析化学;1998年12期
7 杨丽丽,凌文华;氧化型低密度脂蛋白与动脉粥样硬化[J];国外医学(内科学分册);2000年02期
8 李龙英;肖谦;;转化生长因子-β1/Smdas信号转导通路与糖尿病心肌病变[J];国外医学(老年医学分册);2007年03期
9 ;厚朴酚抑制肿瘤细胞增殖[J];国外医学(中医中药分册);2002年04期
10 方文慧;细胞膜脂多糖受体CD14研究进展[J];国外医学(免疫学分册);1998年05期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姜燕;吕昌龙;;稳定表达Ag85A蛋白细胞系的建立[J];中国生物制品学杂志;2009年10期
2 鲍苑苑;方舟;周丽诺;胡仁明;丁薇;;脂肪分化相关蛋白对软脂酸诱导的H9c2心肌细胞凋亡的影响[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年04期
3 高慧;朱晓芳;翁晓芳;周敏;谢铮;;HPV16 E6E7抗原表达模型的建立[J];医学信息;2009年11期
4 武卫华;孔璟;叶彬;;hsa-mir-373对肿瘤细胞中E-钙黏蛋白表达的影响[J];生物技术通报;2011年08期
5 马志方;李胜芝;刘秉乾;张明;王广有;马腾骧;;转人α1,2岩藻糖苷转移酶基因猪动脉内皮细胞抗人血清溶破实验[J];中华泌尿外科杂志;2006年08期
6 赵玉利;胡旭初;马长玲;徐劲;胡凤玉;余新炳;;华支睾吸虫CsSCCRO基因的表达和鉴定[J];中国病原生物学杂志;2007年02期
7 廖传军;郭连瑞;杨宝钟;张望德;;重组人pEGFP-heNOS质粒转染人内皮祖细胞及其条件优化[J];中国微循环;2009年01期
8 李晓平,李元;含Butirosin产生菌环状芽孢杆菌NRRL-B3312启动子DNA片段的No.44重组质粒的构建及其性质[J];中国抗生素杂志;1988年05期
9 陆坚;周伯平;蒋小玲;Dong P.Han;周育森;文丽霞;乐晓华;李兵;Michael W.Cho;;SARS冠状病毒S基因重组DNA诱导的体液免疫反应[J];中华微生物学和免疫学杂志;2005年11期
10 温肇荣;pBR_(322)∶RSF_(1010)重组质粒的构建(摘要)[J];解放军医学杂志;1985年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王昊鹏;张云;杨静静;王洁;邓小昭;许可;;丙型肝炎双移位F蛋白抑制肝癌细胞p16、p21的表达[A];华东地区第十次流行病学学术会议暨华东地区流行病学学术会议20周年庆典论文汇编[C];2010年
2 宫强;刘思国;郭设平;王春来;王勇;刘建东;迟磊;赵昆;孔宪刚;;牛分枝杆菌DNA疫苗免疫效果的研究[A];中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会论文摘要集[C];2006年
3 刘芳;严懿嘉;朱建国;华修国;高谦;;牛分枝杆菌Mb1761c蛋白的表达及其免疫原性初步研究[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会论文集[C];2008年
4 梅明珠;严亚贤;陆承平;;VT2-B亚单位的重组表达及单克隆抗体的制备[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会论文集[C];2008年
5 高明华;夏咸柱;薛琳;沈为明;韩启茂;;狂犬病毒核蛋白基因的克隆、序列分析及其在E.coli中的高效表达[A];全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2006年
6 陈慧峰;林育纯;张树江;李晓杰;罗洁;林丽娜;李文;胡耀明;陈雯;林忠宁;;PPP2R1A基因启动子区高甲基化对其不同单体型转录功能活性影响[A];全国生化/工业与卫生毒理学学术会议论文集[C];2010年
7 鞠会艳;夏咸柱;高玉伟;杨松涛;李彦舫;;犬瘟热病毒核蛋白基因重组载体的构建与鉴定[A];第十一次全国养犬学术研讨会论文集[C];2005年
8 刘桂林;赵锋;梁志选;;CAV的VP2基因克隆及重组质粒构建的研究[A];全国动物生理生化第九次学术交流会论文摘要汇编[C];2006年
9 杨慧兰;赵举峰;樊建勇;周翠;黄小晏;齐维;;HSV-2潜伏相关转录子ORF2真核表达载体的构建及其在Vero细胞中的表达[A];中华医学会第14次全国皮肤性病学术年会论文汇编[C];2008年
10 方潇碧;张春鸿;林森;黄振校;吴丽萍;施清圆;廖志苏;黄亚;李文峰;;重组质粒pENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-16-1/15a的构建与表达[A];浙江省医学会耳鼻咽喉科学分会成立60周年庆典暨2011年浙江省医学会耳鼻咽喉头颈外科学学术年会论文汇编[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 耿建扩 蔺玉堂;“表达凝血八因子新的重组质粒”成功研制[N];光明日报;2006年
2 吴一福;四军医大成功建立HCV多表位基因P815细胞系[N];中国医药报;2006年
3 李水银;蒲黄降血脂抗动脉粥样硬化的机理[N];中国医药报;2001年
4 殷惠军 张波;蒺藜总皂苷有抗动脉粥样硬化作用[N];中国医药报;2006年
5 ;脑血栓引起的失明还有救吗?[N];健康时报;2006年
6 北京协和医院心内科主任 严晓伟;护心先调脂[N];健康报;2007年
7 韩咏霞;慢性酒精中毒与动脉粥样硬化[N];中国中医药报;2007年
8 严少慰;查游离DNA 肺癌有望早发现[N];健康报;2008年
9 吴平生;调脂治疗应重视提高HDL—C的功能[N];中国医药报;2008年
10 肖忠武;解放军总医院研究黄芪证实六单体组合才具抗自由基作用[N];健康报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 孙莹;Stat3特异性SiRNA抑制胃癌SGC-7901细胞生长的体内外实验研究[D];吉林大学;2010年
2 梁硕;pshuttle-Egr1-hSmac基因—放射治疗乳腺癌的体外抑瘤效应研究[D];吉林大学;2011年
3 常彬霞;细胞色素P450 3A4、谷胱甘肽硫转移酶A1基因转染人肝细胞系的建立及功能测定[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
4 管莹;与HSV-1 UL31相互作用的宿主蛋白TMEM140生物学功能研究[D];北京协和医学院;2011年
5 李文毅;Rap1GAP通过ERK和Akt途径抑制内皮细胞增殖、迁移的实验研究[D];华中科技大学;2011年
6 赵荣兰;新发现甲状腺激素受体β亚型的研究[D];天津医科大学;2011年
7 孙国瑛;ALI时肺内TREMs家族表达谱的变化、TREM-2的保护作用及血管活性肠肽的调控[D];中南大学;2012年
8 戴银;鸡MHCⅠ类分子结构与抗病性关系的研究[D];安徽农业大学;2010年
9 戴仪;重组人色素上皮衍生因子的制备及生物学活性研究[D];复旦大学;2010年
10 周洲;肺炎嗜衣原体热休克蛋白经ERK、NF-κB信号通路调控HUVEC分泌炎症因子[D];南华大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 崔文婷;十种中药单体成分的抗动脉粥样硬化活性筛选研究及机理研究[D];西南交通大学;2012年
2 霍奇;shRNA干扰食管癌Eca109细胞ERK2表达的实验研究[D];新疆医科大学;2010年
3 仝君;乙肝病毒抗原基因真核表达载体的构建及表达[D];重庆医科大学;2011年
4 林建炜;转录因子XBP1s与细胞增殖及凋亡的实验研究[D];重庆医科大学;2010年
5 常江;rhIL-24质粒的构建及rhDCN联合rhIL-24对人外周血单个细胞影响的体外研究[D];山西医科大学;2010年
6 谢亚琳;SHP-1基因的表达及其对人乳腺癌细胞磷酸酶活性和增殖的影响[D];南方医科大学;2010年
7 李妍妍;FHL2对心脏HERG钾离子通道表达的调控作用[D];汕头大学;2011年
8 刘玲娟;DNA甲基转移酶1在同型半胱氨酸致人脐静脉平滑肌细胞增殖中的作用研究[D];宁夏医科大学;2011年
9 戴东方;siRNA沉默Trop2基因表达对胃癌BGC823细胞迁移侵袭能力的影响[D];江苏大学;2010年
10 高丽霞;Rap2b基因转染NIH3T3细胞及其对P38MAPK信号通路的影响[D];郑州大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026