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《西南农业大学》 2003年
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水稻线粒体不育基因RAPD标记筛选、克隆测序及特异性分析

裴得胜  
【摘要】: 植物细胞质雄性不育(CMS)是植物遗传学研究热点之一,而水稻雄性不育是培育杂交水稻的理论基础。自1945年Sears提出植物雄性不育的“三型学说”以来,探索水稻的雄性不育基因已成为当前植物遗传学研究的焦点之一。水稻细胞质雄性不育(RCMS)是一种母性遗传性状,它是水稻杂种优势利用的一个重要途径。较多的研究结果表明,水稻细胞质雄性不育(RCMS)与线粒体基因组的关系十分密切,因此水稻线粒体基因组结构的分析对于揭示水稻细胞质雄性不育(RCMS)的分子机制具有十分重要的意义。本实验以研究报道较少的水稻印水型Ⅱ-32不育系、保持系、杂种一代为研究对象,通过RAPD(Randomly Amplified Polymorphic DNA)技术筛选其中的差异片段,并进一步验证其与不育性的关系。实验得到以下结果: 1.RAPD条件的优化 分别对Mg~(2+)、dNTPs、Taq酶、模板DNA、引物等设立浓度梯度实验(总体积为25μl),结果表明最佳的参数值为:Mg~(2+)浓度为2.0mmol/l;dNTPs浓度为200μmol/l;Taq酶用量为1.5U;模板DNA浓度为0.5ng/μl;引物浓度为0.2μmol/l。 2.引物筛选的结果 共用OPERON公司260个随机引物(OPA~OPM)对Ⅱ-32A、Ⅱ-32B、Ⅱ优949进行扩增,除少数不产生扩增带外其余扩增效果较好。在分析统计多态性时,我们只考虑强带,共获得差异带22个。 3.差异片段OPJ18-1000、OPJ18-1400的回收和克隆 在水稻Ⅱ-32RAPD反应的优化条件下,用OPJ18扩增Ⅱ-32A、Ⅱ-32B及Ⅱ优949线粒体 水稻线粒体不育基因血皿标记筛边、克叵到序及特异住分析 DNA产生两条明显差异片段:0PJ18-1000、0卜J18-1400O 它们在11-32B线粒体洲A扩增条带相 应位置缺失,而在11-32A、11优949线粒体DNA扩增带中呈阳性。将0PJ18-1000、0PJ18-1400 回收后重组进pGEM-T easy vector。 4.序列测定和组织特异性分析 将所得含 0PJ18-1000、0PJ18-1400的重组质粒的全序列用 AB1377全自动测序仪测序。序 列测定两个特异片段全长分别为1068hP和1481hP。其己在GenBank上登录,登录号分别为: AY167748、AY167749。So[lthern杂交结果证明了差异片段的真实性。用 OPJ18-1000探针与 1132A、1132B、11优949的线粒体RNA斑点杂交,结果表明其在转录水平上对水稻雄性不育 有一定影响作用。虽然OPJ18-1400对应的RNA斑点杂交呈阴性,但其DNA序列中存在一个七碱 基5-TTCCCTC-3的保守系列,它是atp6基因中同源重组热点区,其促使线粒体基因重组形成嵌 合基因,从而对水稻雄性不育的形成起着重要作用。另外 0PJ18-1400 DNA序列同水稻染色体 1、 3、5、7、9、10有很高的同源性,分别为gi%(67V738)、92%(615/668)、92%(434/469)、 89%(665/743)、85%(627/730),除了说明水稻细胞质雄性不育与细胞核基因组也有一定的联 系外,也为研究水稻细胞质雄性不育提供了新思路。
【学位授予单位】:西南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S511

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【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 舒友菊;K型和冈型水稻细胞质线粒体DNA的AFLP分析[D];重庆大学;2007年
2 秦延春;新型分子标记技术与水稻雄性不育遗传标记研究[D];广西大学;2008年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王台,肖翊华,刘文芳;光周期诱导HPGMR叶蛋白质变化的研究[J];华中农业大学学报;1990年04期
2 刘勋甲,郑用琏,石永刚,柯枫英,铁双贵;玉米RAPD研究影响因素的探讨[J];华中农业大学学报;1996年05期
3 朱立煌,徐吉臣,陈英,凌忠专,陆朝福,徐云碧;用分子标记定位一个未知的抗稻瘟病基因[J];中国科学(B辑 化学 生命科学 地学);1994年10期
4 谢纬武,康传红,王继志,王斌,郭德栋;一种新型甜菜胞质雄性不育系的分子生物学鉴定[J];中国科学C辑:生命科学;1996年02期
5 汪小全,邹喻苹,张大明,洪德元,刘正宇;银杉遗传多样性的RAPD分析[J];中国科学C辑:生命科学;1996年05期
6 张能刚,周燮;三种内源酸性植物激素与农垦58S育性转换的关系[J];南京农业大学学报;1992年03期
7 李文彬,周小梅,张健,舒群芳,傅荣昭,曹光诚,马江生,戴思兰,张利明,孙勇如;水稻三系及其杂种的RAPD指纹图谱分析[J];农业生物技术学报;1995年02期
8 孙其信,黄铁城,倪中福,J.D.Procunier;小麦杂种优势群研究Ⅰ.利用RAPD标记研究小麦品种间遗传差异[J];农业生物技术学报;1996年02期
9 杨金水;葛扣麟;Virginia Walbot;;水稻BT型不育系与保持系线粒体DNA的酶切电泳带型[J];上海农业学报;1992年01期
10 梁婉琪,黄亚红,潘爱虎,曾令珂,张大兵,袁勤,全立勇,曹黎明,倪林娟;杂交粳稻亲本随机扩增多态性DNA(RAPD)分析(研究简报)[J];上海农业学报;2001年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 颜廷进,李群,李汝玉,谭振馨;RAPD技术在玉米品种纯度鉴定中的应用研究[J];山东农业科学;2003年01期
2 刁杰;刘景文;吴海英;;同核异质小麦材料RAPD分子标记研究[J];山东农业科学;2005年06期
3 张晗;高永超;沙伟;李汝玉;戴双;;紫萼藓科植物DNA提取及遗传多样性的分析[J];山东农业科学;2006年01期
4 赵凯;程斐;张恩盈;孙宗法;杨万花;;甘蓝胞质雄性不育系花药发育的细胞形态学观察[J];山东农业科学;2007年03期
5 高秀琴;兰进好;穆平;林琪;;小麦遗传多样性研究进展[J];山东农业科学;2007年03期
6 贾曦;姚方印;李萌;;水稻光温敏核不育基因研究进展[J];山东农业科学;2007年03期
7 李鹏;李新华;张锋;邱登林;;细胞质雄性不育系统中的核质互作研究进展[J];山东农业科学;2008年06期
8 魏国芹;戴洪义;孙玉刚;梁美霞;安淼;;榅桲离体培养繁殖的研究[J];山东农业科学;2010年01期
9 刘媛媛;张春庆;吴承来;;LeJA2基因沉默表达载体导入番茄转化系统的建立[J];山东农业科学;2010年02期
10 吴志平;植物转基因方法在桑树上的应用[J];安徽农学通报;2003年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 孙其信;倪中福;吴利民;孟凡荣;王章奎;林展;;杂交种与亲本间基因差异表达与小麦杂种优势分子机理[A];21世纪作物科技与生产发展学术讨论会论文集[C];2002年
2 刘小红;张红伟;刘昕;刘欣洁;谭振波;荣廷昭;;MDMV CP基因的克隆及其转基因玉米的研究[A];2004全国玉米种质扩增、改良、创新与分子育种学术会议论文集[C];2004年
3 张启军;叶少平;虞德容;李平;吕川根;邹江石;;六张水稻遗传连锁图谱的比较分析[A];2005年全国作物遗传育种学术研讨会暨中国作物学会分子育种分会成立大会论文集(二)[C];2005年
4 尹钧;任江萍;李志岗;李磊;周苏玫;卫丽;宋丽;;转基因抗穗发芽小麦的获得[A];中国作物学会2007年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2007年
5 宋喜悦;马翎健;胡银岗;李宏斌;何蓓如;;YS型小麦温敏不育系A3314的细胞学研究[A];中国作物学会2007年学术年会论文集[C];2007年
6 张勇;张守攻;齐力旺;陈小强;陈瑞阳;宋文芹;;杨树——林木基因组学研究的模式物种[A];提高全民科学素质、建设创新型国家——2006中国科协年会论文集[C];2006年
7 王斌;;Cloning and genetic transformation of a novel rice gene OsAPT2[A];提高全民科学素质、建设创新型国家——2006中国科协年会论文集[C];2006年
8 吴洁;周宇;张雪梅;阎文昭;;幽门螺杆菌热休克蛋白基因HspB-C对甘薯遗传转化的研究[A];中国核科学技术进展报告——中国核学会2009年学术年会论文集(第一卷·第8册)[C];2009年
9 陈新露;赵祥云;刘建斌;李德美;;RAPD技术在园艺植物种质资源研究中的应用[A];中国园艺学会首届青年学术讨论会论文集[C];1994年
10 汪炳良;陈竹君;张明方;郭得平;;榨菜胞质雄性不育系内源激素代谢特点的初步研究[A];中国科协第3届青年学术年会园艺学卫星会议暨中国园艺学会第2届青年学术讨论会论文集[C];1998年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 林荔辉;应用分子和常规技术通过籼粳交选育亲籼型水稻雄性不育系[D];福建农林大学;2010年
2 王发明;柚(citrus grandis Osbeck)单染色体AFLP分子标记体系及文库的建立[D];福建农林大学;2010年
3 刘成;多年生簇毛麦基因组新重复序列的分离及其在小麦抗病新种质鉴定中的应用[D];电子科技大学;2010年
4 王品美;酵母甘油代谢工程与基因组重排构建乙醇高产菌株及相关机理研究[D];浙江大学;2010年
5 曾兴权;小麦抗条锈病种质的鉴定及其抗性相关基因的差异表达和克隆[D];西北农林科技大学;2010年
6 张新梅;甘蓝显性雄性不育基因Ms-cd1的精细定位[D];西北农林科技大学;2010年
7 朱彦涛;甘蓝型油菜Polima CMS和陕2A CMS的形态和生化特征及其胞质遗传物质的比较研究[D];西北农林科技大学;2010年
8 赵会芳;新型大白菜Ogura细胞质雄性不育系RC_7不育机理研究[D];西北农林科技大学;2010年
9 张石柱;球孢白僵菌中疏水蛋白基因功能的研究[D];重庆大学;2010年
10 蒋苏;黄瓜侧枝相关性状的QTL定位分析和nlb基因的初步定位[D];上海交通大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李良;湖北省油茶优良单株遗传多样性及品质初步分析[D];华中农业大学;2010年
2 张庆福;枳精氨酸脱羧酶基因(PtADC)转化烟草提高抗脱水研究[D];华中农业大学;2010年
3 魏礼玲;MYB转录因子家族相关EST干涉载体构建及遗传转化的研究[D];华中农业大学;2010年
4 冯付春;水稻细胞质雄性不育系育性稳定性和柱头外露率遗传基础研究[D];华中农业大学;2010年
5 晁园;利用重组自交系群体定位水稻品质相关性状QTL[D];华中农业大学;2010年
6 张庆路;利用重组自交系群体定位一般配合力相关性状QTL[D];华中农业大学;2010年
7 陈镇;长、短光周期敏感雄性不育水稻幼穗育性相关蛋白差异分析[D];华中农业大学;2010年
8 樊志明;萝卜甘蓝双二倍体雄性不育性的遗传及细胞学研究[D];华中农业大学;2010年
9 高伟;四倍体棉种的遗传多样性分析[D];华中农业大学;2010年
10 王俊义;水稻光温敏不育系华201S的白叶枯病抗性改良研究[D];华中农业大学;2010年
【同被引文献】
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1 张立荣,徐大庆,刘大群;SSR和ISSR分子标记及其在植物遗传育种研究中的应用[J];河北农业大学学报;2002年01期
2 卓德艮,叶正祥,汪训明;正常和细胞质雄性不育水稻线粒体DNA限制性内切酶的酶切图谱分析[J];复旦学报(自然科学版);1988年04期
3 国伟,王莹,詹小鸣,柴建华,汪训明,许仁林;水稻线粒体atp6基因的克隆及其结构分析[J];复旦学报(自然科学版);1994年02期
4 杨华德;陈芳远;;野败型杂交水稻不育性及恢复性的遗传研究[J];广西农学院学报;1990年02期
5 胡锦国;水稻雄性不育性遗传分析指标的探讨[J];华中农学院学报;1983年03期
6 刘一农,李继耕;玉米叶绿体与细胞质雄性不育性[J];科学通报;1983年01期
7 孙寰;赵丽梅;黄梅;;大豆质-核互作不育系研究[J];科学通报;1993年16期
8 陈洪,朱立煌,陈美玲,钱前,闵绍楷;杂交水稻汕优63杂种纯度的RAPD鉴定[J];科学通报;1996年09期
9 王培田;;水稻雄性不育性的遗传机理[J];辽宁农业科学;1978年02期
10 张恒庆,安利佳,祖元刚;红松RAPD实验中各组成成份含量对实验结果的影响[J];植物研究;1999年02期
【二级引证文献】
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1 付习;非洲稻质源CMS的遗传特异性及其AFLP分析[D];华中农业大学;2011年
【二级参考文献】
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1 杨蜀岚,伏健民,杨仁崔,王斌;培矮64s为不育系的两系杂交稻杂种纯度的RAPD鉴定[J];福建农业大学学报;1998年01期
2 万邦惠;;对水稻质核雄性不育分类的初步意见[J];广西农业科学;1979年07期
3 石明松;晚粳自然两用系选育及应用初报[J];湖北农业科学;1981年07期
4 张桂权,卢永根,刘祚昌,赵世民;水稻线粒体基因组翻译产物与细胞质雄性不育性[J];华南农业大学学报;1990年03期
5 赵衍,翁醒华,胡华萃,明镇寰,费承伟,沈桂芳,唐愫,汪训明,柴建华;水稻叶绿体DNA的分离纯化及其限制酶切分析[J];杭州大学学报(自然科学版);1991年03期
6 徐孟亮,刘文芳,肖翊华;湖北光敏核不育水稻幼穗发育中1AA的变化[J];华中农业大学学报;1990年04期
7 张自国,曾汉来,元生朝,张端品,王本宣,李玉珍;再论光敏核不育水稻育性转换的光温作用模式[J];华中农业大学学报;1992年01期
8 邓景扬,高忠丽;小麦显性雄性不育基因的发现、鉴定及其在遗传学和育种学上的价值[J];中国科学(B辑 化学 生物学 农学 医学 地学);1982年01期
9 谢纬武,康传红,王继志,王斌,郭德栋;一种新型甜菜胞质雄性不育系的分子生物学鉴定[J];中国科学C辑:生命科学;1996年02期
10 惠东威,顾京,刘凤华,张耕耘,陈受宜,庄炳昌,王玉民,徐豹;利用RAPD对大豆属植物系统学研究的初报[J];科学通报;1994年02期
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2 尹华奇,武小金;水稻雄性不育系的分类方法初探[J];杂交水稻;1991年05期
3 李竞雄,周洪生;粮、棉、油作物雄性不育杂种优势基础研究的现状与展望[J];作物杂志;1993年04期
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5 ;水稻雄性不育和杂种优势的利用[J];上海农业科技;1975年09期
6 汤日圣,梅传生,张金渝,蔡小宁,吴光南;TO3诱导水稻雄性不育与内源激素的关系[J];江苏农业学报;1996年02期
7 游艾青;国际水稻所发现新的水稻雄性不育细胞质源[J];杂交水稻;1992年06期
8 王熹;水稻生长发育的化学调控讲座(7)──水稻雄性不育的化学诱导[J];中国稻米;1995年05期
9 ;1972年水稻雄性不育试验小结[J];湖南农业科学;1972年02期
10 张瑞祥;;用链霉素诱导水稻雄性不育的初步探讨[J];江西农业科技;1981年08期
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1 严玉平;马春红;郭秀林;雷宇华;闫芝芬;李广敏;;水稻雄性不育细胞质及其正常细胞质mtDNA差异及与抗稻瘟病菌的关系[A];中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编[C];2003年
2 徐建军;王宝和;梁国华;;水稻光温敏雄性核不育系广占63S不育基因ptgms2-1的精细定位和候选基因分析[A];江苏省遗传学会第八届会员代表大会暨学术研讨会论文集[C];2010年
3 田志宏;李文娟;赵福永;黄显波;许本波;严寒;何勇;谢伶俐;;水稻三明显性核不育的育性特征及其分子标记的初步研究[A];基因开启未来:新时代的遗传学与科技进步——湖北省遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2009年
4 刘树;楠潘磊;丁毅;;水稻花粉发育过程中多糖多光谱显微定量分析研究[A];基因开启未来:新时代的遗传学与科技进步——湖北省遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2009年
5 温贵兰;李永明;;抗新城疫单克隆抗体的制备与特异性分析[A];生命科学与微生物专辑[C];2004年
6 郭锡杰;金勇丰;杨明观;张耀洲;;重组人干细胞因子在家蚕培养细胞和虫体内表达[A];中国蚕学会第三届青年学术研讨会暨浙江省第二届青年学术论坛——蚕桑分论坛论文集(上册)[C];2001年
7 陈明杰;谭琦;曹晖;王南;黄为一;潘迎捷;;mRNA差别显示技术分离草菇低温诱导基因[A];全国第6届食用菌学术研讨会论文集[C];2001年
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1 马竹 湖北省科协、湖北省作协组稿;朱英国院士的泥腿子情结[N];大众科技报;2008年
2 皮曙初 项俊平;“农田院士”朱英国[N];新华每日电讯;2011年
3 本报记者 文热心 肖军 黄巍 通讯员 蒋晓红;国之瑰宝[N];湖南日报;2009年
4 徐兰山;人类反饥饿史上光辉的一页[N];科技日报;2004年
5 钟久蔚;E型杂交稻晚籼组合ek优4480通过鉴定[N];农民日报;2005年
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4 孙凡;水稻OsPDCD5基因的功能研究和应用及油菜csRRM2结构域在棉花中的功能鉴定[D];复旦大学;2011年
5 罗越华;水稻反向温敏雄性不育机制的研究[D];海南大学;2008年
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10 李莉;水稻花药发育控制基因OsADF的功能分析[D];中南大学;2011年
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1 裴得胜;水稻线粒体不育基因RAPD标记筛选、克隆测序及特异性分析[D];西南农业大学;2003年
2 张曼华;一个水稻雌雄不育突变基因的精细定位及候选基因的克隆[D];四川农业大学;2011年
3 吴照祥;水稻雌配子发育相关基因FGA1的克隆与初步功能分析[D];福建农林大学;2011年
4 舒友菊;K型和冈型水稻细胞质线粒体DNA的AFLP分析[D];重庆大学;2007年
5 罗凤燕;水稻vdac、ant及HL-sp1基因的表达研究[D];中南民族大学;2010年
6 刘庄;水稻矮秆、鞘包穗突变体结构研究[D];华南热带农业大学;2007年
7 秦延春;新型分子标记技术与水稻雄性不育遗传标记研究[D];广西大学;2008年
8 付磊;一份隐性雄性核不育水稻材料的遗传分析及基因定位[D];四川农业大学;2009年
9 胡欣;水稻内源茉莉酸定量检测及其含量变化与颖花开放的关系[D];江西农业大学;2011年
10 李炜;水稻线粒体mxⅡ基因在CMS中功能的初步研究[D];中南民族大学;2011年
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