收藏本站
《西南农业大学》 2002年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

外源基因在家蚕中靶向整合及线粒体载体研究

汪琳  
【摘要】: 家蚕是蛋白质高效转化生物,具有周期短、繁殖率高、后代个体数多、能大量饲养等优点。蚕丝业在我国已有五千多年历史,家蚕作为一种模式生物,其基础研究和分子生物学研究取得了巨大进展,开展其转基因研究的基础条件正日趋成熟。家蚕转基因研究在基础理论研究、特异品种培育和生物工程制药上,都具有巨大的潜力和实际意义:在基础理论研究方面,由于外源基因在宿主中能进行复制整合与表达,并受制于受体基因组遗传背景的调控,因此转基因本身成为一个理想的功能标记,在基因表达调控机理研究方面颇有价值,如近来时空特异性顺式调控元件及其远程作用力、反式作用因子及其相互作用、基因协同表达、复合型启动子/增强子外源基因的反馈调节以及染色体内重组等一系列重要发现就得益于转基因模型;在品种改良方面,可改良家蚕的某些性状,如抗病性、性别控制、改进蚕丝的品质和加工性状等;在生物反应器开发方面,还可利用转基因家蚕生产工程蛋白及高附加值产品,如人抗血友病因子、白细胞介素等。 但遗憾的是家蚕不能象哺乳动物那样,可通过受精卵显微注射—细胞培养—受精卵移植—发育成成熟个体的途径制作转基因个体,而只能通过将外源基因导入蚕卵的方式来实现。但蚕卵卵壳坚硬,卵黄丰富,外源基因难以穿透坚硬的卵壳进入细胞核;并且目前的整合载体不够理想,外源基因即使转移到家蚕受精卵中,也很难稳定整合到家蚕基因组中,这两点限制了家蚕转基因研究的发展。 本论文针对这两个问题,以精子介导法利用同源重组技术对家蚕丝素重链基因进行基因打靶,探讨了精子介导法导入外源基因的优越性、外源基因在宿主细胞中的滞留与整合、同源重组发生的动态过程,以及用线粒体DNA作家蚕转基因载体的可行性等。现将主要研究内容和结果总结如下: 1.引导同源重组的同源臂池的构建 为了探索一条更为有效的整合策略,使外源基因能定点整合到靶位点,又不破坏宿主基因的启动子、内含子等表达调控元件,令外源基因对宿主生理功能的影响达到最小,我们以丝素重链基因2号外显子为整合靶位点,以便将外源基因定点整合其间,为此,需要在其两端接上与丝素基因同源的DNA片段,以引导同源重组的发生。分析丝素重链基因2号外显子结构,发现其由12个结晶区与11个不定型区相间排列而成,于是扩增其结晶区作同源臂。但由于结晶区GC含量高,序列内部重复性高,二级结构复杂,常规PCR无法扩增出目的产物。本研究通过调整反应体系缓冲液pH值、采用高保真pfu DNA聚合酶和Klenow酶组合、加缓解二级结构的有机试剂甲胺、换引物多步扩增而成功实现了重复区片段R02-R11的扩增。将扩增产物克隆进pUC19质粒载体中,就构建成同源臂 $S 池。这为高GC含量、高重复性模板、较长靶序列复杂PCR扩增提供了可借鉴之路。 将Tris叫 缓冲液的幽提高到8.8刁.2u5℃),以补偿因温度增高带来的 l讥下降, 而避免脱瞟吟事件的发生,才能保证长序列PCR的顺利进行。 高GC含量使模板二级结构复杂而稳定,一般热启动难于解开,而变性温度过高、时 间过长又不利于DNA聚合酶的活性作用发挥,于是借助能缓释模板二级结构的有机试剂 甲胺扩增高GC含量模板。 /u0M聚合酶比T叫酶有更高的保真复制性能和热稳定性,更有利于高(儿含量模 板的扩增。PCR热循环完成后,加入具有3’6’核酸外切酶活性的Klenow片段温育, 能切除误配碱基,而降低多步扩增中碱基误配级联扩增的错误。 2.槽子介导法向家蚕导人外源基因 先将外源目的GFP基因克隆到质粒PUC19的多克隆位点,再将克隆的结晶区序列R05 和m 分别引入到GFP的两端,得到以绿色荧光蛋白为报告基因的同源打靶质粒[,GFPLR。 将打靶质粒酶切线性化后,分别注入到雌蛾交配囊和雄蛾贮精囊,-与正常蛾交配产卵, 分析外源基因在当代的情况。实验结果,精子介导法制作转基因蚕的阳性率约为20-40%, 说明该方法是可行的。但分析结果同时表明,外源0*A在受精卵中是不均匀分0泊0,同 一蛾区也存在嵌合现象,有些个体是转基因蚕,有些则不是,这就增加了转基1).]蚕筛选 和继代的难度。将外源DNA‘注射进雄蛾贮精囊比注射到雌蛾交配囊后代有更’,:j的阳性 率,且同蛾区嵌合现象轻些。 3.外槽基因在宿主细胞中的滞留与鳖合 为了探索转基因的分子生物学特性,本研究探讨了外源基因在宿主细胞中的滞留和 整合情况,发现外源基因随精子进入家蚕受精卵后,在整合前有一个滞留期,/l{该时期 发生一系列染色体外重组、修饰事件:注入的外源0*A分子末端发生蚕食,随行一部分 分产发生分子间连接产生线状多联体,其游离端是重组的优选位置。一部分分J,产生分 子内连接,头尾相连成环状。环状多联体在不断参与连接过程中再开裂成线状,开裂位 置是随机?
【学位授予单位】:西南农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:S882

手机知网App
【引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 郑小坚;家蚕类胰岛素基因BBX-B8的功能研究[D];苏州大学;2010年
2 刘彦群;柞蚕种质资源的分子系统学研究[D];西南农业大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 刘耀文;利用转基因家蚕脂肪体表达重组植酸酶(rphyA)的研究[D];西南大学;2012年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张晓岚,陈农安,祁国荣,陆长德;抗家蚕核多角体病毒(BmNPV)即刻早期蛋白基因的三联核酶的设计和性质[J];病毒学报;1996年04期
2 黄君霆;桑蚕的可动遗传因子[J];蚕桑通报;1999年01期
3 张峰,赵昀,黄荣,祁国荣,陆长德,陈秀,黄君霆;绿色荧光蛋白在家蚕细胞中的表达[J];蚕业科学;1997年03期
4 周丛照,李振刚;真核基因转移、整合和表达载体MAR的研究[J];高技术通讯;1994年12期
5 王宏伟,邱信芳;同源重组在基因定点整合应用中的评估[J];国外医学.遗传学分册;1994年01期
6 陈付学,吴锋;转基因动物研究进展[J];甘肃畜牧兽医;1998年05期
7 李振刚,吴秋莺,王为民,康凡,吴健,范久戈,陶万珍;以模板活性染色质转移家蚕基因的研究[J];昆虫学报;1989年01期
8 李振刚,周丛照,唐恒立,范久戈;YAC介导的天蚕丝素基因向家蚕的转移──天蚕丝素基因-YAC克隆在家蚕的表达[J];昆虫学报;1997年01期
9 戎锐,李振刚;家蚕转基因研究进展[J];昆虫知识;1998年03期
10 李振刚,周丛照,唐恒立,范久戈;YAC介导的天蚕丝素基因向家蚕的转移及其在F_2代中的表达[J];科学通报;1995年24期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 谢永芳,舒坤贤,梁亦龙,袁帅,张继承;小鼠胚胎发育中期肠细胞增殖与凋亡的研究[J];癌变.畸变.突变;2005年01期
2 王子良,许丽艳,李恩民;质粒制备和反应温度对嵌套缺失技术的影响[J];癌变.畸变.突变;2005年02期
3 康振桥;季艳霞;杨志勇;苏光;崔彦芝;;血管内皮生长因子亚型在人乳腺癌细胞中的表达差异[J];癌变.畸变.突变;2006年03期
4 安刚;黄天华;谢庆东;王德刚;;pCXN2-mIZUMO对C57BL/6小鼠生育能力的影响[J];癌变.畸变.突变;2007年04期
5 朱斌;杨罗艳;赵晓昆;;膀胱癌多药耐药基因MDR-1与金属硫蛋白-3表达的关系[J];癌变.畸变.突变;2007年05期
6 毕玉平,廖俊杰,单雷,王兴军,徐平丽;番茄双抗TMV和CMV基因工程的研究[J];山东农业科学;1997年06期
7 单雷,毕玉平,王兴军,徐平丽,李广存;双抗TMV和CMV转基因番茄后代的遗传分析[J];山东农业科学;1998年04期
8 葛宏华,孙莉宁,张其瑞;家蚕血淋巴蛋白的发育变化和BmLSP的纯化[J];安徽大学学报(自然科学版);2001年03期
9 韦传宝;贾玉成;杜宇;;芋花叶病毒检测试剂盒的研制[J];安徽大学学报(自然科学版);2009年04期
10 徐家萍,刘明辉;转基因家蚕与家蚕、天蚕丝心蛋白氨基酸组成的比较研究[J];安徽农学通报;2002年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 徐义流;张绍铃;;梨活体花柱内花粉RNA的降解[A];食品安全的理论与实践——安徽食品安全博士科技论坛论文集[C];2005年
2 徐家萍;;家蚕对核型多角体病的抗性机制及安徽省蚕病防治的思考[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
3 白兴荣;董占鹏;廖鹏飞;黄平;;家蚕精子介导转基因技术初探[A];云南省昆虫学会2011年学术年会论文集[C];2011年
4 王春花;成军;郎振为;吴煜;杨艳杰;张黎颖;刘妍;;基因表达谱芯片技术筛选XTP3蛋白反式调节基因[A];第一届全国人工肝及血液净化学术年会暨全国人工肝及血液净化攻关协作组成立大会论文集[C];2004年
5 唐南洪;王晓茜;李秀金;陈燕凌;;构建特异高表达人谷氨酰胺合成酶基因(hGS)的肝细胞[A];第三届全国重型肝病及人工肝血液净化学术年会论文集(上册)[C];2007年
6 徐惠君;庞俊兰;杜丽璞;叶兴国;李连城;辛志勇;程顺和;吴宏亚;;基因枪转化小麦黄花叶病毒抗性基因创造小麦新种质[A];农业科技创新与生产现代化学术研讨会论文集[C];2001年
7 康乐;吴成君;叶兴国;徐惠君;杜丽璞;马有志;;葡萄糖氧化酶基因转化小麦的研究[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
8 赵凌;王才林;朱镇;;花粉管介导的转bar基因水稻后代主要农艺性状的变异[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
9 陈秀蓉;杨成德;贾迎春;;西瓜细菌性果斑病菌的分离鉴定[A];节能环保 和谐发展——2007中国科协年会论文集(三)[C];2007年
10 胡玉荣;张强;马萍;吕万良;王坚成;张振中;;壳聚糖纳米粒基因载体的制备及其转染研究[A];第十届中国科协年会论文集(三)[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张青婵;A亚群禽白血病病毒不同分离株的基因组和生物学特性比较[D];山东农业大学;2010年
2 张升祥;家蚕气味结合蛋白基因的研究[D];山东农业大学;2009年
3 李振东;东祁连山高寒草地优势植物内生细菌多样性研究[D];甘肃农业大学;2010年
4 姚小磊;基于TGF-β1与Bcl-2的抗干眼症中药高通量筛选体系的建立[D];湖南中医药大学;2010年
5 赵永刚;副溶血弧菌tdh、trh和tlh基因的克隆、表达及基因敲除对其溶血活性的影响[D];中国海洋大学;2010年
6 宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
7 郑小坚;家蚕类胰岛素基因BBX-B8的功能研究[D];苏州大学;2010年
8 孙国清;不同抗虫棉品种杀虫蛋白表达研究及影响抗虫性分析[D];新疆农业大学;2010年
9 李望丰;SsNHX1基因在紫花苜蓿中的表达及其耐盐性研究[D];东北师范大学;2010年
10 刘爱玲;水稻OsHsfAs和OsCH2基因的功能研究[D];湖南农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 魏礼玲;MYB转录因子家族相关EST干涉载体构建及遗传转化的研究[D];华中农业大学;2010年
2 付雪林;转Bt基因甘蓝的抗虫性研究[D];华中农业大学;2010年
3 郑瑜;银杏核心种质构建初探[D];华中农业大学;2010年
4 万珊;柑橘粉虱对柑橘叶片挥发物的行为反应及其遗传分化研究[D];华中农业大学;2010年
5 刘远;基于基因聚合策略选育高产仔数大白猪新品系的研究[D];华中农业大学;2010年
6 曹晶;风疹病毒(RV)包膜糖蛋白E1特异基因片段的原核表达[D];南京医科大学;2009年
7 顾卫娟;可诱导型睾丸特异性启动子Cre工具鼠的建立及HRB2细胞功能研究[D];南京医科大学;2010年
8 罗素娟;家蚕细胞周期依赖性蛋白激酶家族(CDK)的研究[D];浙江理工大学;2010年
9 陈晓平;家蚕30kD载脂蛋白19G1的表达和功能的初步研究[D];浙江理工大学;2010年
10 刘静;家蚕BmycaCR基因的原核表达和亚细胞定位研究[D];浙江理工大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 廖顺尧,刘运强,鲁成,周泽扬,向仲怀;家蚕线粒体ND2、COⅠ和若干tRNA基因的克隆及序列分析[J];动物学报;2002年03期
2 翟红本;河南省柞蚕品种现状及其发展对策[J];北方蚕业;2000年04期
3 陈燕茹,许秀华,赵中明,张文霞,戴灼华;Drosophila immigrans果蝇随机扩增DNA多态性初步分析[J];北京大学学报(自然科学版);1997年02期
4 孙延波;李菁华;史红艳;;mIL-4昆虫表达载体pIZT/V5-His的构建及其高效表达[J];吉林大学学报(医学版);2006年02期
5 缪云根;昆虫转座子及在家蚕中的应用[J];蚕桑通报;2004年02期
6 王韵,周泽扬,朱勇,鲁成,程道军,向仲怀,杨彪,曾华明;RAPD分析技术在家蚕品种鉴定实践中的应用[J];蚕学通讯;1998年01期
7 田村俊树,李斌 ,张袁松;转基因昆虫研究[J];蚕学通讯;2001年04期
8 刘春;徐汉福;陈玉琳;李春峰;张美蓉;夏庆友;;家蚕转基因研究及肌动蛋白A3启动子的表达分析[J];蚕学通讯;2007年03期
9 邓华山;关于柞蚕蛹期感光解除滞育的效应[J];蚕业科学;1980年02期
10 宫剑云,潘传荣;柞蚕卵感光时间及温度与出现滞育蛹的关系试验初报[J];蚕业科学;1982年01期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 薛仁宇;表达dsRNA的转基因家蚕对BmNPV的抗性研究[D];苏州大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前8条
1 刘运强;家蚕线粒体基因组全序列测定及分析[D];西南农业大学;2001年
2 赵洪喜;驯鹿狂蝇生物学特性及对机体抗氧化能力影响的研究[D];内蒙古农业大学;2006年
3 贾海芳;家蚕丝腺生物工厂表达hGM-CSF基因打靶载体的构建及应用研究[D];苏州大学;2008年
4 李曦;家蚕丝腺生物工厂表达hGM-CSF的研究[D];苏州大学;2009年
5 谢敏;控制家蚕发育的转基因研究[D];苏州大学;2009年
6 赵越;转基因家蚕丝腺生物反应器表达hIGF-Ⅰ的研究[D];苏州大学;2009年
7 幸俊逸;利用转基因家蚕脂肪体表达口蹄疫病毒VP1蛋白的研究[D];西南大学;2010年
8 殷亮;N-糖基化对Aspergillus niger 963植酸酶phyA2酶学性质的影响[D];兰州大学;2010年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 靳向东;杨淑芳;;柞蚕育种研究进程及展望[J];北方蚕业;2010年02期
2 秦利;王洪岩;姜义仁;;我国柞蚕(Antheraea pernyi)遗传育种研究进展[J];沈阳农业大学学报;2006年05期
3 秦玉艳;周祥军;姜义仁;;试论中国柞蚕业的可持续发展[J];中国蚕业;2010年03期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴乃虎,王钢锋,阎景智,郭玲,严绍颐,秦鹏春;草鱼和鲤鱼线粒体 DNA 的分离纯化及其 COI 基因的分子克隆[J];动物学报;1991年04期
2 何新,刘桂生,陈清轩,魏庆信,陈永福;转基因猪外源基因染色体定位的研究[J];动物学报;1998年02期
3 郑军恒,茹刚,茹炳根;人胎肝金属硫蛋白的分离纯化及酶联免疫吸附检测[J];北京大学学报(自然科学版);1999年02期
4 须贝悦治;司马杨虎;;通俗遗传学——家蚕人工生殖及其利用 Ⅱ 人工授精和生殖细胞的冷冻保存[J];蚕学通讯;1992年04期
5 赵季英,王清芝,李景福,张秀珍,陈忠,邹文云,薛炎林,田荣乐,张彩华;栗蚕蛹DNA诱导柞蚕遗传变异的研究[J];蚕业科学;1985年04期
6 张果;异科精子在蚕卵中的命运[J];蚕业科学;1987年04期
7 许家喜,金声;罂粟花粉十七肽类似物和片段的合成及其抗肿瘤活性研究[J];高等学校化学学报;1997年07期
8 许家喜,蔡孟深,石佑恩;曼氏血吸虫合成多肽抗原研究[J];高等学校化学学报;1996年03期
9 许家喜,蔡孟深;曼氏血吸虫谷胱甘肽S-转移酶Sm26/2的抗原肽研究[J];高等学校化学学报;1998年12期
10 周丛照,李振刚;真核基因转移、整合和表达载体MAR的研究[J];高技术通讯;1994年12期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李宝玉;殷相平;李学瑞;兰喜;杨斌;方玉萍;柳纪省;;禽流感病毒H5N2亚型A/Chicken/Gansu/2003株HA+NA基因重组腺病毒的构建[J];中国人兽共患病学报;2008年03期
2 习欠云;张永亮;江青艳;王珣章;;Bac-to-Bac系统在杆状病毒功能基因研究上的应用[J];生物技术通报;2009年06期
3 张冬梅;石振华;林歧;鲁国东;王宗华;;一个假定的稻瘟病菌RhoGEF蛋白参与营养生长和产孢过程的调控[J];中国农学通报;2009年11期
4 余贤美;林超;杨芩;李锐;贺春萍;郑服丛;;同源重组法构建枯草芽孢杆菌dhbC基因缺失突变株和回复株[J];热带作物学报;2009年10期
5 邓远德;;重组工程的研究进展[J];农技服务;2009年11期
6 戴倩;田云;卢向阳;;同源重组介导的克隆策略研究进展[J];农产品加工(学刊);2011年06期
7 廖军,徐冲,杨永辉,李晖,程阳,陈承露,朱国萍,牛立文,王玉珍;变性双链法实现葡萄糖异构酶基因敲除的研究[J];遗传学报;2000年05期
8 马友记;柳纪省;赵兴绪;李志勇;殷相平;李宝玉;;猪Ⅱ型圆环病毒Cap基因重组腺病毒表达载体的构建[J];甘肃农业大学学报;2005年06期
9 毕志香;刘永杰;;嗜水气单胞菌转录调控蛋白基因(ahyR)突变株的构建及特性分析[J];农业生物技术学报;2006年01期
10 孙永科;杨玉艾;王养会;张彦明;;表达猪瘟病毒石门株E0抗原的重组腺病毒构建及免疫性的研究[J];畜牧兽医学报;2007年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 牛建强;夏咸柱;扈荣良;张守峰;黄耕;;应用细菌分子间同源重组机制快速克隆腺病毒基因组的研究[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
2 段劲;郭丽宏;;变形链球菌UA159磷酸蔗糖变位酶基因功能丧失菌株的构建[A];2007年第七次全国牙体牙髓病学学术会议论文集[C];2007年
3 朱春红;孙晓庆;何素芬;朱国强;;基于Red同源重组和高效自杀性载体系统构建肠炎沙门菌突变株方法的比较[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年
4 陆畔玲;丁秋兰;戴菁;王鸿利;王学锋;;两个同源重组血友病家系的基因[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年
5 刘建密;邵铁梅;李国勋;宋福平;;微生物基因敲除技术的研究进展[A];科技创新与绿色植保——中国植物保护学会2006学术年会论文集[C];2006年
6 贺松;张德纯;;基因敲除方法及其应用[A];重庆市预防医学会2009年论文集[C];2009年
7 杜眉;叶克应;丁壮;;基因打靶及其在体细胞和动物克隆中的应用[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会论文集[C];2006年
8 叶菲;朱剑;余潮;官杰;朱友林;;基因打靶技术及其应用[A];湖北省遗传学会、江西省遗传学会2006年学术年会暨学术讨论会论文摘要集[C];2006年
9 陆晔玲;丁秋兰;戴菁;王鸿利;王学锋;;两个同源重组血友病家系的基因诊断[A];第十一届全国血栓与止血学术会议暨血栓栓塞性疾病(血栓与止血)基础与临床研究进展学习班论文摘要汇编及学习班讲义[C];2007年
10 袁子国;张秀香;徐慧娟;王晓虎;张守峰;扈荣良;;以伪狂犬病病毒(Bartha-K61)为载体正向表达狂犬病病毒糖蛋白重组疫苗的构建[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 李旻本报实习记者 甘勃;基因敲除开启生命科学新纪元[N];大众科技报;2007年
2 姬十三;“基因敲除”敲开疾病之门[N];南方周末;2007年
3 本报记者 郑焕斌;修正遗传密码中的“乱码”[N];科技日报;2006年
4 本报记者 马建忠;三“狙击手”命中诺贝尔[N];医药经济报;2007年
5 本报记者 刘远芬;“基因靶向”奠基者获2007诺贝尔医学奖[N];医药经济报;2007年
6 本报记者 张佳星;基因靶向:让医生有了“瞄准镜”[N];科技日报;2007年
7 记者毛磊;剔除有病基因[N];人民日报;2003年
8 本报驻德国记者 李山;给枯燥的报告换个讲法[N];科技日报;2011年
9 湖北省肿瘤医院 徐崇明;浅谈癌症的基因治疗[N];湖北科技报;2001年
10 记者 陈卫东;我破解基因工程产业化难题[N];科技日报;2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 朱逸;生殖细胞突变在淋巴细胞中功能检测模型的建立、分析和应用[D];复旦大学;2011年
2 张洪波;采用同源重组技术构建PrA低表达且能分泌LTP1的酿酒酵母菌株及其性能研究[D];浙江大学;2009年
3 郭刚;人幽门螺杆菌蒙古沙鼠适应性定植相关蛋白的鉴定及功能研究[D];第三军医大学;2004年
4 潘晓玲;乙型脑炎病毒全基因组分子进化及基因重组研究[D];中国疾病预防控制中心;2009年
5 刘红全;条斑紫菜的转基因研究[D];中国海洋大学;2004年
6 孙照刚;传染性喉气管炎病毒糖蛋白G基因的克隆、表达、蛋白功能研究以及缺失该基因病毒的重组[D];中国农业大学;2005年
7 陈向岭;同源重组技术在酿酒酵母表达载体构建中的应用[D];复旦大学;2005年
8 张晶;白细胞介素2受体α基因结构和功能的研究[D];中国协和医科大学;1998年
9 张冬梅;稻瘟病菌Rab蛋白功能研究[D];福建农林大学;2009年
10 姜涛;耻垢分枝杆菌MSMEG_6402基因的敲除对细胞壁结构的影响[D];大连医科大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 于梅;一种可转移的重组工程系统pYM-Red的建立及研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
2 尚书;嗜水气单胞菌aopB~-/aopD~-Ah2056株的构建[D];华中农业大学;2008年
3 赵春田;黑曲霉基因阻断突变菌株的构建及其功能分析[D];西南农业大学;2005年
4 赵庆华;栽培稻与紧穗野生稻渐渗系的构建及其性状观察[D];中国农业大学;2005年
5 孙凤军;金黄色葡萄球菌sigB同源重组质粒的构建[D];第三军医大学;2006年
6 谢磊;猪瘟病毒主要抗原基因与猪IL2重组腺病毒的构建及鉴定[D];中国兽医药品监察所;2006年
7 秦丽娜;酿酒酵母乙醇脱氢酶Ⅰ基因的超表达[D];福建师范大学;2008年
8 蔡忠贞;克雷伯氏肺炎杆菌乳酸脱氢酶基因缺失突变株的构建及其应用[D];新疆大学;2008年
9 郭毅;胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ △orf1缺失株的构建及生物学特性研究[D];华中农业大学;2008年
10 李建伟;重组腺病毒载体pAd-CD的构建和鉴定[D];青岛大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026