收藏本站
《西南农业大学》 2002年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

棉花ADP核糖基化因子基因GhARF的克隆

王文锋  
【摘要】: 分离植物花粉发育相关基因,不仅有助于探明植物花粉发育的分子模式,还可以更好地推动植物雄性不育基因工程和杂种优势利用的发展。 棉花洞A雄性核不育系是1972年从洞庭一号棉花原种圃中发现的突变体,不育度高且稳定,可育与不育花粉在单核期以前发育同步,是研究棉花花药与花粉发育相关基因的理想材料。GHA27是棉花洞A不育株和可育株花药发育的cDNA-AFLP差别显示回收的差异片段,此片段与大豆、拟南芥等植物的ADP-ribosylation factor(ARF)基因相似。本研究利用差异片段GHA27为探针筛选棉花花药cDNA文库,获得了ARF基因的全长cDNA序列,并进一步作了序列和表达分析。实验主要得到以下结果: 1.棉花ARF基因的克隆 选取棉花洞A雄性不育株和可育株花药cDNA-AFLP差别显示的差异片段GHA27,用地高辛标记作为探针,筛选棉花洞A花药的cDNA文库,克隆得到了棉花ARF基因的cDNA全长序列,将其命名为GhARF(Gossypium hirsutum ADP-ribosylation factor)。 2.棉花ARF基因的序列分析 核苷酸序列分析表明,GhARF的全长为828bp,其中含有一个从131bp到676bp间的546bp构成的一个完整开放阅读框,它编码181个氨基酸、分子量为20.7kD的蛋白质。在5’端有130bp的非编码区,3’端非编码区长152bp,内含PolyA加尾信号AATTAA及PolyA尾。 3.棉花ARF基因的同源性分析 应用NCBI进行DNA序列的相似性分析,结果表明:棉花ARF基因与其它植物、动物和酵母的ARF基因具有较高的同源性。棉花ARF基因编码的氨基酸序列与拟南芥,小麦、马铃薯、牛的同源性分别达到99%(179/180)、98%(177/180)。96%(174/180) 杨花肠P核符吞fi曰手谷回伽皿的夭险 和 92%(168ill)。 4.ARF基因氨基酸序列的保守域 氨基酸序列分析表明,ARF’基因编码的氨基酸序列中具有保守的GTh结合区域: P(GLDAAGKT)、G(NKQDL)以及G’(DVGGO)。 5.棉花ARI;’基因的表达分析 用地高辛将棉花ARF基因标记为探针,与棉花洞A的不育株花药、司有株花药、 可育花粉粒、叶片、花冠、胚根和胚珠的总RNA进行斑点杂交。结果表明,ARF基因 在棉花中的表达具有组织特异性:在可育花药、不育花药、可育花粉粒和花冠中表达, 而在叶片、胚根和胚珠中不表达。 6.Southern blot分析 用 Bgl 11、Kpn、Hindlll EcoRV、EcoR五种限铝性内切酶分另酶切棉花 洞A的基因组DNA,用地高辛标记的ARF作为探针与之进行Southern杂交c杂交结果 显示,ARP基因在陆地棉基因组中可能至少有两个拷贝。
【学位授予单位】:西南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:Q943.2

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 吴静;徐碧玉;金志强;;小G蛋白Arf的研究进展[J];现代农业科技;2007年16期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 刘艳阳;不同类型玉米自交系胚乳发育关键时期差异表达基因的分离与克隆[D];河南农业大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 韦带莲;香蕉重要基因的克隆与功能的初步分析[D];华南热带农业大学;2006年
2 吴静;香蕉小G蛋白基因MuArf1的组织结构分析及其在果实采后成熟中的表达研究[D];华南热带农业大学;2007年
3 闻可心;白桦雌雄花差异表达基因的筛选及表达分析[D];东北林业大学;2010年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 夏兰芹,郭三堆;棉花RNA的快速提取方法[J];棉花学报;2000年04期
2 李胜国,刘玉乐,康良仪,田波;烟草花药特异启动子的克隆、活性测定及雄性不育基因和恢复基因的构建[J];农业生物技术学报;1995年03期
3 赵炜,郑佐华,毛裕民;全长cDNA的获得──RACE及其他方法进展[J];生命科学;1999年02期
4 宁顺斌,王玲,宋运淳;几种差别表达基因显示技术及其在植物方面的应用[J];生命科学;1999年03期
5 缪颖,曹家树,陈林姣;芸薹属植物雄性不育的发育生物学研究[J];生命科学;2000年03期
6 汪迎春,孙勇如,张利明,李文彬;植物花药花粉特异性基因的调控序列[J];生物工程进展;2000年02期
7 张庆华,茅矛,陈竺;基因组研究中全长cDNA克隆的策略[J];生物工程进展;2000年04期
8 王建革,孙宝启,宋建民,金叔勋;植物未知产物发育基因的分离方法[J];生物工程进展;2001年05期
9 李胜国,刘玉乐,田波;植物花粉发育的分子生物学研究进展[J];生物工程进展;1997年02期
10 刁丰秋;植物发育基因克隆技术的新进展[J];生物工程进展;1998年02期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 侯磊;棉花洞A雄性不育系及保持系花药发育的mRNA差别显示[D];西南农业大学;2001年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 安社娟;陈家;陈华洁;常薇;刘莉莉;赵艳丰;陈学敏;;反式二羟环氧苯并(a)芘相关新基因brg的全长克隆[J];癌变.畸变.突变;2006年04期
2 夏广清,何启伟;大白菜雄性不育及其机理的研究进展[J];山东农业科学;2004年06期
3 于洪欣,柳建军,冯兆礼,董金铎;通过花粉管途径将抗虫基因(CpTI)导入小麦的研究[J];山东农业科学;1999年01期
4 狄曙玲;刘列钊;柴友荣;杨光伟;;类黄酮物质及查尔酮合酶在油菜性状改良中的作用[J];安徽农学通报;2007年18期
5 赖鹏程;;高等植物特异启动子研究现状[J];安徽农学通报(上半月刊);2011年03期
6 关正君,杨学举,刘桂茹;基因工程在雄性不育小麦中的应用研究进展[J];安徽农业科学;2003年01期
7 荆贝贝;金伟波;王亚红;郭蔼光;;银杏种仁总RNA提取方法[J];安徽农业科学;2006年10期
8 李婉莎;杨红玉;;花药绒毡层发育相关基因的研究进展[J];安徽农业科学;2007年14期
9 李先良;;银杏总RNA的提取[J];安徽农业科学;2007年29期
10 唐雯;张相琼;;棉花“洞A”型核雄性不育形态及机理研究现状[J];安徽农业科学;2008年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 宋江华;;植物花粉发育的基因工程研究[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
2 彭镇华;汪政科;;观赏植物基因工程研究进展[A];中国花卉科技进展——第二届全国花卉科技信息交流会论文集[C];2001年
3 缪颖;曹家树;陈云鹏;;荧光原位杂交技术及其在园艺科学研究中的应用[A];中国科协第3届青年学术年会园艺学卫星会议暨中国园艺学会第2届青年学术讨论会论文集[C];1998年
4 徐昌杰;胡桂兵;张上隆;;果实成熟特异启动子研究进展[A];中国园艺学会第五届青年学术讨论会论文集[C];2002年
5 刘厚诚;黄琴;刘晴;陈日远;;园艺植物中花色苷调节因子及影响因素的研究进展[A];中国园艺学会第五届青年学术讨论会论文集[C];2002年
6 侯喜林;史公军;王彦华;;不结球白菜胞质雄性不育基因分子标记的筛选及特异片段的分析[A];蔬菜分子育种研讨会论文集[C];2004年
7 郭军;屈冬玉;王晓武;金黎平;谢开云;Rays Jiang;Francine Govers;;利用cDNA-AFLP技术鉴定马铃薯晚疫病菌小种特异无毒基因候选表达序列[A];蔬菜分子育种研讨会论文集[C];2004年
8 许锋;程水源;;植物查尔酮合成酶分子生物学研究进展及展望[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
9 薛渝峰;赵锦;刘孟军;;cDNA—AFLP技术及其在干果研究中的应用[A];第五届全国干果生产、科研进展学术研讨会论文集[C];2007年
10 李大伟;巩振辉;贾庆利;;利用cDNA-AFLP研究辣椒疫病抗性相关基因[A];2008园艺学进展(第八辑)——中国园艺学会第八届青年学术讨论会暨现代园艺论坛论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 黄俊骏;DNA甲基转移酶基因的表达和花粉母细胞DNA的甲基化[D];兰州大学;2010年
2 王发明;柚(citrus grandis Osbeck)单染色体AFLP分子标记体系及文库的建立[D];福建农林大学;2010年
3 田新惠;彩色棉GhF3'H与GhF3'5'H基因的克隆、鉴定及四种类黄酮物质的HPLC分析[D];石河子大学;2010年
4 韩莹琰;白菜花粉发育相关的C2H2型锌指蛋白新基因BcMF20的克隆与功能验证[D];浙江大学;2011年
5 刘宏波;甘蓝型油菜抗病虫基因遗传转化及转基因植株抗性鉴定的研究[D];浙江大学;2010年
6 石从广;油菜EMS诱变群体的构建以及油脂代谢相关基因等位多态性与油脂品质关系的研究[D];浙江大学;2010年
7 万凌琳;水稻β-1,3葡聚糖苷酶基因Osg1的功能研究[D];武汉大学;2010年
8 赵会芳;新型大白菜Ogura细胞质雄性不育系RC_7不育机理研究[D];西北农林科技大学;2010年
9 张立荣;TcLr24小麦抗叶锈病相关基因的分离与功能分析[D];河北农业大学;2011年
10 李柯;粘虫取食行为候选基因的克隆与表达研究[D];陕西师范大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李炫丽;ms2Bnap同源序列在萝卜—芥蓝异源四倍体中的克隆及表观遗传变异分析[D];华中农业大学;2010年
2 闫恒超;棉花纤维发育伸长期和次生壁加厚期数字表达谱分析[D];华中农业大学;2010年
3 冯玖玲;杜氏盐藻RbcS基因家族新成员的克隆及功能研究[D];郑州大学;2010年
4 冯雪梅;棉花隐性核雄性不育系“21A”的遗传和不育机理研究[D];山东农业大学;2010年
5 汪俊君;小麦大粒突变体的遗传分析和相关基因片段的克隆[D];山东农业大学;2009年
6 霍凤梅;洋葱种质资源遗传多样性的SRAP分析与查尔酮合成酶基因的分子克隆与表达研究[D];山东农业大学;2010年
7 于壮;CMO启动子驱动CMO基因在烟草中的表达[D];辽宁师范大学;2010年
8 陈林波;茶树抗寒相关基因的克隆与表达特性分析[D];安徽农业大学;2010年
9 季彦林;马铃薯块茎糖苷生物碱积累的光诱导效应研究[D];甘肃农业大学;2010年
10 张艳云;番茄E8基因启动子的克隆及其在拟南芥中的表达分析[D];甘肃农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王力先;王永飞;;被子植物花发育的ABC模型研究进展[J];安徽农学通报;2007年08期
2 钟巍然;柴友荣;张凯;陈晓丹;卢坤;陶澜;;苯丙烷代谢途径中细胞色素P450的研究[J];安徽农业科学;2008年13期
3 王翔;郭侠斌;王创云;侯雅静;尹钧;;植物MADS-box基因研究进展[J];安徽农业科学;2009年35期
4 刘晓玲;;植物花发育模型的研究进展[J];现代农业科技;2008年22期
5 江昌俊,余有本;苯丙氨酸解氨酶的研究进展(综述)[J];安徽农业大学学报;2001年04期
6 李伯航;崔彦宏;;夏玉米胚乳细胞建成与粒重关系研究[J];河北农业大学学报;1989年04期
7 杨德浩,杨敏生,王进茂;白桦种源及繁殖的研究现状[J];河北农业大学学报;2003年S1期
8 刘桂丰,蒋雪彬,刘吉春,李景云,王玉成,胡润田,王会仁,滕文华,彭宏梅,杨传平;白桦多点种源试验联合分析[J];东北林业大学学报;1999年05期
9 杨传平,刘桂丰,姜静,梁艳;白桦雄花发育过程中内源激素含量的变化[J];东北林业大学学报;2002年04期
10 王玉成,薄海侠,杨传平;胡杨、柽柳总RNA提取方法的建立[J];东北林业大学学报;2003年05期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 庄晓蕾;水稻小G蛋白Arf GTPase激活蛋白OsAGAP功能研究[D];中国科学院研究生院(植物研究所);2004年
2 赵素珍;MADS-box基因在单子叶植物花发育中的功能研究[D];中国科学院研究生院(植物研究所);2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前8条
1 苏伟;香蕉采后果实成熟特异表达基因的分离与鉴定[D];华南热带农业大学;2003年
2 刘卡;小麦杂交种与亲本之间差异表达EST的克隆和鉴定[D];中国农业大学;2004年
3 杨小亮;香蕉果实成熟相关基因的克隆及表达分析及橡胶乙烯受体基因的克隆[D];华南热带农业大学;2004年
4 李燕强;香蕉乙烯合成关键酶基因上游调控因子克隆[D];华南热带农业大学;2005年
5 胡丽芳;MADS-box基因的克隆及其在香蕉果实各成熟阶段的表达分析[D];华南热带农业大学;2005年
6 张宏一;高粱幼苗水分胁迫诱导表达差异cDNA的研究[D];中国农业科学院;2005年
7 韦带莲;香蕉重要基因的克隆与功能的初步分析[D];华南热带农业大学;2006年
8 龙强;龙眼(Dimocarpus longan Lour.)成花逆转蛋白质组学的初步研究[D];福建农林大学;2006年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 孙丰宾;魏继承;刘瀛;张妍;马丽丽;付扬威;刘雪梅;;白桦钙调蛋白基因CaM的分离及其转录表达[J];经济林研究;2011年04期
2 张妍;刘瀛;孙丰宾;戴超;刘雪梅;;白桦APETALA2(AP2)转录因子基因的分离及其表达[J];林业科学研究;2012年02期
3 马丽丽;邱丽丽;付扬威;荆瑞瑞;刘雪梅;;白桦开花位点Flowering Locus T(FT)基因的分离及其表达[J];植物研究;2012年06期
4 刘芳;吴亮其;王辉;张媛雅;柴团耀;;商陆小G蛋白激活蛋白基因PaAGAP在逆境下表达研究[J];中国科学院研究生院学报;2011年01期
中国硕士学位论文全文数据库 前8条
1 何男男;苜蓿HD-Zip转录因子基因Mfhb-1的功能研究[D];河南科技学院;2010年
2 胡小弦;玉米胚乳发育两个时期相关microRNA研究[D];四川农业大学;2011年
3 崔庆新;两个玉米转录因子ZmC4HC3和ZmNAC的克隆与表达分析[D];河南农业大学;2010年
4 吴静;香蕉小G蛋白基因MuArf1的组织结构分析及其在果实采后成熟中的表达研究[D];华南热带农业大学;2007年
5 于巧平;苹果ACO1转录因子MdHB-1基因的克隆及其在酵母细胞中的表达[D];西北农林科技大学;2012年
6 孙丰宾;白桦花发育相关基因CaM和FT的分离及其转录表达分析[D];东北林业大学;2012年
7 张妍;白桦花发育相关基因AP2和LTP的分离及其转录表达[D];东北林业大学;2012年
8 叶敏;酿酒酵母中小G蛋白Ypt1对Ypt6在细胞外吐和细胞自噬过程中功能互补的研究[D];南京农业大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈凤祥,周立人,李展;植物细胞核雄性不育保持途径研究进展(综述)[J];安徽农业大学学报;1997年01期
2 王光清,杨金水,程宁辉,高燕萍,钱旻,葛扣麟,谈家桢,恩和巴雅尔,严成其,毛根夫,庞立朝;差异展示法鉴定GA_3诱导的水稻差异表达的mRNA[J];复旦学报(自然科学版);1996年02期
3 王学德,朱英国;水稻雄性不育与可育花药的mRNA差别显示和cDNA差别片段的分析[J];中国科学C辑:生命科学;1998年03期
4 叶寅,徐雷新,田波;一个黄瓜花叶病毒强株系的外壳蛋白基因的合成、克隆、序列分析和表达[J];科学通报;1991年17期
5 郭光沁;许智宏;卫志明;陈惠民;;用PEG法向小麦原生质体导入外源基因获得转基因植株[J];科学通报;1993年13期
6 赵大中,陈民,种康,万莉,黄华梁,谭克辉;运用差异显示法分离冬小麦春化作用相关cDNA克隆[J];科学通报;1998年09期
7 刘金兰,聂以春, 黄观武,孙贞,毛正轩;洞A型核雄性不育材料花粉不同发育时期的超微结构观察[J];棉花学报;1994年04期
8 杨晓云,曹寿椿;温度对不结球白菜波里马胞质雄性不育系育性的影响[J];南京农业大学学报;1997年02期
9 何军贤,梁厚果;用低浓度硫氰酸胍提取高质量植物RNA[J];生物化学与生物物理进展;1998年04期
10 邵莉,李毅,潘爱华,陈章良,陈敏;查尔酮合酶基因的克隆、全序列分析及在大肠杆菌中的高效表达[J];生物工程学报;1995年02期
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026