重楼HPLC指纹图谱研究
【摘要】：
重楼为常用中药,药用历史悠久,又称蚤休、七叶一枝花等。《中华人民共和国药典》(2005版)一部记载:“重楼为百合科植物云南重楼Paris polyphyllaSmith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz或七叶一枝花Paris polyphylla Smithvar.chinensis(Franch)Hara的干燥根茎”。
本文首先建立了重楼药材中重楼皂苷Ⅰ和Ⅱ的含量测定方法,对来自各自然保护区的不同种源重楼植株和购买的商品重楼药材进行了分析测定,若按《中华人民共和国药典》(2005版)标准衡量,自然保护区植株中仅有滇重楼Ⅰ、Ⅱ根茎,商品药材中仅有重楼①、③和重楼⑧符合要求。结果表明,不同来源的药材中这两种皂苷成分的含量差异较大,证实以这两种皂苷为指标成分进行质量控制并不合理,不能全面真实地反映药材品质。
为了寻求较合理的品质评价方法,本文建立了其高效液相色谱指纹图谱分析方法,对供试品溶液制备方法进行了筛选,并以分离度、分析时间和色谱峰数等为指标对色谱条件(包括流动相、检测波长、色谱柱、进样量、梯度洗脱程序等)进行了优化。
本文接着运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版》(研究版)软件对所获得的色谱图进行了分析评价,得出如下结论:(1)海拔差距在200m之内的药材品质基本一致;(2)根茎中许多化学成分在茎叶中也有体现,但某些品种重楼植株茎叶能否代替根茎入药,以及是否应和根茎区别使用等仍有待于进一步研究;(3)来自道地产区云南的药材品质较好;(4)目前市面上流通的商品重楼药材品质参差不齐,需严格控制,最好能规范其基源。同时作为自然保护区生物标本整理整合及共享项目的子课题研究,为重楼药材的后期研究和进一步的开发利用等提供前期研究基础数据。
【关键词】：重楼 含量测定 指纹图谱 色谱条件优化 【学位授予单位】：西南交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R284.1
【目录】：
- 摘要6-7
- Abstract7-12
- 第1章 项目背景及主要内容12-15
- 1.1 本课题的研究背景及意义12-13
- 1.2 国内外研究现状13
- 1.3 本课题研究的主要内容和方法13-14
- 1.3.1 本课题研究的主要内容13
- 1.3.2 本课题研究的主要方法13-14
- 1.4 本研究课题的来源14-15
- 第2章 中药指纹图谱及重楼研究概述15-34
- 2.1 中药指纹图谱概述15-23
- 2.1.1 中药指纹图谱的定义和性质15-16
- 2.1.2 中药指纹图谱的分类16-17
- 2.1.3 中药指纹图谱研究内容17-19
- 2.1.4 现行中药色谱指纹图谱研究工作的一般流程19
- 2.1.5 中药指纹图谱的建立原则19-20
- 2.1.6 中药指纹图谱的评价原则和评价指标20-21
- 2.1.7 中药指纹图谱建立的目的和意义21
- 2.1.8 中药指纹图谱的研究现状21-22
- 2.1.9 中药指纹图谱的优缺点22
- 2.1.10 中药色谱指纹图谱软件的发展与现状22-23
- 2.2 重楼研究概况23-34
- 2.2.1 本草考证23
- 2.2.2 生药学研究23-26
- 2.2.3 栽培及资源利用26-27
- 2.2.4 化学成分研究27-29
- 2.2.5 药理作用及现代临床应用29-33
- 2.2.6 质量标准化研究33-34
- 第3章 RP-HPLC法测定重楼药材中重楼皂苷Ⅰ和Ⅱ的含量34-45
- 3.1 前言34
- 3.2 仪器与试剂34-35
- 3.3 系统适用性条件的选择35-36
- 3.3.1 最大吸收波长的选择35
- 3.3.2 色谱条件35-36
- 3.4 对照品溶液的制备36
- 3.5 供试品溶液的制备36
- 3.6 方法学考察36-40
- 3.6.1 线性关系考察36-37
- 3.6.2 精密度实验37-38
- 3.6.3 重现性实验38-39
- 3.6.4 稳定性实验39-40
- 3.6.5 回收率实验40
- 3.7 不同品种重楼药材中重楼皂苷Ⅰ和Ⅱ的含量测定40-42
- 3.8 结果与讨论42-45
- 第4章 重楼HPLC指纹图谱色谱条件初探45-52
- 4.1 仪器与试剂45
- 4.2 供试品制备方法的选择与优化45-48
- 4.2.1 甲醇与乙醇比较45-46
- 4.2.2 75%乙醇与乙醇比较46-47
- 4.2.3 除杂与不除杂比较47-48
- 4.3 HPLC色谱条件的选择与优化48-50
- 4.3.1 色谱柱的选择48-49
- 4.3.2 流动相系统的选择与优化49
- 4.3.3 检测波长的选择49
- 4.3.4 梯度洗脱程序的优化49-50
- 4.4 HPLC色谱条件的建立50-51
- 4.4.1 色谱条件50
- 4.4.2 方法学考察50-51
- 4.5 讨论51-52
- 第5章 不同基源重楼HPLC指纹图谱研究52-75
- 5.1 实验部分52-54
- 5.1.1 供试品的收集与整理52
- 5.1.2 对照品溶液的制备52-53
- 5.1.3 供试品溶液的制备53
- 5.1.4 参照物的选择53
- 5.1.5 色谱条件53
- 5.1.6 色谱图的制备53-54
- 5.2 色谱指纹图谱的辨认和分析54-73
- 5.2.1 自然保护区重楼药材色谱图的辨认和分析55-69
- 5.2.2 商品重楼药材色谱图的辨认和分析69-73
- 5.3 结果与讨论73-75
- 结论75-76
- 致谢76-77
- 参考文献77-83
- 附录83-95
- 附录1: 含量测定色谱图83-87
- 附录2: 药材指纹图谱色谱图87-91
- 附录3: 药材照片91-95
- 攻读硕士学位期间发表的学术论文及科研成果95
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