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《西南农业大学》 2001年
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桑树多倍体育种材料遗传背景的AFLP分析

王卓伟  
【摘要】: 在桑树品种选育中,由于人工三倍体桑在经济性状和农艺性状上比二倍体桑品种和自然 三倍体桑更为优良,已成为国内外桑树品种选育的重要途径。本研究利用DNA多态性检出 率较强的AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)分子标记技术,即扩增片段长度 多态性,从DNA分子水平对19份人工三倍体桑育种材料,其中14份四倍体材料(通过秋 水仙素人工化学诱变而成),5份二倍体材料,进行遗传背景分析。构建了这些人工多倍体桑 育种材料的指纹图,得到19份材料的UPGMA聚类图。根据各材料间的遗传距离及相似系数 和前人研究结果,本研究以结合线法认为遗传相似系数0.7500可作为选择杂交亲本的标准。 在19个供试材料中,二倍体桑材料与四倍体桑材料间的相似系数小于该值,认为是亲缘关系 较远的种间关系,杂交后代可能产生较强的杂交优势,适于用作人工三倍体桑育种的杂交亲 本。从19份桑育种材料70个杂交组合中,选出16个杂交组合,认为适于用作人工三倍体桑 育种亲本间杂交组合。 本研究还利用AFLP技术对二倍体桑与人工诱导(秋水仙素)的同源四倍体桑之间的遗 传差异进行了分析。根据三个桑种5组二倍体桑与同源四倍体桑共10个材料的DNA多态性 及遗传距离分析,二倍体桑与同源四倍体桑的遗传差异小于种间遗传差异,大于种内同倍性 单株间遗传差异,在种内变异水平上。由此认为二倍体桑经秋水仙素诱导成同源四倍体的同 时,其遗传结构即DNA分子序列也发生了一定改变,变化程度因材料的不同而有差异。 对于AFLP分子标记技术及RAPD(Random Amplified polymorphic DNA)分子标记技术 应用于桑树遗传育种研究,经与前人用RAPD方法得出的结果进行比较分析,在亲缘关系较 近的材料间两种方法的实验结果有较高的一致性。结合AFLP和RAPD两种方法各自的特点, 认为AFLP更适宜于有较高亲缘关系材料间的遗传分析。 在DNA提取过程中,根据桑叶自身特点,探索出一种提取高质量桑叶总DNA的方法, 即利用CTAB(Cetyltrimethyle Ammonium Bromide,十六烷基三乙基溴化铵)缓冲液,附加一 定量PVP(Polyvinylpyrrolidone,聚乙烯吡咯烷酮),采用平衡酚-氯仿-异戊醇-核糖核酸酶法抽 提,不仅可较彻底去除蛋白质,RNA,并发现PVP能有效去除桑叶中高含量的多糖,使所提 取DNA能满足AFLP实验要求,保证实验结果可靠性。
【学位授予单位】:西南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:S888.31

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前4条
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【参考文献】
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【同被引文献】
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