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《西华大学》 2013年
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三种中药对植物病原真菌抑制作用研究

刘佳  
【摘要】:植物源农药,亦指利用植物的某些部位或提取得到的有效成分制成具有杀虫或杀菌作用的农药。其具有安全、无毒害、无污染等良好作用,是现代农业发展的需要和方向。因此,从植物中寻找具有杀菌活性的物质,特别是具新型分子结构和特殊作用机理的化合物是当前新农药创制的一条重要途径。虎杖、黄连、藁本为我国的传统中药,具有活血镇痛、清热利湿等作用,广泛的应用于我国医学领域。本文以这三种中药为原料,选用不同的溶剂对其有效成分进行提取,并用提取物对五种常见的病原真菌进行抑菌性研究,为新型抑菌剂的开发提供科学依据。论文从以下三方面进行研究。1三种中药中有效成分的提取及抑菌活性研究目的:提取三种中药中的有效成分,确定三种中药不同溶剂提取物抑制植物病原真菌的活性。方法:采用四种溶剂(水、乙醇、丙酮、乙酸乙酯)对三种中药(虎杖、黄连、藁本)进行平行提取,以植物常见病原真菌(小麦赤霉菌、水稻纹枯菌、玉米小斑菌、番茄灰霉菌、油菜菌核菌)为靶标,对三种中药不同溶剂提取物进行抑菌活性测定。结果:虎杖、黄连、藁本中除藁本的乙酸乙酯未能得到提取物外,共得到11种提取物,并编号1-11~#;对小麦赤霉菌核番茄灰霉菌抑菌活性最好的都是黄连乙醇提取物,其EC_(50)分别为3.66、0.13mg/mL;对水稻纹枯菌抑制活性做好的是虎杖乙酸乙酯提取物,其EC_(50)为6.81mg/mL;对玉米小斑菌抑制作用做好的是黄连乙酸乙酯提取物,其EC_(50)为0.07mg/mL;对油菜菌核菌抑制作用最好的是黄连水提物,其EC_(50)为0.16mg/mL。结论:三种中药的11中提取物均有抑制真菌活性,但黄连各溶剂提取物可抑制5种病原真菌,表现出强的抑制真菌活性,可作为真菌抑制剂进行深入的研究和商业开发。2五种植物病原真菌抑菌机理初步研究目的:初步研究了提取物对5种真菌的抑制机制。方法:通过测定孢子生成率、孢子萌发率、菌丝形态观察、确定提取物对真菌生长的抑制作用,通过测定溶液电导率、胞外多糖、胞外蛋白质含量,确定提取物对真菌细胞膜通透性的影响作用。结果:黄连乙醇提取物处理后的小麦赤霉菌菌丝形态分枝增多,节间拉长、变细,菌丝明显变细。电导率随着提取物浓度增大而增大,胞外多糖和蛋白质的渗透量随着处理液的浓度增加而增大。虎杖乙酸乙酯提取物处理水稻纹枯菌后,电导率随着浓度增加而增大,胞外多糖和蛋白质的渗透量随着处理液的浓度增加而增大。黄连乙酸乙酯提取物对玉米小斑菌孢子的形成、孢子的萌发有明显的作用。处理后的玉米小斑菌丝明显变细,分支增多,节间拉长变细,分生孢子萌生的芽管变大。电导率随,胞外多糖和蛋白质的渗透量随处理液浓度增大而增大。黄连乙醇提取物处理后的番茄灰霉菌菌丝形明显变细、颜色变浅。电导率随、胞外多糖和蛋白质的渗透量都随着处理液的浓度增加而增大。黄连水提物对油菜菌核菌孢子的形成及萌发有一定的抑制作用。处理后的油菜菌核菌菌丝没有明显变化。电导率、胞外多糖和蛋白质的渗透量随处理液浓度增大而增大。结论:黄连乙醇提取物增大了小麦赤霉菌和番茄灰霉菌的细胞膜通透性。虎杖乙酸乙酯提取物增大了水稻纹枯菌的细胞膜通透性。黄连乙酸乙酯提取物能抑制玉米小斑菌孢子的形成及萌发,增大了细胞膜通透性。黄连水提物能抑制玉油菜菌核菌孢子的形成及萌发,增大了细胞膜通透性。3中药提取物成分研究目的:确定11种提取物中主要成分的含量。方法:采用比色法测定提取物中的总黄酮、总多糖、总多酚及可溶性蛋白的含量;确定了准确、稳定的检测白藜芦醇、大黄素、大黄素甲醚、小檗碱、巴马汀、药根碱、阿魏酸的HPCL测定方法,并分别对虎杖中的白藜芦醇、大黄素、大黄素甲醚,黄连中的小檗碱、巴马汀、药根碱,藁本中阿魏酸的含量进行了测定。结果:虎杖的1-4~#提取物大黄素甲醚的含量分别为0.17、0.96、0.15、3.39%,其他活性成分含量差别不大;黄连的各个提取物活性成分含量差异均不大;藁本中藁本内酯未能检出,阿魏酸含量分别为0.73、3.02、1.64%,其余成分含量差距不大。结论:中药提取物的抑菌作用可能是多种活性物质的协同作用。虎杖中大黄素甲醚可作为抑菌活性的一个重要指针,藁本中阿魏酸可作为抑菌活性的重要物质。
【学位授予单位】:西华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:TQ450.1

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